Antibacterial activity of the skin secretion of Phyllomedusa azurea (Anura: Hylidae) from the Central Brazil Cerrado / Actividad antibacterial de secreciones de la piel de Phyllomedusa azurea (Anura: Hylidae) en Cerrado, Brasil centro

Abstract Phyllomedusa azurea is a frog species well distributed geographically in South America, including Brazilian biomes as Pantanal and Cerrado. Compared with other anurans from the Phyllomedusinae family, there are few reports on the bioactive potential of skin-derived molecules from this species. In this perspective, the aim of the present study was to evaluate the in vitro antibacterial activity of skin secretion of P. azurea by detection of Minimum Inhibitory Concentration (MIC) of the growth of bacterial indicator strains and to determine if occurs a changing in the bacterial cell envelope permeability. The MIC determination was carried out by the microdilution plate method. The absorbance was measured and analyzed statistically using the t-test to compare two groups (0.05 % of significance). The impact of the crude extract on cell envelope permeability of Staphylococcus aureus ATCC 25923 was conducted by the crystal violet assay, and the absorbance was measured spectrophotometry followed by the calculation of the crystal violet uptake percentage. The specific MIC for S. aureus ATCC 25923 and Escherichia coli ATCC 25922 was 31.25 µg/mL, while for Bacillus subtilis ATCC 6633 was 125 µg/mL and Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 was 250 µg/mL. The treatment with crescent concentrations of frog skin secretion increased the crystal violet uptake by S. aureus ATCC 25923 cells, suggesting an action on the cell plasma membrane. The results demonstrated that the skin secretion of P. azurea presents antibacterial activity and merit further investigations to characterize the bioactive molecules.(AU)

Resumen P. azurea es una especie de rana bien distribuida geográficamente en América del Sur, que incluye biomas brasileños como Pantanal y Cerrado. En comparación con otros anuros de Phyllomedusinae, existen pocos informes sobre el potencial bioactivo de las moléculas derivadas de la piel de esta especie. En esta perspectiva, el objetivo del presente estudio fue evaluar la actividad antibacteriana in vitro de la secreción de la piel de P. azurea mediante la detección de la Concentración Inhibitoria Mínima (CIM) del crecimiento de cepas indicadoras bacterianas y determinar si ocurre un cambio en la permeabilidad de la envoltura celular bacteriana. La determinación de MIC se llevó a cabo mediante el método de la placa de microdilución. La absorbancia se midió y se analizó estadísticamente mediante la prueba t para comparar dos grupos (0.05 de significancia). El impacto del extracto crudo sobre la permeabilidad de la envoltura celular de Staphylococcus aureus ATCC 25923 se realizó mediante el ensayo de cristal violeta, y se midió la absorbancia mediante espectrofotometría seguida del cálculo del porcentaje de absorción de violeta cristal. La CIM específica para S. aureus ATCC 25923 y Escherichia coli ATCC 25922 fue 31.25 μg / ml, mientras que para Bacillus subtilis ATCC 6633 de 125 μg / ml y Pseudomonas aeruginosa ATCC 27853 de 250 μg / ml. El tratamiento con concentraciones crecientes de secreción de piel de rana aumentó la absorción de violeta cristal por las células de S. aureus ATCC 25923, sugiriendo una acción sobre la membrana plasmática de la célula. Los resultados demostraron que la secreción de la piel de P. azurea presenta actividad antibacteriana y amerita más investigaciones para caracterizar las moléculas bioactivas.(AU)

Enterobacteriaceae ISOLATES FROM THE ORAL CAVITY OF WORKERS IN A BRAZILIAN ONCOLOGY HOSPITAL / Enterobacteriaceae isoladas da cavidade bucal de trabalhadores de hospital oncológico do Centro-Oeste brasileiro

