Productividad y selectividad del medio de cultivo a partir de guayaba agria (psidium araca) en el crecimiento de levaduras nativas del género candida sp / Productivity and selectivity of culture medium from the sour guava (psidium araca) in the growth of native yeast candida sp

El presente trabajo se llevó a cabo para evaluar la eficiencia del medio de cultivo a partir de guayaba agria (Psidium araca) frente a medios comerciales en el crecimiento de tres cepas nativas: Candida guillermondii, Candida famita y Candida sp. Se evaluó el crecimiento microbiano a diferentes concentraciones de fruta, 5, 10, 25 y 50% p/v, tomando como control los medios comerciales: Malta, Sabouraud y agar papa dextrosa (PDA). La productividad y selectividad del medio de guayaba agria fue determinada mediante el método Ecométrico en un tiempo de 48 horas. Los análisis estadísticos aplicados para evaluar y comparar el crecimiento de las cepas en los medios comerciales y en el medio de guayaba agria a diferentes concentraciones demostraron lo siguiente: Candida guillermondii presentó crecimiento mayor o igual a 25 y 50% p/v comparado con los medios comerciales; Candida famata y Candida sp presentaron mejores crecimientos al 5% p/v, con respecto a los diferentes medios comerciales. Los resultados demostraron que el medio de cultivo es altamente productivo y no selectivo, lo que representa una alternativa en la conservación, el mantenimiento y el desarrollo de las levaduras estudiadas.

This work was carried out to evaluate the efficiency of the culture medium from sour guava (Psidium araca) against commercial media in the growth of three native strains: Candida guillermondii, Candida famata and Candida sp. Microbial growth was evaluated at different concentrations of fruit, 5, 10, 25, 50% w /v, using as control the commercial media: Malta, Sabouraud and PDA (Potato Dextrose Agar). The productivity and selectivity of the sour guava medium was determined by the Ecometric method in a time of 48 hours. The applied statistical analysis to evaluate and compare growth of strains in commercial culture medium and in the medium from sour guava at different concentrations showed: Candida guillermondii grew greater than or equal to 25 and 50% w / v compared with commercial medium, Candida famata and Candida sp showed better growth at 5% w / v, with respect to commercial medium. The results showed that the medium is highly productive and non-selective representing an alternative to the conservation, maintenance and development of the yeasts.

Evaluation of supplementation of sucrose medium on the synthesis of Zymomonas mobilis bio-products / Avaliação da suplementação do meio de sacarose na formação de bio–produtos por Zymomonas mobilis

The effect of the variables pantothenic acid, yeast extract and sodium chloride, as well as the cell permeabilization technique, were investigated on the formation of levan, ethanol, sorbitol and biomass of Zymomonas mobilis, using a 24-1 fraction factorial design. Cell growth was determined by turbidimetry at 605 nm, relating it to a biomass with a dry weight calibration curve. Reducing sugars were quantified according to Somogyi and Nelson. Total sugars were quantified by the phenol-sulfuric acid method, sorbitol by HPLC and ethanol. The levan produced was precipitated by the addition of absolute ethanol and quantified in fructose units. In levan biosynthesis, the variable that had the largest contribution was cell condition. The results suggested that the factors that most affected biomass and ethanol formation were sodium chloride concentration and cell condition that affected negatively on production. For sorbitol, the variable that had a significant effect was permeabilization, which decreased its synthesis. Studies to amplify the range of established factors would be important.

