Estafilococos: até onde sua importância em alimentos? / Staphylococci: up to where its importance in food?

Face a evidência de estafilococos coagulase positivos e negativos, usuais ou pauciprodutores de enterotoxinas, como possíveis agentes desencadeadores da intoxicaçäo, revisäo foi realizada de forma a se visualizar a tessitura de elementos e dados como aspectos taxonômicos, ecossistema e fatores de virulência relacionados a este grupo de microrganismos e sua importância em alimentos e saúde pública.

Estafilococos e alimentos: possibilidades de disseminaçäo através do portador humano e animal / Staphylococci and food: dissemination possibilities through human and animal carrier

Tendo em vista o rastreamento epidemiológico das intoxicaçöes estafilocócicas, almejou-se nesta breve revisäo a catalogaçäo atualizada e a importância de estafilococos, sobretudo Staphylococcus aureus, em portadores humanos e animais, dando-se ênfase às pesquisas processadas no Brasil.

Enterotoxinas estafilocócicas: importância e métodos analíticos de detecçäo / Staphylococcal enterotoxins: importance and analytical procedures for its detection

Considerando que a conduta para elucidaçäo de surtos de intoxicaçäo estafilocócica completa-se com a averiguaçäo da presença de enterotoxina no alimento envolvido, bem como sua comprovaçäo de produçäo em fluido sobrenadante de cultura, a presente revisäo busca discorrer sobre diferentes metodologias analíticas de detecçäo e apresenta alguns aspectos de importância de tais substâncias e seu papel em saúde pública.

Estafilococos em pessoal da área de odontologia / Staphylococci from dental personnel

Thirty dental students and five professors were cultured in nares, throat, and hands for the presence of staphylococci. Twenty-four students and two professors were colonized with staphylococci that were classified as S. aureus. Twelve students and one professor were colonized with staphylococci that produced enterotoxin. Care needs to be taken to avoid contaminating patients during dental examination, particularly during any type of surgery

Staphylococcus aureus and salmonella enteritidis present in food implicated in food poisoning

Duzentas e oitenta pessoas foram acometidas por diarréia, vômito, febre, cólica intestinal e dores de cabeça em um período de 6 a 15 horas, após a ingestäo de maionese em um restaurante de Brasilia. Salmonella enteritidis e Staphylococcus aureus foram isolados a partir deste alimento. Os sintomas observados säo típicos de salmoneloses como de enterotoxinas estafilococicas, com exceçäo da febre, que é mais comum na primeira. O período de incubaçäo está dentro daquele observado nas salmoneloses, enquanto as toxinfecçöes estafilocócicas o tempo máximo é de 6 horas. O S. aureus deveter tido a sua origem dos manipuladores enquanto a S. enteritidis, nos ovos utilizados no preparo da maionese. Surtos de salmoneloses por S. enteritidis, em decorrência do consumo de ovos, foram relatados na Inglaterra e Estados Unidos. A contagem elevada de S. aureus no alimento é suficiente para produzir enterotoxina, porém os sintomas devem ter sido brandos, porque uma pequena quantidade do alimento deve ter sido consumida. As linhagens S. aureus isoladas näo foram testadas quanto à produçäo de enterotoxina e nem a presença de enteroxina foi pesquisada no alimento. Devido à presença de S. aureus no alimento, os manipuladores foram submetidos a exame microbiológico e constatou-se que, dentre estes, vários eram portadores de S.aureus enterotoxigênicos. Estas informaçöes säo importantes, pois a maioria das toxinfecçöes alimentares por enterotoxina estafilocócicas é de corrente da contaminaçäo do alimento pelos manipuladores

Purification of Staphylococcal enterotoxins B and C2, by dye ligand chromatography - production of antisera

As enterotoxinas estafilocócicas B e C2 foram purificadas a partir do sobrenadante de culturas, através de cromatografia de troca catiônica em resina Amberlite CG-50 e cromatografia de afinidade com o corante Red A. Cem mililitros de sobrenadante de culturas contendo 270 mg de SEB/ml e 150 ml de sobrenadante contendo 93 mg de SEC2/ml proporcionaram uma recuperaçäo final de 59 por cento e 42 por cento, respectivamente. As toxinas purificadas apresentaram-se homogêneas quando analisadas por eletroforese em gel de poliacrilamida dodecil-sulfato de sódio. A imunizaçäo de coelhos com as enterotoxinas purificadas forneceram títulos máximos de 80 para a enterotoxina B e 40 para a enterotoxina C2. A metodologia descrita neste trabalho mostrou-se adequada para a purificaçäo de enterotoxinas B e C2, visando a obtençäo de reagentes e produçäo de anticorpos específicos, utilizando pequenos volumes iniciais de sobrenadante de culturas

Enterotoxin H in Staphylococcal Food Poisoning.

