Evaluación de tres pruebas serológicas para la detección de anticuerpos contra el virus linfotrópico T humano tipo 1 (HTLV-1)

Introducción: El Perú es endémico al virus linfotrópico T humano tipo 1 (HTLV-1), por esas razones es importante conocer la fiabilidad de las pruebas diagnósticas que se usan en el país, con la finalidad de continuar o no su uso. El objetivo fue evaluar el rendimiento de tres pruebas serológicas ELISA Murex, ELISA Wantai e IFI INS-Perú para la detección de anticuerpos anti HTLV-1 frente a muestras peruanas. El estudio. Las tres pruebas fueron evaluadas frente a 382 sueros: 215 positivos y 167 negativos a HTLV-1 (Gold Standar: inmunoblot). Hallazgos. IFI no presentó falsos positivos, Wantai tuvo más falsos negativos (siete) y Murex más falsos positivos (ocho). Las tres pruebas mostraron resultados superiores a 95% para los parámetros estimados de exactitud diagnóstica. Conclusiones. IFI INS-Perú y ELISA Murex tuvieron buen rendimiento diagnóstico para la detección de anticuerpos contra HTLV-1 y son buenos candidatos para continuar siendo usados en Perú.

Background: Peru is endemic to the human T-lymphotropic virus type 1 (HTLV-1), for these reasons it is important to know the reliability of the diagnostic tests used in the country, in order to continue their use or not. The objective was to evaluate the performance of three serological tests ELISA Murex, ELISA Wantai and IFI INS-Peru for the detection of anti-HTLV-1 antibodies against Peruvian samples. The study. The three tests were evaluated against 382 sera: 215 positive and 167 negative for HTLV-1 (Gold Standard: immunoblot). Findings. IFI had no false positives, Wantai had more false negatives (seven) and Murex more false positives (eight). The three tests showed results above 95% for the estimated parameters of diagnostic accuracy. Conclusions. IIF INS-Perú and ELISA Murex had good diagnostic performance for the detection of antibodies against HTLV-1 and are good candidates to continue being used in Peru.

Frequency of anti-neutrophil cytoplasmic antibodies in patients with systemic lupus erythematosus / Frecuencia de los anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo en pacientes con lupus eritematoso sistémico

ABSTRACT Introduction: Systemic lupus erythematosus (SLE) is a multisystem autoimmune disease. Patients with SLE exhibit multiple serum autoantibodies, including anti-neutrophil cytoplasmic antibodies (ANCAs). There are two main techniques to detect ANCAs: indirect immunofluorescence (IIF) and enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA). In this study, an attempt was made to determine the frequency and clinical associations of ANCAs in patients with SLE. Methods: A cross-sectional study was conducted in a tertiary care hospital in Colombia that included 74 patients with SLE. The presence of ANCAs was assessed using IIF with ethanol-fixed slides, and ELISA was used to detect antibody specificities for myeloperoxidase (MPO)-ANCA and proteinase 3 (PR3)-ANCA. Results: Of the 74 patients with SLE evaluated, 60 (81.1%) of them were ANCA-positive by IIF. By contrast, only one patient showed specificity for PR3-ANCA by ELISA. The relevance of ANCA positivity by IIF and clinical and serological features was significant for renal involvement (p = .0174), and Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index (SLEDAI) (p = .0308). Conclusion: ANCAs are common in the serum of patients with SLE, as detected by ethanol-fixed slides with IIF staining. However, detection of specificity to PR3 and/or MPO is rare, thus highlighting the importance of detecting these autoantibodies by different techniques.

RESUMEN Introducción: El lupus eritematoso sistémico (LES) es una enfermedad autoinmune sistémica. Los pacientes con LES muestran múltiples autoanticuerpos séricos, incluyendo los anticuerpos anticitoplasma de neutrófilo (ANCA, por sus siglas en inglés). Existen 2 técnicas principales para la detección de ANCA: inmunofluorescencia indirecta (IFI) y ensayo por inmunoadsorción ligado a enzimas (ELISA). En este estudio nuestro objetivo fue determinar la frecuencia y las asociaciones clínicas de los ANCA en pacientes con LES. Métodos: Realizamos un estudio transversal de 74 pacientes con LES en un hospital de alta complejidad de Colombia. La presencia de ANCA se evaluó por IFI, utilizando láminas con fijación de etanol, y con ELISA para determinar las especificidades para mieloperoxidasa (MPO)-ANCA y proteinasa 3 (PR3)-ANCA. Resultados: Fueron evaluados 74 pacientes con LES, 60 (81,1%) de ellos fueron positivos para ANCA. Por el contrario, solo un paciente mostró especificidad para PR3-ANCA por ELISA. La relación entre la positividad para ANCA por IFI y las características clínicas y serológicas fue estadísticamente significativa para compromiso renal (p = 0,0174) y para el índice de actividad de la enfermedad (Systemic Lupus Erythematosus Disease Activity Index [SLEDAI]) (p = 0,0308). Conclusiones: Los ANCA detectados mediante fijación con etanol por técnicas de IFI, son comunes en pacientes con LES. Sin embargo, la detección de especificidades para PR3 o MPO es rara; se destaca la importancia de la evaluación de estos autoanticuerpos mediante diferentes técnicas.