A influência das variáveis: ácido pantotênico, extrato de levedura, cloreto de sódio, e a técnica de permeabilização celular foram investigadas na formação de levana, sorbitol, etanol e biomassa de Zymomonas mobilis utilizando um delineamento estatístico fatorial fracionado 24-1. A biomassa foi determinada por turbidimetria, Os açúcares redutores foram quantificados por Somogy e Nelson, açúcar total por Fenol Sulfúrico, sorbitol por HPLC e etanol por micro-destilação. A levana produzida foi precipitada com etanol absoluto e determinada como unidade de frutose. Na biossíntese de levana, a variável que mais contribuiu foi a condição celular. Os resultados sugerem que, para a formação da biomassa e etanol, os fatores que mais interferiram foram a concentração de cloreto de sódio e a condição celular que influencia negativamente a produção. Para o sorbitol, a variável que teve efeito significativo foi a permeabilização celular que atuou diminuindo a sua síntese. Estudos que ampliam a faixa de variação dos fatores estabelecidos são interessantes.

Levaduras autóctonas con capacidad fermentativa en la producción de etanol a partir de pulpa de excedentes de plátano musa (AAB Simmonds) en el departamento de Córdoba, Colombia / Autoctonous yeasts having fermentation ability in producing ethanol from Musa (AAB Simmonds) plantain surplus pulp in the Córdoba department of Colombia

Se evaluó la capacidad fermentativa de levaduras nativas de la zona costanera del departamento de Córdoba, Colombia, para la obtención de etanol a partir de la pulpa de excedentes de plátano Musa (AAB Simmonds), con el objetivo de encontrar cepas eficientes. Los microorganismos utilizados correspondieron a las especies: Kloeckera sp, Candida guillliermondii 14AD, Candida albicans y Candida guillliermondii 13AD (nativas), y una cepa comercial de referencia, Saccharomyces cerevisiae T73. La fermentación se realizó a diferentes concentraciones de sustrato, siendo la concentración del 40% la mejor; se evaluó la producción de etanol mediante el método colorimétrico del dicromato de potasio utilizando un equipo espectrofotómetro Lambda 11. Se observó que la levadura Candida guilliermondii 14AD nativa fue la más eficiente con una producción promedio de 3,45% v/v de etanol a las 72 horas de fermentación; no se encontraron diferencias estadísticamente significativas con la producción de etanol a partir de la cepa de referencia, la cual produjo 3,59% v/v. Estos resultados sugieren la existencia de levaduras nativas con capacidad para ser utilizadas en la obtención de etanol a partir de material residuo de plátano.

Native yeasts™ (Cordoba, Colombia) fermentation ability for producing ethanol from plantain (Musa AAB Simmonds) surplus pulp was evaluated; the object was to find efficient yeasts. The microorganisms used here came from the Kloeckera sp, Candida guillliermondii (14AD), Candida albicans and Candida guilllier-mondii 13AD strains (native) and Saccharomyces cerevisiae T73 (a commercial reference yeast). Fermentation was carried out on different substrate concentrations, the 40% one giving the best result; ethanol production was evaluated by the potassium dichromate colorimetric method using a Lambda 11 spectrophotometer. It was observed that the Candida guilliermondii 14AD native yeast was the most efficient, having an average 3.45% v/v ethanol production after 72 hours’ fermentation. There were no statistically significant differences compared to reference yeast strain ethanol production (3.59% v/v). These results suggest that native yeasts can be used in obtaining ethanol from residual plantain matter.

Produção de glicose-6-fosfato desidrogenase de Saccharomyces cerevisiae geneticamente modificada através de processo descontínuo alimentado / The glucose-6-phosphate dehydrogenase production in fed-batch culture of recombinant Saccharomyces cerevisiae

