Colonization by Helicobacter pylori of leprosy patients in Spain: immunomodulation to low molecular weight antigens of H. pylori

We studied the prevalence of Helicobacter pylori in patients with leprosy and the effects of co-infection on the immune response to Helicobacter antigens in the polar groups of leprosy (lepromatous and tuberculoid). We showed that there is no difference in the prevalence of H. pylori in patients with leprosy as compared to a non-leprosy population. We also demonstrated that the immune response to low molecular weight H. pylori antigens (35, 26 and 19 kDa) differs in patients with lepromatous as compared to those with tuberculoid leprosy. In lepromatous leprosy, we show that there is a higher prevalence of the 35 and 26 kDa antigens, but a lower prevalence of the 19 kDa antigen. These immunological results are consistent with previous histopathological studies illustrating a more severe gastrointestinal inflammation in lepromatous patients; importantly, a response to the 35 kDa antigen is recognized as a marker for the development of ulcerative disease.

Desafios na era pós genômica para o desenvolvimento de testes laboratoriais para o diagnóstico da hanseníase / Challenges in the post genomic era for the development of tests for leprosy diagnosis

O diagnóstico da hanseníase se baseia em manifestações clínicas e não existe teste laboratorial para diagnosticar casos assintomáticos ou para prever progressão da doença entre indivíduos expostos. Novas análises genômicas comparativas in silico e ferramentas de biologia molecular têm sido empregadas para revelar proteínas exclusivas do Mycobacterium leprae que apresentem potencial aplicação diagnóstica. A hanseníase tuberculóide paucibacilar (PB) apresenta baixo nível de anticorpos e forte resposta imune celular (RIC) tipo Th1/interferon gamma (IFN-γ). A doença lepromatosa multibacilar (MB) apresenta sorologia positiva e fraca RIC. Portanto, testes laboratoriais para diagnosticar hanseníase PB e MB devem contemplar testes de RIC e sorologia. Proteínas recombinantes do Mycobacterium leprae sorologicamente reativas podem ser incorporadas ao antígeno PGLI para melhorar o diagnóstico sorológico de pacientes MB. Proteínas recombinantes e peptídeos sintéticos do Mycobacterium leprae têm sido testados em ensaios de RIC/IFN-γ para diagnosticar casos PB. Sorologia anti-PGLI modificada incorporando novos antígenos do Mycobacterium leprae e ensaios baseados na RIC/produção de IFN-γ devem permitir a detecção precoce de casos MB e PB em países endêmicos.

Leprosy diagnosis is based mainly on clinical manifestations and no laboratory test is available to diagnose asymptomatic disease or to predict disease progression among exposed individuals. Novel comparative genomic in silico analyses and molecular biology tools have discovered unique Mycobacterium leprae proteins with potential diagnostic application. Tuberculoid paucibacillary leprosy (PB) shows low antibodies titers and strong Th1 type/ IFN-γ specific cell mediated immunity (CMI), while lepromatous multibacillary patients (MB) show high antibody titers and low CMI. Therefore, laboratory tests for PB and MB leprosy diagnosis will require CMI and antibody based assays. Serologically reactive recombinant Mycobacterium leprae proteins were identified and may be used in conjunction with PGL-I to improve MB patient diagnosis. Mycobacterium leprae recombinant proteins and synthetic peptides have been tested for CMI-interferon gamma based assays for PB diagnosis. Modified PGL-I serology incorporating new Mycobacterium leprae antigens and CMI tests based on IFN-γ γ production may permit the detection of leprosy PB and MB forms in endemic countries.

Poor correlation of systemic immunological parameters with clinical features in macular leprosy.

On the basis of clinical features and bacteriological status, macular skin lesions of nine cases of leprosy were classified as falling within a spectrum between the tuberculoid at one end and the lepromatous at the other. While histologic correlation was seen in 60% of cases, humoral and cellular systemic immunologic features were found to be uncharacteristic. It is suggested that macular lesions form an early stage in the development of leprosy where the systemic immunological response is yet to set in fully.

Detection of S-100 antigen and anti ceramide antibody in sera of leprosy patients with and without reaction.

Levels of anticeramide antibodies and S-100 antigen in leprosy patients with and without reaction are compared in this study. The increase in levels of IgM anti ceramide antibody in the tuberculoid group of patients with reaction, when compared to those without reaction, is significant (P < 0.05). Similarly, significant increase (P < 0.01) was observed in the borderline group with reaction. No significant change in anti ceramide antibody level was observed in the lepromatous group of patients with and without reaction. Mean levels of S-100 were slightly lower in all three groups of patients with reaction, but the differences were not statistically significant.