Patrones diferenciales entre Leishmaniasis y chagas, empleando epimastigotes de Trypanosoma cruzi / Differential patterns between leishmaniasis and chagas disease using Trypanosoma cruzi epimastigotes

En diferentes regiones de Latinoamérica la infección por T. cruzi y Leishmania se superponen, por lo cual se reportan infecciones mixtas circulantes, debido a esto; deben realizarse pruebas diagnósticas específicas para evitar reacciones cruzadas entre estas dos patologías. OBJETIVO: determinar patrones de fluorescencia que permitan la diferenciación entre Leishmaniasis, enfermedad de Chagas e infección mixta empleando epimastigotes de T. cruzi. MÉTODOS: se empleó la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta utilizando epimastigotes de T. cruzi (TcV autóctono) como antígeno figurado frente a un panel de muestras de suero codificados como A, B, C y D correspondientes a pacientes con infección por: Leishmaniasis (A), Infección mixta por Leishmania y Chagas(B), Enfermedad de Chagas (C) y sin ninguna de las dos infecciones (D). RESULTADOS: en los cuatro paneles de muestras se observaron diferentes patrones de intensidad de fluorescencia a nivel de membrana y núcleo de los epimastigotes de T. cruzi (TcV autóctono). CONCLUSIONES: la técnica de Inmunofluorescencia (IFI) con antígenos de epimastigotes de T. cruzi a demostrado utilidad en la diferenciación entre enfermedad de Chagas, Leishmaniasis y/o infecciones mixtas por ambos parásitos en aquellas zonas donde la coexistencia de ambas es habitual

In different regions of Latin America, infection by T. cruzi and Leishmania overlap, for which mixed circulating infections are reported, due to this; Specific diagnostic tests must be performed to avoid cross reactions between these two pathologies. OBJECTIVE: to determine fluorescence patterns that allow the differentiation between Leishmaniasis, Chagas disease and mixed infection using T. cruzi epimastigotes. METHODS: the Indirect Immunofluorescence technique was used using epimastigotes of T. cruzi (autochthonous TcV) as figurative antigen against a panel of serum samples coded as A, B, C and D corresponding to patients with infection by: Leishmaniasis (A) , Mixed infection by Leishmania and Chagas (B), Chagas disease (C) and without either of the two infections (D). RESULTS: in the four sample panels, different patterns of fluorescence intensity were observed at the membrane and nucleus level of the epimastigotes of T. cruzi (autochthonous TcV). CCONCLUSIONS: the Immunofluorescence technique (IFI) with T. cruzi epimastigote antigens has proven useful in differentiating between Chagas disease, Leishmaniasis and / or mixed infections by both parasites in areas where the coexistence of both is common.

Detección de anticuerpos contra Neospora caninum en caninos del área urbana y rural de Cumaral, Meta-Colombia

RESUMEN Objetivo. Estimar la seroprevalencia a Neospora caninum en caninos del área urbana y rural de Cumaral, Meta y determinar algunos factores de riesgo asociados a la seropositividad. Materiales y métodos. Se efectuó un estudio transversal en 222 perros (112 perros del área urbana y 110 del área rural). El tamaño de la muestra fue calculado en el programa Epidat v. 3.1. Los sueros sanguíneos fueron analizados mediante la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta para IgG con un kit comercial. Los análisis de frecuencias, chi-cuadrado, fueron realizados mediante el paquete estadístico SPSS v. 25.0 Resultados. La seroprevalencia general fue 36.9% (IC95%: 30.9-43.5 %). La seropositividad entre los grupos fue: urbana (38.4 %) y rural (35.5%) (p>0.05), machos (36.9%) y hembras (36.9%) (p >0.05); en cachorros (32.7%), jóvenes (40.0%) y adultos (37.4%) (p>0.05), en contacto con predios pecuarios (40.7%) y sin contacto (35.2%) (p>0.05). Conclusiones. La seroprevalencia observada fue alta en las dos poblaciones analizadas y sugiere que los caninos han estado en contacto con el parásito, posiblemente por diferentes fuentes de infección que requieren ser estudiadas posteriormente.