Este trabalho tem como finalidade estudar e estabelecer alguns parâmetros no processo fermentativo descontínuo alimentado de uma levedura recombinante Saccharomyces cerevisiae W303-181, visando aumentar a obtenção da enzima glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PDH). Foram feitas a padronização e otimização do preparo de inóculo de S. cerevisiae recombinante. Foram três as condições estudadas. Reduziu-se o tempo de preparo do inóculo de 114 h, da primeira condição, para e 64 e 48 h para a segunda e terceira condições, respectivamente. Essas duas últimas condições mostraram-se adequados para dar continuidade com os processos fermentativos. Foi feito um estudo de otimização da concentração de micronutrientes (adenina, histidina, triptofano e uracila) no meio de cultivo usando a metodologia de superfície de resposta. Concluiu-se que, ao empregar o meio de cultivo cujas concentrações dos micronutrientes tenham sido otimizadas, a atividade específica de G6PDH atingiu 7927 U/L, 3,2 vezes maior que para o meio controle. Estudou-se a influência da constante de tempo (K), na síntese de G6PDH em processo descontínuo alimentado com vazão de alimentação exponencialmente crescente e decrescente, utilizando meio de cultivo otimizado e não otimizado. Os valores estudados de K para vazão de alimentação exponencialmente crescente foram 0,2, 0,3, 0,5, 0,7 e 0,8 'h POT.MENOS'1' e, para a decrescente, foram 0,2, 0,5 e 0,8 'h POT.MENOS'1'. Dentre os cultivos com vazão exponencialmente crescente e com meio de cultivo não otimizado, encontrou-se para K 'IGUAL'0,2 'h POT.MENOS'1' uma atividade enzimática (558 U/L) 4,1 vezes maior que para a levedura selvagem. Dentre os cultivos nas vazões exponencialmente crescente e decrescente, encontrou-se para a vazão crescente e K'IGUAL'0,2 'h POT.MENOS'1' os maiores níveis de produção de G6PDH (847 U/L)...

Yeast lipases: enzyme purification, biochemical properties and gene cloning

Lipases are placed only after proteases and carbohydrases in world enzyme market and share about 5% of enzyme market. They occur in plants, animals and microorganisms and are accordingly classified as plant, animal and microbial lipases. Wherever they exist, they function to catalyze hydrolysis of triglycerides to glycerol and fatty acid. Like carbohydrases and proteases, lipases of microbial origin enjoy greater industrial importance as they are more stable (compared to plant and animal lipases) and can be obtained in bulk at low cost. Majority of yeast lipases are extracelluar, monomericglycoproteins with molecular weight ranging between ~33 to ~65 kD. More than 50% reported lipases producing yeast, produce it in the forms of various isozymes. These lipase isozymes are in turn produced by various lipase encoding genes. Among many lipase producing yeasts Candida rugosa is most frequently used yeast as the source of lipase commercially. This review is aimed at compiling the information on properties of various yeast lipases and genes encoding them.

Pathogenicity characteristics of stocked and fresh yeasts strains

Com o objetivo de avaliar a patogenicidade de leveduras de interesse médico, foram selecionadas 15 amostras preservadas em óleo mineral na Micoteca URM, Centro de Ciências Biológicas, Universidade Federal de Pernambuco e 15 isolados recentes, provenientes de amostras clínicas de pacientes com AIDS, internados no Hospital das Clínicas, Centro de Ciências da Saúde, Universidade Federal de Pernambuco. Com relacão as características de patogenicidade, foram avaliados a capacidade desses microorganismos crescerem a 37ºC, bem como apresentarem atividade de fosfolipase e protease. As 30 amostras cresceram a 37ºC e apresentaram atividade quantitativa de protease, entretanto não apresentaram essa atividade quando testadas em meio sólido. Das 15 amostras preservadas, 13 (86,66 per center) apresentaram atividade fosfolipase positiva e duas (13,34 per center) atividade fosfolipásica negativa e das 15 amostras isoladas de pacientes com AIDS, quatro (26,66 per center) apresentaram atividade de fosfolipase positiva e 11 (73,34 per center) apresentaram atividade fosfolipásica negativa.