Reaçäo hansênica tipo I na hanseníase borderline tuberculóide durante a poliquimioterapia: época de aparecimento e nervos acometidos / Type I reaction in borderline tuberculoid leprosy under multidrug therapy: time of onset and nerves affected

FUNDAMENTOS - A reaçäo tipo I é pouco estudada na literatura. OBJETIVOS - Descrever a época de aparecimento da reaçäo tipo 1 e os nervos acometidos, nos pacientes portadores de hanseníase borderline tuberculóide (BT), durante a poliquimioterapia(PQT). PACIENTES E MÉTODOS - Estudo longitudinal realizado no Ambulatório de Dermatologia da Faculdade de Medicina da UFMG. Setenta e um pacientes com hanseníase BT foram incluídos no estudo de agosto de 1989 a agosto de 1993. RESULTADOS - 89,3 por cento dos pacientes hansenianos BT com reaçäo tipo 1 apresentaram esse surto atá a sexta dose de tratamento. O nervo ulnar foi o mais acometido nas reaçöes tipo 1 (37,0 por cento). CONCLUSÃO - A reaçäo tipo 1 nos pacientes hansenianos BT ocorre mais frequentemente até a sexta dose de PQT. O nervo ulnar foi o mais acometido

Avaliaçäo da atividade macrofágica na hanseníase virchowiana e tuberculóide / Evaluation of macrophagic activity in virchowian and tuberculoid leprosy

Para avaliar as alteraçoes imunológicas das formas polares da hanseníase investigou-se a produçao de alfa TNF (fator de necrose tumoral) "in vivo" e "in vitro" de 31 indivíduos, sendo 11 virchowianos, 10 tuberculóides e 10 controles normais. Células mononucleares aderentes do sangue periférico, foram cultivadas durante 24 horas a 37 graus Celsius em atmosfera contendo 5 por cento de CO2. TNF foi quantificado, através do método ELISA, no sobrenadante das culturas e no soro dos grupos estudados. Os resultados, em pg/ml, revelaram níveis de alfa TNF significativamente maiores no soro e nos sobrenadantes de culturas de tuberculóides em relaçao aos virchowianos e indivíduos normais, indicando a deficiência de macrófagos de virchowianos para o desencadeamento e manutençao da reaçao imunecelular, favorecendo a disseminaçao da infecçao. Observou-se também, correlaçao negativa entre Os índices baciloscópicos e os níveis de alfa TNF, sugerindo que quanto maior o fluxo bacílar menor será a atividade macrofágica com conseqüente supressao da respcsta imunecelular.

Os tuberculóides reacionais / The reational tuberculoids

Os autores selecionaram 20 casos entre aqueles considerados reacionais com reaçao tipo I generalizada, e com manifestaçoes clínicas e histopatológicas semelhantes, e com uma reaçao de Mitsuda positiva, igual ou maior que 6mm. Os pacientes foram estudados do ponto de vista clínico, baciloscópico, histopatológico e evolutivo. As lesoes clínicas se apresentavam como pápulas e placas eritematosas, bem delimitadas e havia pouco comprometimento neural. A baciloscopia foi negativa ou positiva fraca e a histopatologia exibia granulomas tuberculóides frouxos devido ao edema intra e extracelular e a congestao vascular. Nestes casos os surtos nao se repetiram ou o fizeram somente mais uma vez. Consideram os autores a possibilidade deles serem devidos a multiplicaçao baciliar. A destruiçao dos bacilos pelas defesas orgânicas liberariam antígenos que desencadeariam uma reaçao de hipersensibilidade retardada que é o surto reacional. Estes casos estao bem caracterizados e acham que é importante admitir sua existência nao só pelo seu significados para um melhor conhecimento da doença como também por sua implicaçao na terapêutica, visto que sao casos com múltiplas lesoes e paucibacilares.