ABSTRACT Objective. To estimate the seroprevalence to Neospora caninum in canines of the urban and rural area of Cumaral, Meta and determine some risk factors associated with seropositivity. Materials and methods. A cross-sectional study was carried out in 222 dogs (112 dogs from the urban area and 110 dogs from the rural area), the sample size was calculated by using Epidat v program. 3.1. The sera were analyzed using the Indirect Immunofluorescence technique for IgG with a commercial kit. Frequency analyzes by chi-square of independence were performed in SPSS v. 25.0 Results. The general seroprevalence was 36.9% (95% CI: 30.9-43.5%). The seropositivity between the groups was: urban (38.4%) and rural (35.5%) (p>0.05), males (36.9%) and females (36.9%) (p>0.05); in puppies (32.7%), youth (40.0%) and adults (37.4%) (p>0.05), in contact with livestock farms (40.7%) and without contact (35.2 %) (p>0.05), Conclusions. The seroprevalence observed was high in the two populations analyzed and suggests that the canines have been in contact with the parasite, possibly due to different sources of infection that need to be studied later.

Anticuerpos antimitocondriales y anticuerpos contra antígenos extraíbles del núcleo en pacientes con cirrosis biliar primaria / Antimitochondrial Antibodies and antibodies against extractable nucleus antigens in patients with primary biliary cirrhosis

Resumen Objetivo: Determinar la frecuencia de anticuerpos antimitocondriales y de anticuerpos contra antígenos extraíbles del núcleo en pacientes con cirrosis biliar primaria. Material y métodos: Estudio de tipo cuantitativo, observacional y transversal, realizado en el Servicio de Inmunología del Hospital Nacional Arzobispo Loayza entre enero 2018 y marzo 2019. Se revisaron las historias clínicas de 30 pacientes con características presuntivas de cirrosis biliar primaria; para la detección de los anticuerpos antinucleares y anticuerpos antimitocondriales se empleó el kit inmunológico en sangre y observación con microscopio de inmunofluorescencia a 40X y para la detección de los anticuerpos contra antígenos extraíbles del núcleo se empleó el método Immunoblot. Resultados: Se estudiaron 30 pacientes con cirrosis biliar primaria, 20 fueron de sexo femenino (66,7%). El patrón de tinción más frecuente fue el citoplasmático moteado reticular en 17(56,7%), seguido del patrón citoplasmático moteado reticular y patrón moteado en 7(23,3%) pacientes, y en menor frecuencia el patrón citoplasmático moteado reticular y patrón centromérico. Nueve (42,9%) pacientes con cirrosis biliar primaria tenían anti-M2. Se demostró mayor frecuencia, 21(70%) de los pacientes con cirrosis biliar primaria tenían anticuerpos antimitocondriales. Conclusiones: Se encontró alta frecuencia de patrón citoplasmático moteado reticular en pacientes con cirrosis biliar primaria, se demostró asociación significativa con los anti-M2 y anticuerpos antimitocondriales.

Summary Objective: To determine the frequency of antimitochondrial antibodies and antibodies against extractable nucleus antigens in patients with primary biliary cirrhosis. Methods : A quantitative, observational and cross-sectional study was carried out at the Immunology Service of the Arzobispo Loayza National Hospital between January 2018 and March 2019. The medical records of 30 patients with presumptive characteristics of primary biliary cirrhosis were reviewed; for the detection of the antinuclear antibodies and antimitochondrial antibodies, the immunological kit was used in blood and observation with a 40X immunofluorescence microscope, and the Immunoblot method was used for the detection of the antibodies against extractable nucleus antigens. Results: Thirty patients with primary biliary cirrhosis disease were studied, 20 were female (66.7%). The most frequent staining pattern was the reticular mottled cytoplasmic in 17 (56.7%), followed by the reticular mottled cytoplasmic pattern and mottled pattern in 7 (23.3%) patients, and less frequently the reticular mottled cytoplasmic pattern and centromeric. Nine (42.9%) patients with primary biliary cirrhosis had anti-M2. In the present investigation, a higher frequency was demonstrated, 21 (70%) of the patients with primary biliary cirrhosis had antimitochondrial antibodies. Conclusions: A high frequency of reticular mottled cytoplasmic pattern was found in patients with primary biliary cirrhosis; a significant association with anti-M2 and antimitochondrial antibodies was demonstrated.