The evaluation of workers as potential reservoirs and disseminators of pathogenic bacteria has been described as a strategy for the prevention and control of healthcare-associated infections (HAIs). The aim of this study was to evaluate the presence of Enterobacteriaceae in the oral cavity of workers at an oncology hospital in the Midwest region of Brazil, as well as to characterize the phenotypic profile of the isolates. Saliva samples of 294 workers from the hospital’s healthcare and support teams were collected. Microbiological procedures were performed according to standard techniques. Among the participants, 55 (18.7%) were colonized by Enterobacteriaceae in the oral cavity. A total of 64 bacteria were isolated, including potentially pathogenic species. The most prevalent species was Enterobacter gergoviae (17.2%). The highest rates of resistance were observed for β-lactams, and 48.4% of the isolates were considered multiresistant. Regarding the enterobacteria isolated, the production of ESBL and KPC was negative. Nevertheless, among the 43 isolates of the CESP group, 51.2% were considered AmpC β-lactamase producers by induction, and 48.8% were hyper-producing mutants. The significant prevalence of carriers of Enterobacteriaceae and the phenotypic profile of the isolates represents a concern, especially due to the multiresistance and production of AmpC β-lactamases.

A investigação de trabalhadores dos serviços de saúde como reservatório e disseminadores de bactérias patogênicas tem sido referida como estratégia de prevenção e controle das infecções relacionadas à assistência à saúde. Este estudo buscou avaliar a presença de Enterobacteriaceae na cavidade bucal de trabalhadores de hospital oncológico do Centro-Oeste brasileiro, bem como caracterizar o perfil fenotípico dos isolados. Foi coletada amostra de saliva de 294 trabalhadores pertencentes às equipes de saúde e de apoio. Procedimentos microbiológicos foram realizados segundo técnicas referendadas. Dentre os participantes, 55 (18,7%) estavam colonizados por Enterobacteriaceae na cavidade bucal. Foram isoladas 64 bactérias, incluindo espécies potencialmente patogênicas. A espécie mais prevalente foi Enterobacter gergoviae (17,2%). As maiores taxas de resistências foram observadas para os β-lactâmicos e 48,4% dos isolados foram considerados multirresistentes. Para as enterobactérias pesquisadas, a produção de ESBL e KPC foi negativa. Porém, dentre os 43 isolados do grupo CESP, 51,2% foram considerados produtores de β-lactamase AmpC por indução e 48,8% mutantes hiperprodutores. Considera-se a prevalência de portadores de Enterobacteriaceae significativa e o perfil fenotípico dos isolados preocupante, especialmente pela multirresistência e produção de β-lactamases AmpC.

Contaminação microbiológica em laboratório de reprodução humana e suas implicações no sucesso da reprodução assistida / Microbial contamination in human reproduction laboratory and its implications on the success of human reproduction

A contaminação pode estar presente nas placas de cultivo de embriões advinda de várias origens, haja vista que os materiais coletados masculino e feminino não podem ser esterilizados. Esta contaminação pode comprometer a viabilidade dos embriões, causar infecção gestacional, trazer malformação fetal. Fungicidas e bactericidas são acrescentados aos meios de cultura na tentativa de conter este crescimento microbiológico. Outros métodos preventivos ainda em estudo devem ser avaliados. A contaminação deve ser identificada, para nortear a legislação vigente que regulamenta os protocolos executados durante a reprodução assistida, para garantir a proteção materno-fetal contra microrganismos de importância patogênica. Deve-se avaliar a interferência da contaminação para os embriões e fetos, na tentativa de se estabelecer causas e consequências específicas.

Contamination may be present in the embryos culture arising from various sources boards, given that the materials collected male and female cannot be sterilized. This contamination can compromise embryo viability, gestational cause infection, bringing fetal malformation. Antifungal and antibiotics are increase to the culture media in an attempt to stop this microbiological growth. Preventive methods still under study should be evaluated. The contamination must be identified to guide the legislation that regulates protocols executed during assisted reproduction to ensure maternal fetal protection against pathogenic microorganisms of importance. Should evaluate the interference of contamination for theembryos, fetuses and infants, in an attempt to establish specific causes and consequences.