Anti-Inflammatory activity od debaryomyces hansenii Cu, Zn-SOD

Background. Cu,Zn-superoxide-dismutase, Cu,Zn-SOD, can be obtained from different sources with different anti-inflammatory activities. In this study we compared the antiinflammatory capacity of the marine yeast Debaryomyces hanseii Cu,Zn-SOD (Dh-SOD) with that of bovine erythrocytes (Be-SOD) in preventive an a therapeutic fashion. Methods. Edema was induced by carrageenan injection into the rat hind paw and was evaluated using a mercury plethysmograph. Development of the inflammatory process was followed by volume displacement at time 0 (carrageenan injection), 1, 2, 3, 4, 5, 6, 9, 12, and 24 h thereafter. Three different SOD doses were used in preliminary experiments to prevent edema: 10, 100, and U/kg. Results. The results indicate that, at the lowest dose (10 U/kg), both SOD samples are effective in reducing inflammation in both the prostaglandin and amplification phases (-24.8 percent and -17.5 percent in the case of Be-SOD, and 11.8 percent and -18.7 percent in the case of Dh-SOD, respectively) (p<0.05). At 100 U/kg, Be-SOD also shows good anti-inflammatory activity in all edema phases (-27.1 percent in the serotonin phase; -19.4 percent in the prostaglandin phase; and -20 percent in the amplification phase) (p<0.05), but Dh-SOD was less effective (-10.9 percent, -9.1 percent, and -5.7 percent). At the highest dose tested (1000 U/kg), Dh-SOD was, again more effective than Be-SOD in all three edema phases (-33.1 percent and -1.5 percent; -17.9 percent and -2.6 percent; and -13.8 percent and 6.7 percent, respectively) (p >0.05). When evaluated as a therapeutic alternative, single doses of DH-SOD at 1,000 U/kg, and Be-SOD at 100 U/kg, both showed good anti-inflammatory activities (-31.7 percent and -23.5 percent, respectively) (p < 0.05). Conclusion. For therapy purposes alone, DH-SOD appears to be a better anti-inflammatory agent than Be-SOD in carrageenan-induced edema

Characterization of yeast deoxyhypusine synthase: PKC-dependent phosphorylation in vitro and functional domain identification

The biosynthesis of hypusine [Nepsilon-(4-amino-2-hydroxybutyl)-lysine] occurs in the eIF-5A precursor protein through two step posttranslational modification involving deoxyhypusine synthase which catalyzes transfer of the butylamine moiety of spermidine to the epsilon-amino group of a designated lysine residue and subsequent hydroxylation of this intermediate. This enzyme is exclusively required for cell viability and growth of yeast (Park, M.H. et al., J. Biol. Chem. 273: 1677-1683, 1998). In an effort to understand structure-function relationship of deoxyhypusine synthase, posttranslational modification(s) of the enzyme by protein kinases were carried out for a possible cellular modulation of this enzyme. And also twelve deletion mutants were constructed, expressed in E. coli system, and enzyme activities were examined. The results showed that deoxyhypusine synthase was phosphorylated by PKC in vitro but not by p56lck and p60c-src. Treatment with PMA specifically increased the relative phosphorylation of the enzyme supporting PKC was involved. Phosphoamino acid analysis of this enzyme revealed that deoxyhypusine synthase is mostly phosphorylated on serine residue and weakly on threonine. Removal of Met1-Glu10 (deltaMet1-Glu10) residues from amino terminal showed no effect on the catalytic activity but further deletion (deltaMet1-Ser20) caused loss of enzyme activity. The enzyme with internal deletion, deltaGln197-Asn212 (residues not present in the human enzyme) was found to be inactive. Removal of 5 residues from carboxyl terminal, deltaLys383-Asn387, retained only slight activity. These results suggested that deoxyhypusine synthase is substrate for PKC dependent phosphorylation and requires most of the polypeptide chains for enzyme activity except the first 15 residues of N-terminal despite of N- and C-terminal residues of the enzyme consist of variable regions. Copyright 2000 Academic Press.