Infección y enfermedad por Rickettsia spp. del grupo de las fiebres manchadas en pacientes febriles del Urabá antioqueño, Colombia / Rickettsia spp. infection of the group of spotted fevers in febrile patients of the Urabá Antioquia, Colombia

RESUMEN Objetivo: determinar la frecuencia de la infección y enfermedad por Rickettsia spp. del grupo de las fiebres manchadas en pacientes febriles del Urabá antioqueño, que asistieron a centros hospitalarios de la región. Métodos: se incluyeron en el estudio pacientes febriles provenientes de 9 instituciones de salud de la región del Urabá, los cuales fueron encuestados para determinar sus variables clínicas y demográficas. De estos pacientes se obtuvieron muestras de suero durante las fases aguda y convaleciente de la enfermedad. Para cada muestra se determinó la seropositividad (título ≥ 64) y su título de anticuerpos seriados dobles mediante inmunofluorescencia indirecta para IgG contra el antígeno de Rickettsia rickettsii. Resultados: se analizaron 89 pacientes febriles con 89 muestras de fase aguda y 60 en fase convaleciente. Los síntomas más comunes de los pacientes fueron cefalea, ictericia, mialgias, náuseas, dolor abdominal, trombocitopenia y vómito. El 55,1 % de los pacientes provenía de áreas rurales. Se obtuvo seropositividad del 40,4 % con títulos entre 64-512, infección previa en un 33,7 % y rickettsiosis en 6 pacientes (6,7 %). Los pacientes con seroconversión o serorefuerzo provenían de los municipios de Apartadó (n = 2), Chigorodó (n = 1), Necoclí (n = 2) y Turbo (n = 1); el hallazgo clínico más destacado fue la trombocitopenia. Conclusiones: se demostró que la infección y la enfermedad rickettsial continúan siendo activas en la zona del Urabá. Este hallazgo permite alertar a las autoridades de salud de la región para que se brinde tratamiento con antibióticos a los casos sospechosos de manera temprana y de esta forma evitar las muertes o secuelas derivadas de este tipo de infecciones.

SUMMARY Objective: Determine the frequency of infection and disease by Rickettsia spp. of the spotted fever group in febrile patients from Urabá Antioquia attended by hospital centers of the region. Methods: Patients from nine health institutions of the Urabá region were included in the study. These patients received a survey with questions about their clinical and socio-demographic variables. Eighty-nine acutephase serum samples, and 60 convalescent serum samples, were obtained from these patients, and each sample was tested (IgG) by Indirect Immunofluoerscence Assay (IIFA) using a dilution of 1:64 against R. rickettsii. Furtherly, positive sera were tittered by two-fold serial dilutions using the same antigen. Results: Patients showed symptoms such as fever, headache, jaundice, myalgias, nausea, abdominal pain, petechiae, thrombocytopenia and vomiting. Most of these patients came from rural areas (55,1 %). Seropositivity was obtained in 40,4 % patients with titers between 64-512, a 33,7 % with previous infection and the disease was found in 6 patients (6,7 %). Patients with seroconversion, or a fourlfold rise antibody titer between acute and convalescent samples, came from the municipalities of Apartadó (n = 2), Chigorodó (n = 1), Necoclí (n = 2) and Turbo (n = 1), and the most relevant clinical finding was thrombocytopenia in four of the patients. Conclusions: This study demonstrated that infection and rickettsial disease continues being active in the Urabá region. This situation represents a warning for the health authorities of the region and suggests them to provide appropriate treatment to avoid deaths or sequelae derived from this type of infections.

Incidencia y subregistro de casos de leptospirosis diagnosticados con tres métodos diferentes en Urabá, Colombia / Incidence and underreporting of leptospirosis comparing three diagnostic methods in the endemic region of Urabá, Colombia