Perfil dos trabalhadores de um hospital oncológico colonizados na cavidade bucal / Profile of workers in an oncology hospital colonized in the oral cavity by Enterobacteriaceae

O objetivo deste estudo foi caracterizar o perfil dos trabalhadores de um hospital oncológico colonizados na cavidade bucal por Enterobacteriaceae. Foram investigadas as variáveis sociodemográficas, profissionais, comportamentais, de doença/infecção e colonização bacteriana. A coleta de saliva e as análises microbiológicas foram realizadas por técnicas padronizadas; a coleta de dados, por meio da aplicação de formulário. Dentre os 55 trabalhadores colonizados por Enterobacteriaceae, 56,4 por cento (31/55) também albergavam na cavidade bucal Staphylococcus e/ou Pseudomonas. A categoria profissional mais comumente colonizada foi a de técnico de enfermagem. Quadros frequentes de doença/infecção foram relatados entre os portadores. Os dados apresentados revelaram uma realidade preocupante para o contexto da assistência à saúde. Considera-se que estes resultados contribuem com subsídios importantes para os programas de prevenção e controle de infecção, visto que o conhecimento do estado de portador reduz os riscos de transmissão de micro-organismos.

Profile of workers in an oncology hospital colonized in the oral cavity by Enterobacteriaceae. The aim of this study was to characterize the profile of workers of the oncology hospital colonized by Enterobacteriaceae in the oral cavity. Along with bacterial colonization, socio-demographic,professional, disease/ infection and behavioral variables were investigated. The collection of saliva and microbiological analyses were performed using standard techniques. Data collection was conducted through a questionnaire. Among the 55 professionals colonized by Enterobacteriaceae, 56.4 percent (31/55) also harbored Staphylococcus and/or Pseudomonas in the oral cavity. The mostcommonly infected professionals were nursing technicians. Episodes of disease/infection were reported among carriers. The data revealed a worrying situation in the context of healthcare. It is hoped that these results will contribute to the prevention and control of this infection, as knowledge of carrier status reduces the risk of microorganism transmission.

Resistência antimicrobiana associada em isolados clínicos de Enterococcus spp / Associated antimicrobial resistance in Enterococcus spp. clinical isolates

INTRODUÇÃO: O aumento da prevalência de isolados de enterococos em hospitais, particularmente Enterococcus resistente à vancomicina (VRE), é importante por causa da limitada terapia antimicrobiana efetiva para o tratamento de infecções enterocócicas. MÉTODOS: O presente trabalho apresentou uma investigação retrospectiva de dados de suscetibilidade in vitro quantitativa para uma variedade de antimicrobianos frente aos isolados de Enterococcus spp. e avaliação da associação de resistência entre os agentes antimicrobianos apontados como escolha para o tratamento de infecções causadas por VRE, através do cálculo do risco relativo. RESULTADOS: Dos 156 isolados de enterococos, 40 (25,6 por cento) foram resistentes a três ou mais antimicrobianos, incluindo 7,7 por cento (n = 12/156) resistentes à vancomicina. A associação de resistência elevada foi mais pronunciada entre os isolados de VREs com antimicrobianos alternativos e primários para o tratamento de infecções causadas por estes patógenos, incluindo ampicilina (100 por cento, RR = 7,2), estreptomicina (90,9 por cento, RR = 4,9), rifampicina (91,7 por cento, RR = 3,1) e linezolida (50 por cento, RR = 11,5), apesar da alta taxa de suscetibilidade a esta droga (94,9 por cento). CONCLUSÕES: A resistência associada significativa aos antimicrobianos de primeira escolha e alternativos, usados no tratamento de infecções graves por cepas com o fenótipo VRE e que requerem um regime terapêutico combinado, evidencia alternativas terapêuticas ainda mais limitadas na instituição analisada.

