Interferon gamma production by PAS-positive T lymphocytes of chagasic patients infiltrated into human hearts in the sites of lesions.

UNLABELLED: In the blood of chagasic patients, a high number of T-lymphocytes producers of a PA.S.-positive substance was found, more numerous in chagasics with abnormal electrocardiogram. Further, we found such lymphocytes infiltrated in the chagasic heart. Here, we considered our hypothesis that those lymphocytes would be Interferon -gamma producer' cells. MATERIAL AND METHODS: Heart samples of 8 patients deceased due to chagasic heart disease (ChHD). Cuts of 5 microns were submitted to monoclonal antibodies for human Interferon-gamma; to CD45RO for activated T lymphocytes; and to the classical Periodic acid Schiff reaction (P.A.S.), respectively. In blood smears from chagasic patients with ChHD, the reactivity for anti Interferon gamma and for the P.A.S. reaction was compared, regarding the respective positive cell number. The myocardium status was compared with clinical date. RESULTS: In hearts, 65-75% of infiltrated lymphocytes were positive for IFN-gamma; similar values were found , in seriated cuts, of P.A.S.-positive lymphocytes, as well as of CD45RO+. In blood, there were 41%+/-9 of P.A.S.-positive lymphocytes, similar to positive cells for IFN-gamma. CONCLUSIONS: The data indicates that the P.A.S.-positive lymphocytes from chagasic patients are producers of IFN-gamma in blood, as well as when infiltrated into the cardiac tissues. Such fact explains also the great affluence of macrophages in cardiac tissues in ChHD. The data indicate a strong response of T helper 1 type in this severe advanced stage of Chagas'disease. Neither Typanosome cruzi parasites or intracellular forms were seen in these hearts. This favors the data showing autoimmune mechanisms in this process. We open a question: to which antigen/s respond in the chagasic hearts the lymphocytes producers of IFN-gamma?

Producción de interferón gamma por linfocitos pas-positivos infiltrados en corazones de pacientes chagasicos en los sitos de lesiones / Interferon gamma production by pas-positive T Lymphocytes of chagastic patients infiltrated into human hearts in the sites of lesions

En sangre de chagásicos en trabajos previos se halló un número alto de linfocitos T productores de substancia P.A.S.- positiva, más numerosos en chagásicos con electrocardiograma anormal. Luego los hallamos infiltrados en el corazón chagásico. En este trabajo consideramos nuestra hipótesis de que esa substancia linfocitaria sería Interferongamma. Material y Métodos. Muestras de corazones de 8 chagásicos fallecidos por muerte cardiaca. Se utilizaron anticuerpos monoclonales anti-IFN gamma humano; para linfocitos T activados (CD45 ROJ, y la reacción del P.A.S, respectivamente. Las células positivas se contaron en 50 campos a 400x y el estado de miocardio se comparó con datos clínicos. También. en frotis de sangre de pacientes chagásicos con ECG anormal, investigamos inmunomarcación con anti interferon gamma y la P.A.S.-positividad, respectivamente. Resultados El mayor número de células infiltrantes intracardiacas (65-75%) resultaron positivos para IFN gamma, y similares valores para P.A.S.-positividad y para CD45 RO. En sangre hallamos 41 % ±7 de linfocitos P.A.S.-positivos: y similar de positivos para IFN-gamma. Conclusiones: Los datos muestran que los linfocitos P.A.S.-positivos de los chagásicos producen IFN-gamma tanto en sangre. Como infiltrados en tejidos cardíacos. e indican una fuerte respuesta T-helper l. También explican la gran afluencia de macrófagos en dichos tejidos cardíacos. No se vieron parásitos T. cruzi ni formas intracelulares. Esos hechos refuerzan los datos que indican existencia de autoinmunidad en Chagas. Abrimos una pregunta: ¿a que antígeno/s responden en el corazón chagásico los linfocitos T P.A.S.-positivos productores de IFN-gamma?(AU)

