Molecular basis of rifampicin resistance in Haemophilus influenzae.

OBJECTIVES: To determine the molecular basis of rifampicin resistance in Haemophilus influenzae. METHODS: Mutations in the rifampicin-resistance determining region of the rpoB gene of H. influenzae were analysed by gene amplification and sequencing in 12 rifampicin resistant, one intermediate and four susceptible isolates. RESULTS: All clinical resistant isolates except one had at least one amino acid substitution in the beta-subunit of RNA polymerase. Eleven resistant isolates had amino acid changes at codons 513, 516, 518, 526 and 533 of cluster I, with the most common amino acid substitution being Asp-516-->Val. Only one resistant isolate also had a second mutation Asn-518-->Asp in cluster I; transformants obtained with DNA of this isolate also had both mutations. All the amino acid changes in cluster I were detected in isolates with a high level of rifampicin resistance (MIC > or =32 mg/L), except the Asp-516-->Ala mutation in a low-level resistant isolate (MIC 4 mg/L). Only one serotype f isolate with an MIC of 2 mg/L had a mutation in cluster II. Cluster III presented no amino acid changes. In in vitro-generated high-level rifampicin-resistant mutants, only amino acid changes at codons 516 and 526 were seen, with new amino acid changes appearing at codon 526 of cluster I, while His-526-->Asn was associated with low-level resistance. CONCLUSIONS: Rifampicin resistance in H. influenzae is due to point mutations in the rpoB gene, and the resistance levels are dependent on both the location and the nature of amino acid substitution.

[Antibiotic resistance in 622 Streptococcus pneumoniae isolated from blood and cerebrospinal fluid in 33 Spanish hospitals participating in the European Antimicrobial Resistance Surveillance System (2000)]. / Resistencia a antibióticos en 622 Streptococcus pneumoniae aislados de líquidos cefalorraquídeo y sangre en 33 hospitales españoles en la Red Europea de Bigilancia de Resistencia a Antibióticos (2000).

INTRODUCTION: In 1998 the European Union founded the European Antimicrobial Resistance Surveillance System (EARSS) for the control of antimicrobial resistance in invasive pathogens. This report present the results obtained for S. pneumoniae in the year 2000 in Spain. METHODS: Participants included 33 hospitals covering approximately 25% of the Spanish population. The laboratories carried out isolation, identification and sensitivity studies with their usual methods. Quality control was performed by the UK National External Quality Assurance Scheme (NEQAS). A form was filled out with clinical information on the patient and data on the hospital, department and specimen isolated. This information was entered in a central database for analysis and validation by the Whonet.5 program. RESULTS: Invasive S. pneumoniae was isolated in 622 patients. Overall incidence was 6.4 cases/100,000 inhabitants. Among the strains isolated, 33.1% (CI 95%: 29.6-37) showed resistance to penicillin (22.2% intermediate; 10.9% resistant); 11% showed resistance to cefotaxime (10.1% intermediate; 0.9% resistant); and 21.1% were resistant to erythromycin. Erythromycin resistance was 7% in penicillin-sensitive strains and 46.4% in penicillin-resistant strains (p < 0.001). A total of 51.7% of strains were resistant to penicillin in children < or = 4 years old, as compared to 29% in patients > 4 years old (p < 0.001). A ciprofloxacin MIC > 2 mg/L was found for 2.4% of isolates. CONCLUSIONS: Penicillin resistance in invasive S. pneumoniae in Spain is among the highest in the European Union. The decrease in sensitivity to penicillin was significantly associated with cefotaxime and erythromycin resistance. Children < or = 4 years old have a significantly higher risk than adults of acquiring infection with strains resistant to penicillin, cefotaxime and erythromycin.

Resistencia a antibióticos en 622 streptococcus pneumoniae aislados de líquido cefalorraquídeo y sangre en 33 hospitales españoles de la Red Europea de Vigilancia de Resistencia a Antibióticos (2000) / Antibiotic resistance of 622 streptococcus pneumoniae isolated from blood and cerebrospinal fluid in 33 spanish hospitals participating in the European Antimicrobial Resistance Surveillance System (2000)

INTRODUCCIÓN. La Unión Europea (UE) fundó en 1998 la European Antimicrobial Resistance Surveillance System (Red Europea para el Control de la Resistencia a Antimicrobianos en Patógenos Invasivos, EARSS). Se presentan los datos de Streptococcus pneumoniae obtenidos en España en 2000. MÉTODOS. Participaron 33 hospitales con una cobertura aproximada del 25 per cent de la población española. Cada laboratorio aisló, identificó y estudió la sensibilidad con sus métodos de rutina. El control de calidad fue realizado por UK National External Quality (NEQAS). Se recogieron los datos clínicos, del hospital y servicio en el que se realizó el aislamiento de cada cepa/paciente. Los datos se incorporaron a una base de datos común donde se analizaron y validaron mediante el programa Whonet.5. RESULTADOS. En 622 pacientes se aisló S. pneumoniae invasivo. La incidencia total fue de 6,4 casos/100.000 habitantes. El 33,1 per cent (intervalo de confianza [IC] del 95 per cent; 29,6-37) presentaron sensibilidad disminuida a penicilina (intermedias, 22,2 per cent; resistentes, 10,9 per cent); el 11 per cent fueron no sensibles a cefotaxima (intermedias, 10,1 per cent; resistentes, 0,9 per cent); el 21,1 per cent fueron resistentes a eritromicina.La resistencia a eritromicina fue del 7 per cent en las cepas sensibles a penicilina, y del 46,4 per cent en las no sensibles (p < 0,001). En los niños de 4 años o menos, el 51,7 per cent de las cepas no fueron sensibles a penicilina, frente al 29 per cent en pacientes de más de 4 años (p < 0,001). El 2,4 per cent de los aislamientos presentaron una concentración inhibitoria mínima (CIM) para ciprofloxacino superior a 2 mg/l. CONCLUSIONES. La resistencia a penicilina en S. pneumoniae invasivos en España es una de las más elevadas de la UE. La disminución de la sensibilidad a penicilina se asocia significativamente con la pérdida de sensibilidad de cefotaxima y la resistencia a eritromicina. Los niños de 4 años o menos tienen un riesgo significativamente superior que los adultos de infectarse por cepas resistentes a penicilina, cefotaxima y eritromicina (AU)