Lesöes iniciais em casos com lesöes reacionais disseminadas / Early lesions in disseminated reactional cases

Os autores estudaram 50 pacientes portadores de lesoes reacionais disseminadas e classificados tanto como tuberculóides reacionais ou dimorfos reacionais (casos com reaçoes tipo I, segundo Jopling). A partir de anamnese cuidadosa e de um exame clínico-dermatológico minucioso, verificaram que todos os pacientes apresentavam histórias clínicas semelhantes com relaçao ao início da sua doença, independente do seu grau de imunidade. As lesoes iniciais ou lesoes "mae" sao máculas hipocrômicas ou áreas circunscritas da cor da pele com distúrbios de sensibilidade e que nao devem ser confundidas com as "áreas imunes" descritas por Wade. Essas lesoes parecem preceder uma fase de bacilemia com destruiçao de bacilos nos locais onde eles se depositaram, e a liberaçao de antígenos com a conseqüente manifestaçao de hipersensibilidade retardada desencadeada pelos mesmos, que é o surto reacional. A terapêutica teria um papel eventual somente naqueles casos em que devido a uma imunidade mais baixa estariam sujeitos a novos surtos reacionais. Sem tratamento esses pacientes continuariam apresentando novos surtos indefinidamente.

Imunidade celular e humoral na hanseníase bordeline tuberculoid (BT) / Humoral and cellular immunity in bordeline tuberculoid (BT) leprosy

Foram estudados 20 pacientes com diagnóstico de hanseníase bordeline tuberculoid (BT), classificados segundo os critérios de Ridley & Jopling, bem como dois pacientes com forma Tuberculoid tuberculoid (TT), todos com baciloscopia negativa, exceto um, que apresentou índice baciloscópico 1+. Todos os pacientes foram avaliados quanto a sua capacidade de resposta imune humoral ao DBSA (antígeno sintético semelhante ao glicolipídeo fenólico I, específico do M, leprae) e 18 pacientes foram submetidos a testes de avaliaçåo da resposta imunocelular in vivo (teste Mitsuda) e in vitro (linfoproliferaçåo e produçåo de interferon-gama) frente ao Mycobacterium leprae. Observamos que 90 por cento dos pacientess apresentaram resultados negativos quanto à pesquisa de IgM anti-DBSA pelo método imunoenzimático ELISA (densidade óptica , 0,27), o que demonstra ser este teste inadequado para a detecçåo de pacientes paucibacilares. Quanto aos testes de imunidade celular, oito pacientes (44,4 por cento) apresentaram teste de Mitsuda positivo (>= 5mm), sendo os demais considerados negativos. Cerca de 89 por cento dos pacientes tiveram teste de Mitsuda maior ou igual a 3mm. Doze pacientes (66,7 por cento) tiveram resposta linfoproliferativa positiva (índice estimulatório >= 3,0) para o M. leprae. Vinte e dois por cento dos pacientes apresentaram níveis de interferon-gama acima do limite de positividade (40 U/ml). Houve 66,7 por cento de correlaçåo entre os testes de Mitsuda e interferon-gama; 55,6 por cento de correlaçåo entre os testes in vitro (linfoproliferaçåo e interferon-gama). Quando estes três testes foram considerados em conjunto, uma correlaçåo de 38,9 por cento foi observada. Este estudo demonstra a heterogeneidade do comportamento imunológico mediado por células e anticorpos em pacientes com hanseníase BT, apesar de todos histologicamente serem capazes de conter a multiplicaçåo bacilar e de formar granulomas epitelióides

Lepra lepromatosa de tipo "Burn Out" o "quemada" con inmunología de tipo tuberculoide / \"Gurnt-out\" lepromatous leprosy with tuberculoid type immunity

Se presenta un paciente de 62 años de sexo masculino, con clínica e histología de lepra lepromatosa "burnt out" o "quemada". La piel se observa atrófica y con cicatrices. Se le realizó un estudio inmunológico que determinó un alto nivel de IgG1 (65%) en lugar de los altos niveles de IgG2 habituales en la lepra lepromatosa. La inmunidad humoral reveló valores próximos al polo tuberculoide, vale decir, una gran actividad citotóxica T al enfrentarse con macrófagos autólogos. Se hace referencia a un "Factor N" hereditario que podría mediar en la resistencia ante la lepra y la concurrencia de "factores asociados" en el desarrollo de lepra tuberculoide o lepromatosa

Hanseníase Borderline tuberculoid: parâmetros de atividade imunológica / ?

Foram estudados 48 pacientes portadores de forma "Borderline tuberculoid" (BT) de hanseníase, segundo os critérios de Ridley e Jopling, procurando determinar sua capacidade de circunscrever a enfermidade na pele (número de lesões cutâneas) e nos nervos periféricos (número de nervos afetados). Estas características clínicas foram comparadas entre si e com testes de imunidade humoral (teste elisa para PGL-I, glicolipídio fenólico específico de Mycobacterium leprae) e imunidade celular in vivo (teste cutâneo de Mitsuda) e in vitro (teste de linfoproliferação frente ao M. leprae e detecção de interferon gama em sobrenadante de cultura de linfócitos estimulada pelo M. leprae). O teste de imunidade celular que melhor se relacionou com a capacidade dos pacientes em limitar sua enfermidade, no tocante a pele, foi a detecção de interferon gama. A forma BT de hanseníase parece ser de natureza sistêmica, embora apresentando tendência a circunscrever as manifestações na pele e/ou nos nervos, uma característica não necessariamente se acompanhando da outra.