INTRODUCTION: The increasing prevalence of enterococci strains in hospitals, particularly among isolates of vancomycin-resistant enterococci (VRE), poses important problems because of the limited effect of antimicrobial therapy for enterococcal infections. METHODS: This work presents a retrospective investigation of quantitative in vitro susceptibility data for the range of antimicrobials against Enterococcus spp. isolates and evaluation of the association of resistance between antimicrobial agents recommended as the treatment of choice for infections caused by VRE through calculation of the relative risk. RESULTS: Of the 156 enterococci isolates, 40 (25.6 percent) were resistant to 3 or more antimicrobials, including 7.7 percent (n = 12/156) vancomycin resistant. The association of elevated resistance was more pronounced among VRE isolates against alternative and primary antimicrobials for the treatment of infections caused by these pathogens, including ampicillin (100 percent, RR = 7.2), streptomycin (90.9 percent, RR = 4.9), rifampin (91.7 percent, RR = 3.1) and linezolid (50 percent, RR = 11.5), despite high susceptibility to this drug (94.9 percent). CONCLUSIONS: The significant associated resistance to alternative and first choice antimicrobials used in the treatment of serious infections of strains with the VRE phenotype and that require a combined therapeutic regime, revealed even more limited therapeutic alternatives in the institution analyzed.

Avaliação da resistência antimicrobiana associada em isolados clínicos de Klebsiella spp, Escherichia coli, Enterobacter spp em um Hospital Público de Goiânia, GO-Brasil / Determination of associated antimicrobial resistance in Klebsiella spp, Escherichia coli and Enterobacter spp clinical isolates at a public hospital in Goiania city, Brazil

A determinação do nível de resistência em patógenos bacterianos associada a várias classes de drogas tem grande importância, especialmente para auxiliar nos protocolos terapêuticos. Entre janeiro de 2006 e dezembro de 2008, foi realizada uma análise retrospectiva de dados de suscetibilidade in vitro para uma ampla variedade de antimicrobianos com o fim de quantificar a resistência associada a um antimicrobiano na presença e ausência a outros em isolados de Escherichia coli (n=515), Klebsiella spp (n=653) e Enterobacter spp (n=507). Entre os isolados de Klebsiella spp e E. coli, produtores de ESBL (54,7 por cento - 357/653 e 15,3 por cento - 79/515, respectivamente), foram observadas significantes taxas de resistência associada aos antimicrobianos não relacionados - aminoglicosídeos, ciprofloxacina e sulfametoxazol-trimetoprim. A resistência de Enterobacter spp à cefepima foi associada com um marcante aumento na resistência a todos os outros agentes testados (superior a 80 por cento), exceto à amplicilina-sulbactam (58,7 por cento). Estes dados claramente indicam que a resistência associada não é limitada a uma combinação de uma droga em particular, mas é um evento geral que demonstra a necessidade de maior cautela com relação à terapia empírica, uma vez que é um problema clínico relevante com relação às opções terapêuticas que são afetadas pela presença de resistência associada a drogas não relacionadas.

Determinação da resistência antimicrobiana associada em isolados clínicos de Staphylococcus aureus e Pseudomonas aeruginosa em um hospital público de Goiânia, Estado de Goiás / Determination of associated antimicrobial resistance in clinical isolates of Staphylococcus aureus and Pseudomonas aeruginosa in a public hospital in Goiânia, State of Goiás

Este estudo avaliou a resistência antimicrobiana associada de Pseudomonas aeruginosa e Staphylococcus aureus a um agente antimicrobiano com outras drogas. A resistência antimicrobiana associada foi calculada através do risco relativo. Houve uma relação óbvia entre resistência à oxacilina e a outros agentes antimicrobianos entre os isolados de Staphylococcus aureus resistentes à oxacilina (68,5 por cento) superior a 32 por cento, com exceção da linezolida (6,7 por cento). Resistência associada pronunciada entre drogas foi observada para isolados de Pseudomonas aeruginosa, particularmente entre ciprofloxacina e os carbapenens (59,6 por cento a 60,7 por cento), entre aminoglicosídeos e carbapenens (66,3 por cento a 67,7 por cento) e os demais β-lactâmicos (52,3 por cento a 85,8 por cento). O presente trabalho enfatiza a importância da cultura diagnóstica e do teste de suscetibilidade na seleção de um correto agente antimicrobiano com relação ao impacto clínico no aumento da multirresistência e na seleção de resistência antimicrobiana associada.