Resumen Introducción. La leptospirosis representa un problema de salud pública y es una causa importante de morbimortalidad en la región de Urabá, cuya notificación se ve afectada por las deficiencias en el diagnóstico. Objetivo. Establecer la incidencia de la leptospirosis en los municipios del llamado 'eje bananero' de la región de Urabá, documentar la magnitud del subregistro y proponer orientaciones para el diagnóstico por laboratorio por parte de la red de salud pública. Materiales y métodos. Se compararon dos fuentes de información sobre la leptospirosis: el sistema oficial nacional de vigilancia y un estudio transversal de 479 pacientes febriles, llevado a cabo entre abril de 2010 y mayo de 2012. El diagnóstico se hizo con base en tres pruebas: inmunofluorescencia indirecta, microaglutinación y hemocultivo. La exhaustividad de cada fuente de información se estimó mediante el método de captura y recaptura. Resultados. El 58 % (278/479) de los pacientes fueron positivos para leptospirosis, por lo menos, en una de las pruebas y, el 10,43 % (29/278), en las tres. La inclusión de una cepa nativa en el panel de la prueba de microaglutinación aumentó el porcentaje de positividad en 15 %. La tasa acumulada de incidencia fue de 66,5 por 100.000 habitantes y la proporción de letalidad fue de 2,15 %. El subregistro de la morbilidad por leptospirosis en la región de Urabá, fue de 27,8 % y, el de la mortalidad, de 66,6 %. Conclusión. El subregistro de leptospirosis en la región reitera la necesidad de usar más de una prueba diagnóstica para identificar Leptospira spp. en pacientes de zonas endémicas. Este subregistro podría ser una situación común en todo el país.

Abstract Introduction: Leptospirosis represents a public health problem and is a significant cause of morbidity and mortality in the region of Urabá. However, its notification reveals diagnostic limitations. Objective: To establish the incidence of leptospirosis in the municipalities of the so-called eje bananero in the Urabá region, to describe the magnitude of underreporting, and to propose guidelines for laboratory diagnosis by the public health network. Materials and methods: Two leptospirosis information sources were used: The national official surveillance system and a cross-sectional study of 479 acute-phase patients from April, 2010, to May, 2012. The diagnosis was made using three different tests: Indirect immunofluorescence, microagglutination test, and blood cultures. The exhaustiveness percentage of each information source was calculatedusing thecapture and recapture test. Results: From the total number of cases, 58% (278/479) were positive for leptospirosis at least by a test and 10.43% (29/278) of cases were positive by all three methods. The inclusion of a native strain in the microagglutination test panel increased the percentage of positivity by 15%. The cumulative incidence rate was 66.5/100,000 inhabitants and the case fatality ratio was 2.15%. The underreporting rates of leptospirosis in the Urabá region were 27.8% in morbidity and 66.6% in mortality. Conclusion: Under-registration of leptospirosis in the region highlights the necessity to use more than one diagnostic test to identify Leptospira in patients from endemic areas. Under-registration could be a common situation throughout the country.

A quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for the detection of anti-double-stranded DNA IgG antibodies / Reação imunoenzimática (ELISA) quantitativa para detecção de anticorpos IgG anti-DNA de dupla hélice

ABSTRACT Introduction: The detection of anti-double-stranded (ds) deoxyribonucleic acid (DNA) antibodies is one of the classification criteria for diagnosing systemic lupus erythematosus (SLE). Objective: To describe a quantitative enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) for detecting anti-dsDNA immunoglobulin class G (IgG) antibodies. Methods: The performance of ELISA was evaluated using the Crithidia luciliae indirect immunofluorescence test (CLIFT) as a reference. Anti-dsDNA IgG antibodies were screened by ELISA and CLIFT in serum samples from 127 patients with SLE, 56 patients with other diseases and 37 healthy persons. The Cochran Q test was used to compare the sensitivity and specificity of the reactions, with differences among the results being considered significant when p ≤ 0.05. Results: ELISA had a sensitivity of 92.9% and a specificity of 94.6%, whereas the sensitivity and specificity of CLIFT were 85.8% and 100%, respectively. ELISA was significantly more sensitive than CLIFT (p = 0.0027), whereas CLIFT was significantly more specific than ELISA (p = 0.0253). Conclusion: ELISA showed excellent results in terms of sensitivity and specificity, with a potential use in research and routine diagnostics.

RESUMEN Introducción: La detección de anticuerpos contra el ácido desoxirribonucleico (ADN) de doble cadena (dc) es uno de los criterios de clasificación para el diagnóstico de lupus eritematoso sistémico (LES). Objetivo: Describir una técnica inmunoenzimática (ELISA) cuantitativa para detección de anticuerpos de inmunoglobulina de clase G (IgG) anti-ADNdc. Métodos: Se evaluó el desempeño de la técnica ELISA mediante el test inmunofluorescencia indirecta con Crithidia luciliae (IFI-CL) como referencia. Anticuerpos IgG anti-ADNdc fueron analizados por ELISA y IFI-CL en muestras de sueros de 127 pacientes con LES, 56 pacientes con otras enfermedades y 37 personas sanas. La prueba Q de Cochran fue utilizada para comparar la sensibilidad y la especificidad de las reacciones considerando diferencias significantes entre los tests cuando p ≤ 0,05. Resultados: La técnica ELISA mostró sensibilidad del 92,9% y especificidad del 94,6%, mientras la sensibilidad y la especificidad de la técnica IFI-CL fueron del 85,8% y 100%, respectivamente. La técnica ELISA mostró sensibilidad significativamente mayor que la obtenida con IFI-CL (p = 0,0027); esta mostró especificidad significativamente mayor que la obtenida con ELISA (p = 0,0253). Conclusión: La técnica ELISA presentó resultados excelentes de sensibilidad y especificidad, con el potencial de ser utilizada en investigación y rutina diagnóstica.