Quantitation of the soluble E-receptor of human T lymphocytes by rocket electrophoresis in the serum of patients with lepromatous and tuberculoid leprosy

Los linfocitos T humanos poseen, a nivel de membrana, receptores para eritrocitos de carnero (E) que les permite la unión espontánea con estas células, llevando al fenómeno de formación de rosetas. Este receptor fue relacionado con la molécula CD2. Se produjeron varios anticuerpos monoclonales contra la estructura CD2; la mayoría de ellos inhibe alguna de las funciones de los linfocitos T (blasogénesis, formación de rosetas y reacción en cultivo mixto de linfocitos). Es posible obtener este receptor de membrana en forma soluble (Rs), en el sobrenadante de células T incubadas por una hora a 4-C y en el suero de individuos normales. En nuestro laboratorio fueron estandarizados varios métodos para detección y ccuantificacióne de Rs, a partir de un antisuero (anti-Rs) obtenido al inmunizar un carnero con eritrocitos autólogos tratados con Rs (ERs). Este antisuero inhibe la formación de rosetas, es citotóxico para células T, aglutina complejos ERs e identifica linfocitos T por inmunofluorescencia. El método más práctico para cuantificacióne de Rs es el suero de pacientes con patologías asociadas a depresión de la respuesta inmune mediada por células (anemia, lepra, neoplasias, leucemias, linfomas y aplasia medular). Numerosos trabajos han demostrado que los pacientes portadores de lepra presentan alteraciones inmunológicas. Se sabe que los pacientes con lepra lepromatosa presentan deficiencia primaria específica de células T contra antígenos del M. leprae y deficiencia secundaria, inespecífica, de la respuesta inmune celular. En este trabajo, cuantificamos Rs por inmunoelectrdifusión en el suero de 43 individuos normales, 32 pacientes con lepra tuberculoide y 53 con lepra lepromatosa. El promedio de los picos obtenidos fue de 5,0, 7,5 y 10,9 mm., respectivamente. Este aumento fue estadísticamente significativo (Kruskal-Wallis p<0,001), entre los 2 grupos de pacientes y comparados con el grupo control. El aumento de Rs en el suero de los pacientes con lepra puede ser uno de los mecanismos responsables de la depresión de la respuesta inmune celular encontrada en esta enfermedad

The dot-ELISA test for the detection of anti-PGL-1 IgM in leprosy patients and their contacts

Since dot-ELISA has recently been reported to be a sensitive, simple and method, we have compared it with the conventional microplate ELISA method. Sera of 124 leprosy patients, 136 household and professional contacts, and 92 controls were tested for a antibodies against a Mycobacterium leprae antigen using dot-ELISA on nitrocellulose membrane filters and microplate ELISA. The sensitive of the techniques was similar for multibacillary patients, but dot-ELISA was less sensitive for paucibacillary patients although it was more specific (100%) than ELISA (93,4%). Of 21 household contacts that gave a response by ELISA, 3 were also positive by dot-ELISA; one of these 3 developed indeterminate leprosy 12 months later and the other was diagnosed as borderline lepromatous after 28 months. These data indicate that dot-ELISA has a high spedificity and can be a useful tool in field evaluation

Comparison of IgM, IgG and IgA responses to M.leprae specific antigens in leprosy.

Antibodies of IgM, IgG and IgA classes against M.leprae specific antigens (PGL-I, ND-O-BSA, and NT-O-BSA) were determined in the sera of 80 leprosy patients (28 untreated, 34 treated lepromatous and 18 tuberculoid), 25 tuberculosis patients and 33 normal individuals of Northern Thailand. No strong distinction in reactivity could be found between the three antigens. The IgM antibody assay yielded more positive results than assays for IgG and IgA. It was found that the positivity rates of IgM antibodies to all three antigens were highest in untreated lepromatous leprosy (82%). In tuberculoid leprosy, the positivity rates of IgM, IgG and IgA to the antigens were more variable, ranging from 22 to 50 percent. Patients with tuberculosis and normal individuals did not produce IgM antibodies against the antigens. The results suggested that the determination of IgM against the three antigens is a more sensitive and specific test for active leprosy than those of IgG and IgA. The relationship between the duration of treatment and IgM antibody levels in lepromatous leprosy (LL) was studied. Untreated LL patients had significantly higher IgM and IgA antibody levels than treated patients. There was no difference in IgG antibody levels between the two groups, and the levels of both groups were higher than normal controls. Serial determination of IgM antibodies in 7 LL patients revealed that treatment was strongly associated with progressive decrease in IgM antibody levels against all three antigens.