In the blood of chagasic patients, a high number of T-lymphocytes producers of a P.A.S.-positive substance was found, more numerous in chagasics with abnormal electrocardiogram. Further. We found such lymphocytes infiltrated in the chagasic heart. Here, we considered our hypothesis that those lymphocytes would be Interferon -gamma producer cells. Material and Methods: Heart samples of 8 patients deceased due to chagasic heart disease (ChHD). Cuts of 5 microns were submitted to monoclonal antibodies for human Interferon-gamma; to CD45RO for activated T lymphocytes; and to the classical Periodic acid Schiff reaction (P.A.S.), respectively. In blood smears from chagasic patients with ChHD, the reactivity for anti Interferon gamma and for the P.A.S. reaction was compared, regarding the respective positive cell number. The myocardium status was compared with clinical date. Results: In hearts, 65-75% of infiltrated lymphocytes were positive for IFN-gamma; similar values were found, in seriated cuts, of P.A.S.-positive lymphocytes, as well as of CD45RO+. In blood, there were 41 % ±9 of P.A.S.positive lymphocytes, similar to positive cells for IFN-gamma. Conclusions: The data indicates that the P.A.S.-positive lymphocytes from chagasic patients are producers of IFN gamma in blood, as well as when infiltrated into the cardiac tissues. Such fact explains also the great affluence of macrophages in cardiac tissues in ChHD. The data indicate a strong response of T helper 1 type in this severe advanced stage of Chagasdisease. Either Trypanosome cruzi parasites or intracellular forms were seen in these hearts. This favours the data showing autoimmune mechanisms in this process. We open a question: to which antigen/s respond in the chagasic hearts the lymphocytes producers of IFN gamma?(AU)

Producción de interferón gamma por linfocitos pas-positivos infiltrados en corazones de pacientes chagasicos en los sitos de lesiones / Interferon gamma production by pas-positive T Lymphocytes of chagastic patients infiltrated into human hearts in the sites of lesions

En sangre de chagásicos en trabajos previos se halló un número alto de linfocitos T productores de substancia P.A.S.- positiva, más numerosos en chagásicos con electrocardiograma anormal. Luego los hallamos infiltrados en el corazón chagásico. En este trabajo consideramos nuestra hipótesis de que esa substancia linfocitaria sería Interferongamma. Material y Métodos. Muestras de corazones de 8 chagásicos fallecidos por muerte cardiaca. Se utilizaron anticuerpos monoclonales anti-IFN gamma humano; para linfocitos T activados (CD45 ROJ, y la reacción del P.A.S, respectivamente. Las células positivas se contaron en 50 campos a 400x y el estado de miocardio se comparó con datos clínicos. También. en frotis de sangre de pacientes chagásicos con ECG anormal, investigamos inmunomarcación con anti interferon gamma y la P.A.S.-positividad, respectivamente. Resultados El mayor número de células infiltrantes intracardiacas (65-75%) resultaron positivos para IFN gamma, y similares valores para P.A.S.-positividad y para CD45 RO. En sangre hallamos 41 % ±7 de linfocitos P.A.S.-positivos: y similar de positivos para IFN-gamma. Conclusiones: Los datos muestran que los linfocitos P.A.S.-positivos de los chagásicos producen IFN-gamma tanto en sangre. Como infiltrados en tejidos cardíacos. e indican una fuerte respuesta T-helper l. También explican la gran afluencia de macrófagos en dichos tejidos cardíacos. No se vieron parásitos T. cruzi ni formas intracelulares. Esos hechos refuerzan los datos que indican existencia de autoinmunidad en Chagas. Abrimos una pregunta: ¿a que antígeno/s responden en el corazón chagásico los linfocitos T P.A.S.-positivos productores de IFN-gamma?

In the blood of chagasic patients, a high number of T-lymphocytes producers of a P.A.S.-positive substance was found, more numerous in chagasics with abnormal electrocardiogram. Further. We found such lymphocytes infiltrated in the chagasic heart. Here, we considered our hypothesis that those lymphocytes would be Interferon -gamma producer' cells. Material and Methods: Heart samples of 8 patients deceased due to chagasic heart disease (ChHD). Cuts of 5 microns were submitted to monoclonal antibodies for human Interferon-gamma; to CD45RO for activated T lymphocytes; and to the classical Periodic acid Schiff reaction (P.A.S.), respectively. In blood smears from chagasic patients with ChHD, the reactivity for anti Interferon gamma and for the P.A.S. reaction was compared, regarding the respective positive cell number. The myocardium status was compared with clinical date. Results: In hearts, 65-75% of infiltrated lymphocytes were positive for IFN-gamma; similar values were found, in seriated cuts, of P.A.S.-positive lymphocytes, as well as of CD45RO+. In blood, there were 41 % ±9 of P.A.S.positive lymphocytes, similar to positive cells for IFN-gamma. Conclusions: The data indicates that the P.A.S.-positive lymphocytes from chagasic patients are producers of IFN gamma in blood, as well as when infiltrated into the cardiac tissues. Such fact explains also the great affluence of macrophages in cardiac tissues in ChHD. The data indicate a strong response of T helper 1 type in this severe advanced stage of Chagas'disease. Either Trypanosome cruzi parasites or intracellular forms were seen in these hearts. This favours the data showing autoimmune mechanisms in this process. We open a question: to which antigen/s respond in the chagasic hearts the lymphocytes producers of IFN gamma?