RESUMO Introdução: A detecção de anticorpos contra o ácido desoxirribonucleico (DNA) nativo (ds) é um dos critérios de classificação para o diagnóstico do lúpus eritematoso sistêmico (LES). Objetivo: Descrever uma técnica imunoenzimática enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) quantitativa para a detecção de anticorpos imunoglobulina da classe G (IgG) anti-DNAds. Métodos: O desempenho da técnica ELISA foi avaliado utilizando o teste de imunofluorescência indireta com Crithidia luciliae (CLIFT) como referência. Anticorpos IgG anti-DNAds foram pesquisados por ELISA e CLIFT em amostras de soros de 127 pacientes com LES, 56 pacientes com outras doenças e 37 indivíduos sadios. O teste Q de Cochran foi utilizado para comparar as sensibilidades e as especificidades das reações, considerando diferenças significantes entre os testes quando p ≤ 0,05. Resultados: A técnica ELISA apresentou sensibilidade de 92,9% e especificidade de 94,6%, enquanto a sensibilidade e a especificidade da técnica CLIFT foram de 85,8% e 100%, respectivamente. A técnica ELISA apresentou sensibilidade significativamente maior do que a obtida com a técnica CLIFT (p = 0,0027); esta apresentou especificidade significativamente maior do que a obtida com a técnica ELISA (p = 0,0253). Conclusão: A técnica ELISA apresentou excelentes resultados em termos de sensibilidade e especificidade, podendo ser útil em pesquisa e rotina diagnóstica.

Patrones de tinción de anticuerpos antinucleares identificados por Inmunofluorescencia indirecta en pacientes con enfermedad del tejido conectivo / Antinuclear antibody staining patterns identified by indirect immunofluorescence in patients with connective tissue disease

Objetivos: Determinar la frecuencia de patrones de tinción de anticuerpos antinucleares identificados por inmunofluorescencia indirecta en pacientes con enfermedad del tejido conectivo en un hospital de nivel III de Lima, Perú. Material y métodos: Estudio de tipo cuantitativo, observacional y transversal, realizado en el Servicio de Inmunología del Hospital Nacional Arzobispo Loayza entre enero 2017 y junio 2017. Se revisaron 291 historias clínicas de pacientes con enfermedad del tejido conectivo y con detección de los patrones de tinción de anticuerpos antinucleares en suero, usando la técnica de Inmunofluorescencia Indirecta. Resultados: La frecuencia de estudios de anticuerpos antinucleares fue 322 (100 %), los patrones de anticuerpos antinucleares fueron PCNA6 (1,86%), patrón homogéneo 109(33,85%), patrón centromérico 34(10,56%), patrón moteado 135(41,93%), patrón citoplasmático 25(7,76%), patrón nucleolar 9(2,80%), patrón NUMA 1- Huso Acromático 3(0,93%) y patrón lisosoma 1(0,31%). La positividad de anticuerpos antinucleares se determinó mayormente en pacientes con lupus eritematoso sistémico 85(29.21%), esclerosis sistémica progresiva limitada (CREST) 34(11,68%), síndrome de Sjögren 77(26,46%), esclerodermia 15(5,15%), enfermedades mixtas del tejido conectivo72 (24,74%) y polimiositis 8 (2,75%). Conclusiones: Se encontró elevada frecuencia del patrón homogéneo y del patrón moteado en pacientes con enfermedad del tejido conectivo. El patrón homogéneo se asoció fuertemente al lupus eritematoso sistémico y el patrón moteado se asoció al síndrome de Sjögren. Por lo tanto, el método ANA-IFI puede reducir el gasto de un trabajo inmunológico detallado con una pérdida mínima en la exactitud diagnóstica de la enfermedad. (AU)