[Antibiotic resistance in blood isolates of Staphylococcus aureus in 31 Spanish hospitals participating in the European Antimicrobial Resistance Surveillance System (2000)]. / Resistencia a antibióticos en Staphylococcus aureus aislados de sangre en 31 hospitales españoles de la Red Europea de Vigilancia de Resistencia a Antibióticos (2000).

BACKGROUND: In 1998, the European Union funded the European Antimicrobial Resistance Surveillance System. We present here Staphylococcus aureus data in 2000 in Spain. MATERIAL AND METHOD: 31 hospitals were involved, covering almost 25% Spanish total population. All nosocomial blood isolates of S. aureus were included. Each laboratory carried out microbiological studies with its own usual methods. Quality control was carried out by UK National External Quality (NEQAS). A questionnaire including hospital, patient and specimen data was filled out for each isolate. Results were registered in a single database and analyzed and validated with Whonet. 5 software. RESULTS: Invasive S. aureus was isolated in 903 patients. Overall incidence was 1.45/1000 admitted patients. Resistance was 28.1% (95% CI, 25.2-31.1) to oxacillin (O), 26.6% to ciprofloxacin (C), 23.8% to erythromycin (E) and 16.6% to gentamicin (G). Multiresistance was noticed in 80% oxacillin-resistant strains. More frequent multiresistance profiles were OECG (11.3% of all isolates) and OEC (6.3%). Oxacillin resistance was higher in ICU units (44.5%) than in other medical departments (27.4%) (p < 0.001). Hospitals with 500 beds or more showed 36.4% prevalence of O resistance, while in hospitals having less than 500 beds it was 18.8% (p < 0.001). A decreased susceptibility to vancomycin was not detected. CONCLUSIONS: In Spain, invasive S. aureus shows a high prevalence of resistance to oxacillin, ciprofloxacin, erythromycin and gentamicin. Most oxacillin-resistant strains were resistant to three or more antibiotics. Nearly 50% oxacillin-resistant isolates were susceptible to gentamicin. Oxacillin resistance and resistance to multiple antibiotics was more frequent in ICU units and in hospitals with 500 beds or more.

Resistencia a antibióticos en Staphylococcus aureus aislados de sangre en 31 hospitales españoles de la Red Europea de Vigilancia de Resistencia a Antibióticos (2000) / Antibiotic resistance in blood isolates of Staphylococcus aureus in 31 Spanish hospitals participating in the European Antimicrobial Resistance Surveillance System (2000)

FUNDAMENTO: La UE fundó en 1998 la Red Europea para el control de la resistencia a antibióticos en patógenos invasivos (EARSS). Se presentan los datos de Staphylococcus aureus obtenidos en España en 2000.MATERIAL Y MÉTODO: Participaron 31 hospitales con una cobertura cercana al 25 por ciento de la población española. Se incluyeron todas las cepas nosocomiales aisladas en sangre. Cada laboratorio realizó el estudio microbiológico con sus métodos habituales. El control de calidad fue realizado por UK National External Quality (NEQAS). Se rellenó un protocolo por cada aislamiento/paciente en el que constaban datos clínicos, del hospital y servicio en el que se realizó el aislamiento, así como de su sensibilidad. La información se incorporó a una base de datos común donde se analizaron y validaron mediante el programa informático Whonet.5.RESULTADOS: Se aisló S. aureus en hemocultivos de 903 pacientes. La incidencia total fue de 1,45/1.000 pacientes ingresados. El 28,1 por ciento (intervalo de confianza [IC] del 95 por ciento, 25,2-31,1) fueron resistentes a oxacilina (O); el 26,6 por ciento a ciprofloxacino (C); el 23,8 por ciento a eritromicina (E), y el 16,6 por ciento a gentamicina (G). El 80 por ciento de los aislamientos resistentes a oxacilina fueron multirresistentes. El patrón de multirresistencia más frecuente fue el OECG (11,3 por ciento del total de las cepas), seguido del OEC (6,3 por ciento). La resistencia a O fue mayor en unidades de cuidados intensivos (UCI) (44,5 por ciento) que en otras unidades hospitalarias (27,4 por ciento) (p < 0,001). Los hospitales con más de 500 camas presentaron más resistencia a O (36,4 por ciento), que los de menos de 500 (18,8 por ciento) (p < 0,001). No se encontraron cepas con disminución de sensibilidad a vancomicina. CONCLUSIONES: En España, las cepas de S. aureus causantes de bacteriemia presentan una prevalencia elevada de resistencia a O, C, E y G. La mayoría de las cepas resistentes a O fueron multirresistentes. Casi el 50 por ciento de los aislamientos resistentes a O fueron sensibles a G. La resistencia a O y la multirresistencia fueron más frecuentes en pacientes ingresados en UCI y en hospitales de más de 500 camas (AU)