[Chagas cardiopathy: identification and quantification of infiltrating cells in the hearts of cardiac death patients of different ages]. / Cardiopatía chagasica: identificación y cuantificación de células infiltrantes, en corazones de pacientes que sufrieron muerte cardíaca a distintas edades.

UNLABELLED: The purpose of this work was to obtain new data on factors intervening in the production and progression of human chagasic cardiopathy (HChC) with death by cardiac failure. We studied cardiac samples of patients that died at an early mean age versus others that died at older ages. The infiltrating cells were characterized and quantified by means of specific monoclonal antibodies and inmunohistochemical methodology; and by classical histological and histochemical methods. We found intense cardiac infiltration by lymphocytes that reacted with the antibodies anti-CD45RO against activated T-lymphocytes (< 70%). A similar number showed reactivity for CD4. And, in seriate sections, showed PAS+ substances in their cytoplasms. Macrophages were detected in a number of 25%. Few lymphocytes reacted to CD8. There was a low number of B lymphocytes. Other noticeable infiltrated cell were intramiocardial mast cells. Qualitatively, such findings were similar in the two groups of patients. However, the number of T-lymphocytes and of the mast cells was significantly higher in the cases that underwent early cardiac death (p < 0.001). T. cruzi was not found. In cardiomyocytes, damages were found, with T-lymphocytes and macrophages adhered to their sarcolemma, as well as mast cells. CONCLUSIONS: These findings suggest the existence of an active and intense occurrence of immunocellular mechanisms in the production and evolution of severe HChC, in which T-lymphocytes CD4+ intervene, with production and secretion of PAS+ substances; Besides, macrophages, and mast cells, in that order. The quantity of infiltrated cells was positively associated with the occurrence of malignant arrythmyias. We suggest that such facts would be involved in the poor cardiac performance of the chagasic heart disease that leads to cardiac death. Indeed, they seem be worthy of consideration with respect to therapeutic strategies.

Cardiopatía chagasica: identificación y cuantificación de células infiltrantes, en corazones de pacientes que sufrieron muerte cardíaca a distintas edades. / [Chagas cardiopathy: identification and quantification of infiltrating cells in the hearts of cardiac death patients of different ages]

The purpose of this work was to obtain new data on factors intervening in the production and progression of human chagasic cardiopathy (HChC) with death by cardiac failure. We studied cardiac samples of patients that died at an early mean age versus others that died at older ages. The infiltrating cells were characterized and quantified by means of specific monoclonal antibodies and inmunohistochemical methodology; and by classical histological and histochemical methods. We found intense cardiac infiltration by lymphocytes that reacted with the antibodies anti-CD45RO against activated T-lymphocytes (< 70

). A similar number showed reactivity for CD4. And, in seriate sections, showed PAS+ substances in their cytoplasms. Macrophages were detected in a number of 25

. Few lymphocytes reacted to CD8. There was a low number of B lymphocytes. Other noticeable infiltrated cell were intramiocardial mast cells. Qualitatively, such findings were similar in the two groups of patients. However, the number of T-lymphocytes and of the mast cells was significantly higher in the cases that underwent early cardiac death (p < 0.001). T. cruzi was not found. In cardiomyocytes, damages were found, with T-lymphocytes and macrophages adhered to their sarcolemma, as well as mast cells. CONCLUSIONS: These findings suggest the existence of an active and intense occurrence of immunocellular mechanisms in the production and evolution of severe HChC, in which T-lymphocytes CD4+ intervene, with production and secretion of PAS+ substances; Besides, macrophages, and mast cells, in that order. The quantity of infiltrated cells was positively associated with the occurrence of malignant arrythmyias. We suggest that such facts would be involved in the poor cardiac performance of the chagasic heart disease that leads to cardiac death. Indeed, they seem be worthy of consideration with respect to therapeutic strategies.