Sistema monocítico-macrofágico y mycobacterium leprae: su importancia en la interpretación patogénica de las distintas formas clínico-patológicas de la Lepra y de las reacciones leprosas / Monocytic-macrophagic system and mycobacterium leprae

Se realiza una revisión de la patogenia de la Lepra (Hanseniasis), en sus vinculaciones con el "sistema monocítico-macrofágico y se efectúa el estudio histopatológico, histoquimico (lipídico) y con microscopía electrónica de cuatro enfermos de Lepra, dos lepromatosos ( sin y con eritema nudoso) y otros dos dimorfos ("Borderline"). Se concluye que: 1) La Lepra presenta sus manifestaciones clínico-patológicas más ostensibles, en vinculación con lesiones del "sistema monocítico-macrofágico". 2)Existen distintos comportamientos de los macrófagos frente al mycobacterium leprae" a)en personas Mitsuda positivos se puede demostrar el predominio de "macrófagos lisadores del M.leprae" con muerte y desaparición de los bacilos; b)en individuos Mitsuda-negativos predominan los "magrófagos no lisadores del M.leprae",que también producen la muerte de los bacilos, pero con persistencia de la "envoltura lipídica bacilar", que se deposita en las vacuolas de los virchowcitos; y c)en enfermos Mitsuda-negativos, luego de formado el "Granuloma virchowiano", se desarrollan los "macrófagos lisadores de las células de Virchow" que permitirían el recambio celular de los virchowitos. 3)Los "macrófagos lisadores del M.leprae" obtienen información antigénica del "bacilo aislado" que pueden transmitir al sistema de inmunidad celular, cuyos linfocitos T activados generan los "granulomas epitelioides con células de Langhans" (granulomas tuberculoides), de la Lepra tuberculoide. 4) Los "macrófagos no lisadores del M.leprae" no obtendrían información antigénica adecuada y no tendrían capacidad para estimular ningún sistema inmunológico (celular, o humoral), originando los "granulomas virchowianos" de la Lepra lepromatosa 5)Luego del envejecimiento y muerte de los vinchowcitos, los "macrófagos lisadores de las celulas de Virchow" obtendrían información antigénica de los "bacilos degenerados asociados a lípidos y glucoproteinas citoplasmáticas", con capacidad de estimulación del sistema inmunológico humoral cuyos linfocitos B activados generarían anticuerpos complejos: a)contra bacilos ubicados en los virchowcitos en la Reacción leprosa tipo 2 (eritema nudoso leprótico); b) contra la pared de vasos en la reacción leprosa tipo 3(fenómeno de Lucio); y c)contra tejidos del huésped (enfermedad autoagresiva hanseniana-Azulay). 6)En la lepra no existiría "polaridad inmunológica" en los períodos iniciales de la instalación de la enfermedad, pero parecería secundariamente a la formación del "granulo

A reaçao de Mitsuda seriada na identificaçao das formas reacionais tuberculóide e dimorfa da hanseníase / ?

Estudou-se a reaçao de Mitsuda em 37 pacientes portadores de hanseníase, sendo 18 da forma tuberculóide reacional e 19 da forma dimorfa reacional, sob o ponto de vista clínico, histológico e baciloscópico, com leituras realizadas aos 30, 60, 90, e 120 dias, com o objetivo de se tentar identificar uma forma da outra. A maioria dos pacientes tuberculóides reacionais apresentou reaçao de Mitsuda positiva +. As reaçoes de Mitsuda diminuíram com o tempo nos dois grupos, sendo mais persistentes no grupo tuberculóide reacional. A baciloscopia aos 30 dias foi negativa ou houve presença de raros bacilos em 77,78 por cento dos casos tuberculóides reacionais. Conclui-se que os tuberculóides reacionais possuem uma maior capacidade de clareamento bacilar que os dimorfos reacionais e que a reaçao de Mitsuda pode ser útil na identificaçao dessas duas formas e, inclusive, sugerir sua evoluçao quanto ao diagnóstico e quanto à terapêutica