Seven members of one family became ill with vomiting and diarrhea 4 h after eating a type of cheese produced in the state of Minas Gerais, Brazil. Staphylococcus aureus (2.9 × 108 CFU/g) that produced enterotoxin H (SEH) was isolated from the cheese. A low level of this enterotoxin was detected in the cheese extract before and after concentration 20-fold by copper chelate chromatography. The amount of SEH produced by the staphylococcal strain was 180 ng/ml of culture supernatant with production by the sac culture method. If only the ELISA ball kit had been used, it would have been concluded that enterotoxin D was the cause of the food poisoning.

Staphylococci in breast milk from women with and with and without mastitis

Verificou-se a presença de Staphylococci em leite materno procedente de 19 mulheres, nove consideradas sadias e dez apresentando sintomas clínicos de mastite. Staphylococci foram detectados em todas as amostras de leite, com contagens variando de 10² a 10 a quarta ufc/mL e revelando uma significativa variedade de colônias atípicas e típicas, estas últimas observadas em todas as placas de ágar Baird-Parker, exceto em uma amostra. Staphylococcus aureus, coagulase e termonuclease positivos e fermentadores de manitol em anaerobiose, estavam presentes em 13 amostras. Várias estirpes näo apresentaram uma ou duas,outras evidenciaram todas e uma näo apresentou nenhuma das características bioquímicas citadas. De um total de 19 cepas, 8 sintetizavam quantidade detectáveis de enenterotoxinas pelo método de imunodifusäo em gel e algumas mostraram-se produtoras de pequenas quantidades de enterotoxinas e de toxina da síndrome do choque tóxico, conforme detectado através do método de aglutinaçäo reversa passiva em latex

Staphylococcal food poisoning from cream-filled cake in a metropolitan area of South-Eastern Brazil

Doze pessoas foram acometidas de vômito e diarréia aproximadamente 4 horas após haverem ingerido bolo recheado, servido em uma festa de aniversário, e no dia seguinte à festa. Staphylococcus aureus produtor de enterotoxina A foi isolado no bolo, fossa nasal, leito subungueal e, essencialmente, em uma ferida em fase de cicatrizaçäo, localizada na nuca de manipuladora, que dispunha de longa experiência na área de produçäo de alimentos. O bolo, de cerca de 6 Kg, quando ainda quente, foi levado ao refrigerador, por uma hora antes de ser servido näo tendo, portanto, sido convenientemente resfriado. Esses dados permitiram concluir que o referido alimento foi, acidentalmente, contaminado pela manipuladora e inadequadamente resfriado antes de ser ingerido

Enterotoxigenic staphylococci from food handlers working in an industrial kitchen in Belo Horizonte, MG (Brazil)

Cinquenta e cinco indivíduos säos, manipuladores de alimentos de uma cozinha industrial em Belo Horizonte, MG, foram examinados quanto a presença de estafilococos enterotoxigênicos. Trinta e dois (58,2 por cento) apresentaram-se portadores de S. aureus e 17 (30,9 por cento) de S. aureus enterotoxigênico, estes, assim distribuídos: 8 nasais, 9 de cavidade orofaríngea e 7 de leito subungueal. Onze manipuladores carrearam linhagens enterotoxigênicas em apenas um dos 3 sítios e um carreou linhagem produtora de enterotoxina B, concomitantemente em todos 3 sítios pesquisados. Quatro cepas se mostraram produtoras de enterotoxina A, 10 de enterotoxina B, 4 de enterotoxina C e 6 de enterotoxina A e B. Considerando-se que, 30,9 por cento dos manipuladores de cozinha industrial que produzia em 1992, em Belo Horizonte, 80.000 refeiçöes/dia, caracterizaram portadores de S. aureus enterotoxigênico, o resultado obtido pode ser considerado significativamente elevado