Cardiopatía chagasica: identificación y cuantificación de células infiltrantes, en corazones de pacientes que sufrieron muerte cardiaca a distintas edades / Human chagasic cardiopathy: identification and quantification of intracardiac infiltrating cells, in patients died by cardiac failure at different ages

Esta investigación fue realizada para obtener datos nuevos sobre factores que intervendrían en la producción y progresión de la cardiopatía chagasica humana (CChH) con muerte por fallo cardíaco. Estudiamos muestras cardíacas de pacientes que murieron a edad temprana y más tardía. METODOS: Caracterizamos y cuantificamos los tipos de células infiltrantes mediante anticuerpos monoclonales; y con métodos histológicos clássicos. RESULTADOS: Hallamos intensa infiltración intracardíaca por linfocitos que reaccionaron con el anticuerpo para CD45RO que muestra linfocitos T activados (más de 70). Similar número mostró reactividad para subtipo CD4. Dichos linfocitos mostraron substancia PAS+ en citoplasma. Macrófagos fueron detectados en número superior a 25. Pocos linfocitos reaccionaron para CD8. Hubo un número muy bajo de linfocitos B. Otras células infiltradas fueron mastocitos intramiocárdicos, en número elevado. Cualitativamente, esos hallazgos fueron similares en los dos grupos de pacientes. Cuantitativamente, el número de linfocitos T y el de mastocitos fue significativamente mayor en los casos que sufrieron muerte temprana (p<0.001). No se observó T.cruzi. Se observaron daños en cardiomiocitos, con linfocitos T y macrófagos adheridos. CONCLUSIONES: Los hallazgos sugieren una activa e intensa existencia de mecanismos inmunocelulares en la producción y evolución de la CChH grave, en los que intervienen linfocitos T CD4+, con substancias PAS+, macrófagos, y mastocitos. Dichas células, mostraron citoadherencia a cardiomiocitos con lesiones; y por su ubcación y número asociáronse también a arritmias cardíacas malignas. En base a dichos hechos sugerimos que serían causas de pobre perfomance cardíaca en la CChH, y merecerían considerarse con respecto a estrategias terapéuticas (AU)

Cardiopatía chagasica: identificación y cuantificación de células infiltrantes, en corazones de pacientes que sufrieron muerte cardiaca a distintas edades / Human chagasic cardiopathy: identification and quantification of intracardiac infiltrating cells, in patients died by cardiac failure at different ages

Esta investigación fue realizada para obtener datos nuevos sobre factores que intervendrían en la producción y progresión de la cardiopatía chagasica humana (CChH) con muerte por fallo cardíaco. Estudiamos muestras cardíacas de pacientes que murieron a edad temprana y más tardía. METODOS: Caracterizamos y cuantificamos los tipos de células infiltrantes mediante anticuerpos monoclonales; y con métodos histológicos clássicos. RESULTADOS: Hallamos intensa infiltración intracardíaca por linfocitos que reaccionaron con el anticuerpo para CD45RO que muestra linfocitos T activados (más de 70). Similar número mostró reactividad para subtipo CD4. Dichos linfocitos mostraron substancia PAS+ en citoplasma. Macrófagos fueron detectados en número superior a 25. Pocos linfocitos reaccionaron para CD8. Hubo un número muy bajo de linfocitos B. Otras células infiltradas fueron mastocitos intramiocárdicos, en número elevado. Cualitativamente, esos hallazgos fueron similares en los dos grupos de pacientes. Cuantitativamente, el número de linfocitos T y el de mastocitos fue significativamente mayor en los casos que sufrieron muerte temprana (p<0.001). No se observó T.cruzi. Se observaron daños en cardiomiocitos, con linfocitos T y macrófagos adheridos. CONCLUSIONES: Los hallazgos sugieren una activa e intensa existencia de mecanismos inmunocelulares en la producción y evolución de la CChH grave, en los que intervienen linfocitos T CD4+, con substancias PAS+, macrófagos, y mastocitos. Dichas células, mostraron citoadherencia a cardiomiocitos con lesiones; y por su ubcación y número asociáronse también a arritmias cardíacas malignas. En base a dichos hechos sugerimos que serían causas de pobre perfomance cardíaca en la CChH, y merecerían considerarse con respecto a estrategias terapéuticas

Estudio de esofago en pacientes chagasicos de cordoba, Argentina: histologico-inmunohistoquimico, y de tiempo de evacuacion / Esophagus study in patients with Chagas disease from Córdoba, Argentina. Histologic-immunohistochemical, and evacuation time