This study evaluated the associated antimicrobial resistance of Pseudomonas aeruginosa and Staphylococcus aureus in relation to an antimicrobial agent with other drugs. The associated antimicrobial resistance was calculated by means of the relative risk. There was an obvious relationship between oxacillin resistance and resistance to other antimicrobial agents among isolates of oxacillin-resistant Staphylococcus aureus (68.5 percent), greater than 32 percent, except for linezolid (6.7 percent). Pronounced associated resistance among drugs was observed for Pseudomonas aeruginosa isolates, particularly for ciprofloxacin and carbapenems (59.6 percent to 60.7 percent) and for aminoglycosides and carbapenems (66.3 percent to 67.7 percent) and other β-lactam antibiotics (52.3 percent to 85.8 percent). The present study emphasizes the importance of diagnostic cultures and susceptibility testing for selecting the correct antimicrobial agent, with regard to the clinical impact of increased multiresistance and selection of associated antimicrobial resistance.

Detecção de metalo-beta-lactamase em Pseudomonas aeruginosa isoladas de pacientes hospitalizados em Goiânia, Estado de Goiás / Detection of metallo-beta-lactamase in Pseudomonas aeruginosa isolated from hospitalized patients in Goiânia, State of Goiás

Pseudomonas aeruginosa é uma bactéria frequentemente isolada no ambiente hospitalar. Este estudo teve como objetivo avaliar o perfil de suscetibilidade de Pseudomonas aeruginosa previamente isoladas de pacientes internados em um hospital de Goiânia (Goiás-Brasil); realizar a triagem fenotípica para a produção de metalo-beta-lactamase e detectar os genes das mesmas pela técnica de "Polimerase Chain Reaction". Foram avaliadas 75 Pseudomonas aeruginosa isoladas no período de janeiro de 2005 a janeiro de 2007. A identificação bioquímica foi realizada pelo sistema API 20E® e o antibiograma pelo método de Kirby-Bauer. Entre os 62 isolados que foram resistentes ao imipenem e à ceftazidima, 35 (56,4 por cento) apresentaram produção de metalo-beta-lactamase e em 26 (74,3 por cento) destes, foi detectado o gene blaSPM-1. A frequência de Pseudomonas aeruginosa produtoras de metalo-beta-lactamase sugere um maior controle da disseminação de resistência no ambiente hospitalar.

Pseudomonas aeruginosa is a bacterium frequently isolated from hospital environments. This study had the aims of evaluating the susceptibility profile of Pseudomonas aeruginosa previously isolated from patients in a hospital in Goiânia (Goiás, Brazil), performing phenotypic screening for metallo-beta-lactamase production and detecting its genes using the polymerase chain reaction technique. Seventy-five 75 Pseudomonas aeruginosa isolates were evaluated between January 2005 and January 2007. Biochemical identification was performed using the API 20E® system and an antibiogram was produced using the Kirby-Bauer method. Among the 62 isolates that were resistant to imipenem and ceftazidime, 35 (56.4 percent) produced metallo-beta-lactamase, while 26 (74.3 percent) showed the blaSPM-1 gene. The frequency of Pseudomonas aeruginosa that produces metallo-beta-lactamase suggests that greater control over the dissemination of resistance in hospital environments is needed.

Enzymatic activity of endophytic bacterial isolates of Jacaranda decurrens Cham. (Carobinha-do-campo)

O objetivo deste trabalho foi isolar bactérias endofíticas de Jacaranda decurrens Cham. e selecionar algumas enzimas de interesse biotecnológico. Dez espécies de bactérias foram isoladas e identificadas de caule e folhas. Todos os isolados de apresentaram atividade enzimática, e a maior predominância foi de atividade proteolítica (60%) e atividade amilolítica (60%), seguidas atividades lipolítica (40%) e esterásica (40%). Contudo, as atividades celulolítica e pectinolítica não foram detectadas. Este é o primeiro relato de isolamento e identificação de bactérias presentes em Jacaranda decurrens Cham.