Production of staphylococcal enterotoxin a in white cheese

Queijo Minas tem sido um alimento envolvido em muitos surtos de toxinfecçäo alimentar em Minas Gerais. Foram conduzidos experimentos para determinar em qual estágio da fabricaçäo do Queijo Minas Frescal a enterotoxina que cause este tipo de intoxicaçäo produzida. Leite pasteurizado utilizado na fabricaçäo do queijo foi inoculado com 10 e 10(4ª) U.F.C./ml de uma linhagem de Staphylococcus aureus produtora de enterotoxina A e incubado a 26-27ºC por variados períodos de tempo, antes do preparo dos queijos. Amostras do leite do coágulo e do queijo foram utilizados para determinar a contagem de S. aureus e a presença da de enterotoxina A. A enterotoxina näo foi detectada no queijo preparado com leite que tinha sido inoculado com 10 (4ª) U.F.C./ml após ter sido mantido por 5 horas a 27ºC e estava presente em todas amostras de queijo

Purification of Staphylococcal enterotoxin a by dye ligand chromatography

A purificaçäo de enterotoxina A foi obtida a partir de 400 ml de cultura de Staphylococcus aureus FRI-722. O método de cultura em saco de diálise foi utilizado para a produçäo da enterotoxina. Foram recuperados 10 mg presentes do sobrenadante da cultura. A enterotoxina purificada apresentou-se homogênia quando analisada por eletroforese em gel de poliacrilamida dodecil-sulfato de sódio. A metodologia descrita neste trabalho mostrou-se adequada para purificar uma quantidade satisfatória de enterotoxina e pode ser utilizada em laboratórios onde näo existem equipamentos necessários para manipular grandes volumes de sobrenadante de cultura

Staphylococcal food poisoning outbreaks in Säo Paulo (Brazil)

Foram investigados seis surtos de doenças de origem alimentar ocorridos em Säo Paulo, Brasil. Os alimentos implicados foram: bolo recheado com creme (4 surtos), nhoque (1 surto) e sorvete (1 surto). Os alimentos foram analisados, quanto à presença de Staphylococcus aureus e enterotoxinas estafilocócicas. As contagens de S. aureus, nos alimentos, variaram de 10(7) a 10(9) UFC/g, exceto para o sorvete, do qual näo se obteve o isolamento da bactéria. Os estafilococos isolados a partir dos alimentos mostraram-se produtores de enterotoxina A e todas as amostras, dos alimentos analisados, continham enterotoxina A, a mais comumente associada à intoxicaçäo alimentar estafilocócica

Selective Enterotoxin Production in Foods by Staphylococcus aureus Strains That Produce More Than One Enterotoxin.

Staphylococcus aureus strain S-6, producer of enterotoxins A and B; strain FRI-913, producer of enterotoxins A, C, and E; and strain FRI-196E, producer of enterotoxins A and D, were grown in milk (pH 6.8), potato salad with mayonnaise, and boiled egg white (pH 8.0-8.5). Enterotoxins were detectable in milk incubated at 26°C when colony counts were less than 106. Enterotoxin production by strain S-6 was detectable in potato salad at 106 CFU at both 26 and 37°C. Enterotoxin A production by strain FRI-913 was detectable at approximately 106 CFU/g, whereas enterotoxin C was detectable only when growth reached approximately 108 CFU/g. Production of enterotoxins A and D by strain FRI-196E was detectable when growth was greater than 107 CFU/g. Production of enterotoxins A and B by strain S-6 in boiled egg white was detectable at greater than 106 CFU/g. In most experiments, enterotoxins A and C from strain FRI-913 were detectable when cell counts were greater than 107 CFU/g, whereas enterotoxin A and enterotoxin D production by strain FRI-196E was detectable at counts between 105 and 106 CFU/g. It can be concluded that enterotoxin production is influenced by the time of incubation and the composition and pH of the food.

Detecçäo de termonuclease de estafilocócica em leite através de método rápido e barato / A rapid and low cost adaptation of staphylococal tnase detection in milk

Resumo: Um método visndo detecçäo direta de termonuclease (TNase) em leite foi desenvolvido, coma finalidade de triagem de alimentos contaminados com estafilococos enterotoxigênicos. A substituiçäo de soroalbumina bovina (BSA) do tampäo tris por proteose peptona número 3 concedeu melhor proteçäo à TNase em caldo BHI e leite ontaminado com estafilococos enterotoxigênicos, embora seja inferior ao método de preciptaçäo com tricloroacético seguida de centrifugaçäo. estas modificaçöes poderäo ser úteis em condiçöes onde existem dificuldades referentes à disponibilidade de BSA e centrifugaçäo a alta rotaçäo para detecçäo direta de TNase estafilocócica em alimentos (au)

Production of Staphylococcal Enterotoxins A, D, and E by Sac Culture.