Com el objeto de establecer el estado del esófago en relación a la noxa chagásica en la región central de Argentina, estudiándolo en pacientes com Chagas, de diferentes edades, se investigó el tiempo de vaciamiento esófago (T.V.E.) así como su calibre, mediante una prueba radiologica estardardizada. Metodología: Se trabajó sobre una muestra de 87 pacientes com pruebas serológicas positivas para Chagas a los que se practicó TVE, en Hospital Rawson. El estudio se realizó retrospectivamente sobre los registros originales. Se consideró TVE retardado cuando se vió bario retenido en esófago mas allá de 1 minuto desde la ingesta. Como controles se utilizó el estudio de TVE efectuado en Hospital Rawson, a 120 personas com serologías negativas para Chagas. Por outra parte, se estudiaron mustras de esófago obtenidos mediante autopsias de pacientes chagásicos que fallecieron por cardiopatía o por otras causas (cuatro casos) del Hospital San Roque, Córdoba, y se efectuaron estudios mediante técnicas histológicas clásicas e inmunohistoquimicas. El 63 por ciento de los pacientes mostraron TVE retardado, en porcentajes crecientes com la edad. En el grupo control no chagásico, sólo el 3 por ciento furon positivos para TVE retardado. El interrogatorio mostró síntomas de disfunción esofágica en el 35 por ciento de los casos chagásicos. El número de megaesófagos fue bajo (tres), correspondientes al grado II. Los resultados histopatológicos mostraron infiltración de linfocitos T PAS +, en torno a estructuras neurales del plexo de Auerbach, y disminución del número de las mismas, en los tres casos. El músculo se vio conservado, aunque hubo también algunas áreas com infiltración T linfocitaria. Surge de los presentes resultados una alta incidencia de trastornos de la función esofágica en eestos pacientes chagásicos de Argentina (87 casos) reflejada en el TVE retardado, creciente com la edad. No obstante, el número de megaesófagos fue bajo y la dilatación de los mismos de grado 2. En el aspecto histopatológico, los casos estudiados mostraron evidencias compatibles com proceso chagásico. Se interpreta que en la producción de grandes megaesófagos frecuentes en outras regiones chagásicas, es posible que intervengan otros factores, en relación com las patologías geográficas.

Estudio de esofago en pacientes chagasicos de cordoba, Argentina: histologico-inmunohistoquimico, y de tiempo de evacuacion / Esophagus study in patients with Chagas disease from Córdoba, Argentina. Histologic-immunohistochemical, and evacuation time

Com el objeto de establecer el estado del esófago en relación a la noxa chagásica en la región central de Argentina, estudiándolo en pacientes com Chagas, de diferentes edades, se investigó el tiempo de vaciamiento esófago (T.V.E.) así como su calibre, mediante una prueba radiologica estardardizada. Metodología: Se trabajó sobre una muestra de 87 pacientes com pruebas serológicas positivas para Chagas a los que se practicó TVE, en Hospital Rawson. El estudio se realizó retrospectivamente sobre los registros originales. Se consideró TVE retardado cuando se vió bario retenido en esófago mas allá de 1 minuto desde la ingesta. Como controles se utilizó el estudio de TVE efectuado en Hospital Rawson, a 120 personas com serologías negativas para Chagas. Por outra parte, se estudiaron mustras de esófago obtenidos mediante autopsias de pacientes chagásicos que fallecieron por cardiopatía o por otras causas (cuatro casos) del Hospital San Roque, Córdoba, y se efectuaron estudios mediante técnicas histológicas clásicas e inmunohistoquimicas. El 63 por ciento de los pacientes mostraron TVE retardado, en porcentajes crecientes com la edad. En el grupo control no chagásico, sólo el 3 por ciento furon positivos para TVE retardado. El interrogatorio mostró síntomas de disfunción esofágica en el 35 por ciento de los casos chagásicos. El número de megaesófagos fue bajo (tres), correspondientes al grado II. Los resultados histopatológicos mostraron infiltración de linfocitos T PAS +, en torno a estructuras neurales del plexo de Auerbach, y disminución del número de las mismas, en los tres casos. El músculo se vio conservado, aunque hubo también algunas áreas com infiltración T linfocitaria. Surge de los presentes resultados una alta incidencia de trastornos de la función esofágica en eestos pacientes chagásicos de Argentina (87 casos) reflejada en el TVE retardado, creciente com la edad. No obstante, el número de megaesófagos fue bajo y la dilatación de los mismos de grado 2. En el aspecto histopatológico, los casos estudiados mostraron evidencias compatibles com proceso chagásico. Se interpreta que en la producción de grandes megaesófagos frecuentes en outras regiones chagásicas, es posible que intervengan otros factores, en relación com las patologías geográficas. (AU)