Screening of Beta-fructofuranosidase producing microorganisms por production of fructooligosaccharides and studies of some enzyme properties

Uma linhagem de levedura, produtora de Beta-frutofuranosidade de alta atividade, foi isolada em folha tropical denominada Araticum (Anona densicoma) tendo sido identificada como Aureobasidium pellulans. Esta linhagem produziu Beta-frutofruanosidade extra e intracelularmente que catalizam a produçäo de frutooligossacarídeos a partir da sacarose. O pH e temperatura ótimas de atividade de enzima foram 5.2 e 55ºC, respectivamente. Sua termoestabilidade foi de 55ºC. Esta enzima converteu sacarose a 61.2 por cento de frutooligossacarídeos quando se utilizou sacarose como substrato na concentraçäo de 50 por cento

Producao e propriedades de beta-galactosidade de Kluyveromyces fragilis NRRL Y-2415 / Production and properties of the Kluyveromyces fragilis NRRL Y-2415 beta-galactosidase

Permeado de soro de queijo e soro de proteinado por acidificacao podem ser utilizados como meio de crescimento de Kluyveromyces fragilis NRRL Y-2415 para obtencao de beta-galactosidase. A suplementacao destes meios com 0,1//de (NH4)2SO4 e 0,05//de KH2PO4 aumenta as producoes de massa celular seca e beta-galactosidase. A extracao da enzima das celulas de levedura feita por autolise em tampao fosfato e 2//de cloroformio foi mais rapida do que quando se substituiu o cloroformio por 2//de tolueno, sendo a atividade obtida funcao da concentracao celular na suspensao. Esta enzima tem pH otimo entre 6,6 e 6,8; a sua estabilidade com respeito a pH de pre-incubacao por uma hora e baixa, o que indica que durante o processo de sua obtencao deve-se trabalhar na faixa otima de pH e temperaturas baixas. Quanto a temperatura de atividade maxima, nao ha diferenca em trabalhar a 30 graus centigrados e a 37 graus centigrados; a 50 graus centigrados a enzima e totalmente inativada. Uma alternativa para pre-purificar esta enzima e utilizar membranas. Usando membrana de 0,08 micro, foi possivel obter o extrato enzimatico livre de fragmentos celulares; com outra de 15.000 Daltons, foi possivel aumentar sua concentracao, obtendo-se no final extrato com 2.500 unidade internacionais de ortonitrofenil beta-D-galactopiranosideo por mL

Characterization of a thermophilic and cellulolytic Humicola sp isolated from compost

A espécie termofílica do fungo Humicola sp, capaz de crescer em celulose como fonte de carbono, foi isolada de composto. O fungo apresentou melhor crescimento a temperatura de 40-C e pH 6.0. A ausência de K+ ou a presença de citrato a 10mM em meio de cultura inibiram seu crescimento. A inibiçäo na presença de citrato foi devida a seu efeito quelante de Mg++. O fungo foi capaz de utilizar as seguintes fontes de carbono: acetato, ágar-ágar, amido, carboximetilcelulose, celobiose, glucose, lactose, manose e xilose

Caracterización de levaduras por enzimoforesis / Characterization of yeast by enzymophoresis

Se realiza la identificación de cinco especies de levaduras de uso industrial (S. cerevisiae, C. utilis, C tropicalis, C. seudotropicalis y K fragilis), mediante un método enzimoforético sencillo y rápido, basado en el estudio de las enzimas: alcohol deshidrogenasa, glucosa 6-P-deshidrogenasa, 6 P-glucónico deshidrogenasa, hexoquinasa, glutamato deshidrogenasa NAD y NADP dependientes. La C utilis, que es una levadura muy empleada en la industria, puede diferenciarse del resto de las especies estudiadas, mediante la migración electroforética de cada una de las enzimas estudiadas. Todas las especies pueden ser diferenciadas mediante el patrón electroforético de la 6-fosfoglucónico deshidrogenasa a excepción de la K. fragilis y C. seudotropicalis, las cuales solo se diferencian por su forma de esporulación. El método propuesto sirve, además, para detectar contaminaciones a causa de la presencia de otra especie en el mismo medio de cultivo