The use of the sac culture method for production of relatively large amounts of enterotoxins A (SEA), D (SED), and E (SEE) for use in purification of the enterotoxins was investigated. One-hundred milliliters of medium per sac, made from Union Carbide sausage casing, with a shaking speed of 150 rpm was chosen as the optimum condition for the enterotoxin production. Brain heart infusion (BHI) broth was the medium of choice for production of SEA by strain FRI-722, with over 100 µg/ml being produced. Strain 1151m produced 20 µg/ml of SED in BHI medium which was 10 times that produced in shake flasks. The production of SEE was best in the Biosate + yeast extract medium, with adequate amounts being produced for purification.

Staphylococcal food poisoning in Belo Horizonte (Brazil)

Foram investigados 18 surtos de toxinfecção alimentar em Belo Horizonte, Brasil, sendo que em um dos surtos, 60 pessoas foram acometidas. Os alimentos envolvidos foram bolos confeitados e queijo Minas. As contagens de Staphylococcus variaram de 10 4 a 10 8 UFC/g. Foram detectadas linhagens de Staphylococcus enterotoxigênicos em 14 dos isolamentos efetuados. As enterotoxinas A e B foram concomitantemente identificadas em 12 surtos. Em um dos surtos, foi encontrada apenas A e em outro apenas B.

Effect of Magnesium and Iron on the Growth of and Production of Extracellular Proteins by Staphylococcus aureus Strain S-6.

The effect of magnesium and iron on the growth, cellular morphology, deoxyribonuclease, coagulase, and enterotoxin B (SEB) production of Staphylococcus aureus strain S-6 in a pancreatic digest of casein (NAK) which had been treated with alumina to remove mineral ions was determined. Growth of S. aureus in the treated NAK medium (NAKSA) was minimal; the morphology of the cells was heterogenous with many large cells as well as some that were gram negative. The cells gradually reverted towards normal as the Mg2+ concentration was increased to 1.1 µg/ml. Cell dry weight increased from 0.36 ± 0.27 mg/ml to 1.16 ± 0.41 mg/ml, DNase activity increased from 7.6 units/mg dry weight to 77.0 units/mg dry weight, and SEB production increased from 12.2 to 54.3 µg/mg cell dry weight when the Mg2+ content was increased to 1.1 µg/ml. Increasing the Fe2+ content above the 0.4 µg/ml in the NAKSA medium containing 1.1 µg/Mg2+ resulted in decreases in dry weight and DNase activity, a slight increase in SEB production, and a relatively large increase in coagulase production.

Production of Staphylcoccal Enterotoxin A and Thermonuclease in Cream Pies.

The change in pH, growth of mesophilic bacteria and growth, thermonuclease (TNase) and enterotoxin A (SEA) production by Staphylococcus aureus in artificially inoculated cream pies were investigated. The mesophilic count varied from 104 CFU/g at 20°C to 4.0 × 107 CFU/g at 37°C after 12 h of incubation and from 2 × 106 CFU/g at 20°C to 7 × 108 CFU/g at 37°C after 35 h of incubation. The S. aureus count varied from <10 2 at 20°C to 1.6 × 104 CFU/g at 37°C after 12 h of incubation and from 8 × 102 at 20°C to 5.4 × 106 at 37°C after 35 h of incubation. TNase was detectable after incubation for: 35 h at 20°C (2.9 ng/g), 12 h at 30°C (9.4 ng/g), and 12 h at 37°C (72 ng/g). SEA was detectable after incubation for: 35 h at 20°C (3.9 ng/g), 18 h at 25°C (3.9 ng/g) and 14 h at 30°C (4.8 ng/g).

Production of Rabbit Antisera to the Staphylococcal Enterotoxins.

An immunization method for production of antiserum to the staphylococcal enterotoxins in rabbits is presented. The bleeding schedule is tailored to the enterotoxin type. About 0.5 mg of staphylococcal enterotoxin is used per rabbit and serum harvest begins 11 weeks after the initial injection. Proposed are subcutaneous injections of 1, 3, 10, 20 and 30 µg of toxin with Freund's adjuvant on days 0, 3, 8, 24 and 28, respectively; and five weeks later, injections of 50, 100 and 300 µg on days 0, 3 and 8, respectively. Serum harvest ranges from a 4-week period for enterotoxin A to 8 or more weeks for enterotoxin E. Immunizations with all toxin types using the proposed or similar injection programs produced antibody titers from about 20 to over 100. Individual variation in response of rabbits in the same group was generally 3- to 5-fold, and in extreme instances, 10-fold. Immunization experiments were augmented by booster experiments in which the rabbit variable was held relatively constant by sequentially testing different schedules and doses on the same group of animals.