Objectives: To determine the antinuclear antibody staining patterns identified by indirect immunofluorescence in patients with connective tissue disease in hospital level III in Lima, Peru. Methods: Cross-sectional study performed at the Servicio de Inmunología of the Hospital Nacional Arzobispo Loayza between January and June 2017. We reviewed 291 clinical charts of patients with connective tissue disease who had determination of antinuclear antibodies by indirect immunofluorescence. Results: 322 determinations were analyzed; patterns detected were PCNA 6 (1.86%); homogeneous pattern 109(33.85%), centromeric pattern 34(10.56%), speckled pattern 135(41.93%), cytoplasmic pattern 25(7.76%), nucleolar pattern 9(2.80%), NUMA 1- Huso achromatic pattern 3(0.93%) and lysosomal pattern 1(0.31%). The spectrum of diseases in which antinuclear antibodies were looked for were systemic lupus 85(29.21%), limited progressive systemic sclerosis CREST) 34(11.68%), Sjögren´s syndrome 77(26.46%), scleroderma 15(5.15%), mixed connective tissue disorders 72 (24.74%) and polymyositis 8 (2.75%). Conclusions: A high frequency of homogeneous and speckled patterns were observed, the former associated with systemic lupus and the latter with Sjögren´s syndrome. Detection of antinuclear antibodies by indirect immunofluorescence is an accurate diagnostic method. (AU)

Rendimiento diagnóstico de la prueba de inmunofluorescencia indirecta para la detección de anticuerpos contra HTLV-1 / Diagnostic performance of the indirect immunofluorescence test for the detection of antibodies against HTLV-1

RESUMEN El objetivo del estudio fue determinar el rendimiento diagnóstico de la prueba de inmunofluorescencia indirecta (IFI) para la detección de anticuerpos contra HTLV-1. Se realizó un estudio de evaluación de prueba diagnóstica. Se usaron cultivos celulares MT2 infectados con HTLV-1 y K-562 sin infección, luego fueron sembrados, fijados en láminas para inmunofluorescencia y enfrentados a sueros. Se usaron 155 sueros (80 positivos para HTLV-1 y 75 positivos para otras enfermedades) procedentes de la seroteca del Instituto Nacional de Salud del Perú. Adicionalmente, se evaluó la repetibilidad (en el laboratorio) y reproducibilidad (en laboratorios de costa, sierra y selva) de la prueba. La prueba IFI para la detección de anticuerpos contra HTLV-1 tuvo una sensibilidad de 98,75% (IC 95%: 95,69-100%), una especificidad de 98,67% (IC 95%: 95,40-100%) y el índice de kappa de 0,975. No hubo falsos positivos ni falsos negativos; sin embargo, sí se obtuvo un resultado indeterminado y uno inespecífico. La prueba mostró 100% de concordancia en la repetibilidad y reproductibilidad. Concluimos que los resultados obtenidos son comparables a la prueba de referencia. La prueba de IFI presenta un buen rendimiento diagnóstico y sería de utilidad para la confirmación de HTLV-1.

ABSTRACT The objective of the study was to determine the diagnostic yield of the indirect immunofluorescence (IFI) test for the detection of antibodies against HTLV-1. A diagnostic test evaluation study was performed. HTLV-1-infected MT2 cells and HTLV-1-uninfected K-562 cells were cultured; then these cells were impregnated and fixed in sheets for immunofluorescence and faced to Peruvian sera. A total of 155 sera (80 HTLV-1-positive sera and 75 sera positive for other diseases) from the Peruvian Instituto Nacional de Salud were used. In addition, the parameters of repeatability (intra-laboratory) and reproducibility (in laboratories of the Peruvian coast, mountains and jungle) of the test were evaluated. The IFI test detected the presence of antibodies against HTLV-1 reaching a sensitivity of 98.75% (95% CI: 95.69 - 100.00%), a specificity of 98.67% (95% CI: 95.40 - 100.00%) and the Kappa index was 0.975. There were no false positives or false negatives; however, one undetermined result and one non-specific result were obtained. The test showed 100% qualitative agreement when performing the repeatability and reproducibility. The results obtained are comparable to the reference test. Therefore, the IFI test had a good diagnostic performance and would be useful for the confirmation of HTLV-1.

Prevalencia de anticuerpos a Rickettsias y Ehrlichias en cuatro departamentos fronterizos del Perú / Prevalence of antibodies to Rickettsias and Ehrlichias in four border departments of Peru

Para determinar la prevalencia de anticuerpos a Rickettsia y Ehrlichia, relacionada a contacto reciente y pasado, en localidades fronterizas de los departamentos Loreto, Madre de Dios, Tumbes y Tacna, durante los años 2010 y 2011, se llevaron a cabo encuestas para evaluación serológica empleando el ensayo de inmunofluorescencia indirecta (IFI), a fin de detectar inmunoglobulinas G (IgG) e inmunoglobulinas totales (IgA+IgM+IgG) en 1634 personas. Se encontró una prevalencia de contacto reciente para Ehrlichia de 3,7% (IC95%: 3,0-4,4) y para Rickettsia de 10,6% (IC95%: 9,112,1), y de contacto pasado para Ehrlichia de 19,0% (IC95%: 17,1-21,0) y para Rickettsia de 23,3% (IC95: 21,2-25,3). Se concluye, que existe una mayor prevalencia para contacto o infección pasada en la población estudiada, tanto para Rickettsia como para Ehrlichia, lo cual nos estaría indicando un comportamiento endémico de ambos agentes infecciosos en las áreas geográficas mencionadas.