Candida albicans isoladas da cavidade bucal de crianças com síndrome de Down: ocorrência e inibição do crescimento por Streptomyces sp / Candida albicans isolated from buccal cavity of children with Down's syndrome: occurrence and growth inhibition by Streptomyces sp

Comparação entre a presença de leveduras de Candida na cavidade bucal de crianças sem e com síndrome de Down mostrou-se estatisticamente significante no caso de crianças afetadas por esta cromossomopatia, tornando-as mais predispostas à candidíase bucal, provavelmente favorecida pelas alterações anátomo-fisiológicas da boca em decorrência da trissomia do cromossomo 21. Recidivas constantes de candidíase bucal em crianças portadoras desta alteração cromossômica levou a busca de prováveis alternativas terapêuticas. Visando determinar a atividade antifúngica de Streptomyces sp isolados de diferentes solos brasileiros, 5 cepas foram testadas frente a Candida albicans, oriundas da cavidade bucal de crianças com síndrome de Down. Observou-se que os isolados apresentaram uma diversidade de tamanho dos halos (9-31mm de diâmetro) de inibição de crescimento das leveduras, sugerindo uma possível utilização em terapêutica antifúngica.

Avaliaçäo microbiológica de equipamentos que entram em contato com a carne bovina durante o abate, em matadouros-frigoríficos de Goiânia, GO / Microbiologiacl evalluatin of equipment utilized in slaughterhouses in the city of Goiania, Brazil

Foram avaliadas microbiologicamente 26 amostras de equipamentos que entram em contato com a carne bovina, provenienyes de dois matadouros-frigoríficos de Goiânia, com o objetivo de verificar suas condiçöes higiênico-sanitárias, através das contagens padräo em placas de icrorganismos aeróbios e/ou facultativos mesófilos, psicrotróficos, bolores e leveduras, coliformes totais, estatilococos coagulase positivos e pesquisa de bactérias pertencentes ao gênero Salmonella. Verificou-se que 100 por cento das amostras analisadas apresentaram contagens de mesófilos, 42,3 por cento de psicrotróficos, 19,2 por cento de bolores e leveduras, 73,1 por cento de coliformes totais e 3,8 por cento de estafilococos coagulase positivos. Näo foi detectada a presença de Salmonella sp nos equipamentos (mesas e bandejas de aço inoxidável e serras elétricas) estudados. As serras elétricas mostraram-se mais contaminadas do que as mesas e bandejas de aço inoxidável. Observou-se, ainda, que os equipamentos apresentarm condiçöes higiênicas insatisfatórias, e as serras, condiçöes sanitárias adotados pelos matadouros-frigoríficos avaliados näo foram realizados de maeira satisfatória, como é proconizado pelo Serviço de Inspeçäo Sanitária Federal.

Aspectos higiênico-sanitários de utensílios utilizados em salas de abate de matadouros de Goiânia / The hygienic and sanitary conditions of utensils have contact with carcasses from Goiânia slaugterhouses

Foram analisadas 34 amostras de utensílios utilizados em salas de abate de matadouros de Goiânia/GO, que entram em contato com a carne bovina, com a finalidade de avaliaçäo microbiológica de suas condiçöes higiênico-sanitárias, através das contagens padräo em placas de microrganismos aeróbios e/ ou facultativos mesófilos e psicrotróficos, bolores e leveduras, coliformes totais, estafilococos coagulase positiva e pesquisa de bactérias pertencentes ao gênero Salmonella. Os resultados obtidos revelaram a ocorrência de mesófilos em 100 por cento, psicotróficos em 58,8 por cento, bolores e leveduras em 50 por cento, coliformes totais em 76,5 por cento e estafilococos coagulase positiva em 23,5 por cento das amostras. Näo foram isoladas bactérias do gênero Salmonella nas amostras estudadas. Dos utensílios analisados, facas, ganchos, cestas e bandejas plásticas, as cestas plásticas mostraram-se mais contaminadas. Os resultados revelaram ainda que os utensílios apresentaram condiçöes higiênicas insastifatórias, sendo que as cestas plásticas também apresentaram condiçöes sanitárias insatisfatórias. Pôde-se observar, ainda, que os procedimentos de higiene dos utensílios adotados pelos matadouros, de acordo com recomendaçäo da Inspeçäo Sanitária Federal, näo säo utilizados de forma homogênea e sistemática.