To determine the prevalence of antibodies to Rickettsia and Ehrlichia, related to recent and past contact, in the border towns of the departments Loreto, Madre de Dios, Tumbes and Tacna, during the years 2010 and 2011, surveys for serological evaluation were carried out using the indirect immunofluorescence assay (IIF), in order to detect immunoglobulins G (IgG) and Total immunoglobulins (IgA + IgM + IgG) in 1634 persons. A recent contact prevalence was found for Ehrlichia of 3.7% (CI 95%: 3.0-4.4) and for Rickettsia of 10.6% (CI 95%: 9.1-12.1), and past contact for Ehrlichia of 19.0% (CI 95%: 17.1-21.0) and for Rickettsia of 23.3% (CI 95%: 21.2-25.3). It is concluded that there is a higher prevalence for past contact or infection in the population studied, both for Rickettsia and Ehrlichia, which would indicate an endemic behavior to both infectious agents in the geographic areas mentioned.

Inmunovaloración de anticuerpos IgM en muestras sospechosas de sarampión clínicamente

Se realiza el estudio de 60 sueros pareados sospechosos de Sarampión clínicamente llegados al Laboratorio Diagnóstico del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kourí" entre enero y mayo de 1996, procedentes de la vigilancia seroepidemiológica de la vacuna triple viral (sarampion, rubéola y parotiditis), a los cuales se les realizó la detección de anticuerpos hemaglutinantes a sarampión y rubéola, así como de IgM, con el estuche diagnóstico Clark Laboratories INC Measles IgM ELISA. Los casos positivos se confirmaron por las técnicas de inmunofluorescencia indirecta-IgM y neutralización. Se obtuvieron por inhibición de la hemaglutinación, 3 casos positivos a sarampión y rubéola, los cuales negativos a IgM de sarampión y a los que se les determinaron anticuerpos a Epstein Barr, Citomegalovirus y al virus herpes simple mediante inmunifluorescencia indirecta (IFI) la capacidad de estos virus de inducir respuesta policlonal. Por medio del ELISA IgM Clark se detectaron 6 casos positivos los cuales resultaron negativos por IFI.

60 matched sera clinically syspicious of measles that were received at the Diagnostic Laboratory of the "Pedro Kourí" Tropical Medicine Institute between January and May, 1996, coming from the seroepidemiological surveillance of the MPR vaccine were studied. The detection of measles and rubella hemagglutinant antibodies, as well as of IgM, was carried out with the Clark Laboratories INC. Measles IgM ELISA diagnostic kit. The positive cases were confirmed by the IgM-indirect immunofluorescence and neutralization. 3 positive cases to measles and rubella, which were negative to measles IgM, were obtained by hemagglutination inhibition. Antibodies against Epstein Barr, cytomegalovirus and herpes simplex virus were also determined by indirect immunofluorescence (IIF) due to the capacity of these viruses to induces polyclonal responses. 6 positive cases, which were negative by IIF, were detected by means of the above mentioned diagnostic kit.

Estudio seroepidemiológico del paludismo en Puerto Madero, Chiapas, 1985 / Seroepidemiologic study of malaria in Puerto Madero, Chiapas, 1985

La Escuela de Salud Pública de México y el Centro de Investigación en Paludismo en Tapachula, Chiapas, montaron y estandarizaron por primera vez en México la prueba serodiagnóstica "inmunofluorescencia indirecta de anticuerpos" (IFA) como un instrumento más para la vigilancia epidemiológica del paludismo, que constituy un problema prioritario de salud pública nacional. El estudio de la morbilidad palúdica que se presenta qui, está basado en una muestra poblacional representativa de Puerto Madero, Chiapas, cuyas endemicidad se determinó a través de una encuesta domiciliaria y de la toma de sangre para las pruebas parasitoscópica directa e inmunofluorescencia. También se identificaron entre los serorreactores los infectados y posibles portadores asintomáticos; asimismo, se analizaron algunos factores locales de riesgo