Cross-neutralization of the coagulant activity of Crotalus durissus terrificus venom from the northeast of Argentina by bivalent bothropic antivenom

Cross-neutralization of Crotalus durissus terrificus venom coagulant activity was tested using bivalent horse antivenom against Bothrops alternatus and Bothrops diporus venoms. Our in vitro and in vivo experiments showed that bothropic antivenom neutralizes the thrombin-like activity of crotalic snake venom and this cross-reaction was demonstrated by immunoassays either with whole venom or a purified thrombin-like enzyme. These results suggest common antigenic properties and, consequently, similar molecular structure among venom thrombin-like enzymes. Besides, they provide information that could be further used in the development of new antivenom formulations.

An alternative method to isolate protease and phospholipase A2 toxins from snake venoms based on partitioning of aqueous two-phase systems

Snake venoms are rich sources of active proteins that have been employed in the diagnosis and treatment of health disorders and antivenom therapy. Developing countries demand fast economical downstream processes for the purification of this biomolecule type without requiring sophisticated equipment. We developed an alternative, simple and easy to scale-up method, able to purify simultaneously protease and phospholipase A2 toxins from Bothrops alternatus venom. It comprises a multiple-step partition procedure with polyethylene-glycol/phosphate aqueous two-phase systems followed by a gel filtration chromatographic step. Two single bands in SDS-polyacrylamide gel electrophoresis and increased proteolytic and phospholipase A2 specific activities evidence the homogeneity of the isolated proteins.

Efficacy of Argentine propolis formulation for topical treatment of canine otitis externa / Eficácia da formulação da propólis Argentina para o tratamento tópico de otite externa canina

The therapeutic effects of Argentine propolis ear drop formulation on canine otitis externa were evaluated. Forty-eight dogs with symptoms of otitis externa were randomly assigned to double-blinded, controlled clinical trial to evaluate the efficacy of topical formulation with propolis versus a topical placebo in the treatment of otitis externa. The propolis preparation and placebo were administrated into both external ear canals, twice daily for 14 days. Throughout the study, clinical examination and microbiological analysis of dogs ear exudates were made. The most frequent microorganisms isolated in culture media were: Malassezia pachydermatis (54.2 percent), Staphylococcus aureus (43.8 percent), coagulase-negative Staphylococcus (25.0 percent), Pseudomonas aeruginosa (20.8 percent), Candida albicans (18.8 percent), Proteus mirabilis (16.7 percent), Streptococcus spp. (16.7 percent), Enteroccocus faecalis (12.5 percent), Escherichia coli (12.5 percent), Staphylococcus intermedius (6.3 percent), Klebsiella spp. (4.2 percent), andCandida glabrata (2.1 percent). Whereas the control group did not recover from the infectious ear disease, the propolis preparation exhibited antimicrobial activity against most of the microorganisms isolated from samples of the treated group. In addition, no propolis-adverse effects were observed. This allowed propolis-treated patients to show a significant improvement of the clinical parameters. Thus, this new Argentine propolis ear drop formulation may be used for topical treatment of otitis externa in dogs.

Os efeitos terapêuticos da formulação em gotas óticas de própolis procedentes da Argentina foram avaliados no tratamento da otite externa canina. Quarenta e oito cães com sintomas de otite externa foram distribuídos aleatoriamente em ensaio clínico duplo-cego controlado para avaliar a eficácia da formulação tópica com a própolis contra um placebo tópico no tratamento da otite externa. A preparação de própolis e placebo foi administrada em ambos os canais da orelha externa, duas vezes por dia, durante 14 dias. Ao longo do estudo, os cães foram submetidos a exame físico e à análise microbiológica de exsudatos auriculares. Os mais frequentes microrganismos isolados em meios de cultura foram: Malassezia pachydermatis (54,2 por cento), Staphylococcus aureus (43,8 por cento), Staphylococcus coagulase-negativo (25,0 por cento), Pseudomonas aeruginosa (20,8 por cento), Candida albicans (18,8 por cento), Proteus mirabilis (16,7 por cento), Streptococcus spp.(16,7 por cento), Enterococcus faecalis (12,5 por cento), Escherichia coli (12,5 por cento), Staphylococcus intermedius (6,3 por cento), Klebsiella spp.(4,2 por cento) e Candida glabrata (2,1 por cento). A preparação de própolis apresentou atividade antimicrobiana contra a maioria dos microrganismos isolados de amostras do grupo de tratamento, sendo que os do grupo-controle não se recuperaram da doença infecciosa auricular, e não foram observados efeitos adversos à própolis. Isso permitiu aos pacientes tratados com própolis melhora significativa dos parâmetros clínicos. Essa nova formulação da própolis argentina para o ouvido apresenta potencial utilidade no tratamento tópico da otite externa em cães.

Cytotoxicity and morphological analysis of cell death induced by Bothrops venoms from the northeast of Argentina

Bothrops snake venoms have been proved toxic to a variety of cell types, in both in vivo and in vitro models. Studies on the pharmacological actions of Bothrops venoms from Argentina are relatively secarce and the direct action of the crude venoms has not been assessed using cell culture models. In this work, we investigated the cytotoxicity of crude venoms from B. alternatus and B. diporus in a skeletal muscle (C2C12) cell line, which is commonly used as a model for studying the myotoxic action of snake venom. Both venoms (1.25-50 miug/mL) induced an early and significant decrease in cell viability. The cytotoxic concentration 50 (CC50), determined three hours after exposure, revealed that B. diporus venom was significantly more cytotoxic (CC50: 2 miug/mL) than B. aftematus (CC50: 5.8 miug/mL). To investigate the cell death mechanism involved, myoblast cells were examined by phase contrast microscopy and after acridine orange and ethidium bromide fluorescence staining, respectively. Our data clearly demonstrated that an apoptotic mediated this cell line destruction. The current study aimed to provide new information on the citotoxicity meohanisms of Argentine Bothrops snake venoms on a skeletal muscle cell line

IgG antibodies against phospholipase A2 from Crotalus durissus terrificus: cross-reaction with venoms from Bothrops species from Argentina

We examined the ability of IgG anti-crotalic PLA2 to cross-react with Bothrops spp. venoms, from snakes found in the northeast of Argentina. Immunoblotting and ELISA tests showed that IgG anti-crotalic PLA2 recognize antigens of bothropic venoms. Indirect hemolytic activity tests showed that the quantity of antibodies that neutralized 50% of Crotalus durissus terrificus venom (ED50: 2.1 mg IgG anti-crotalic PLA2/100 µg of venom) were also able to neutralize venom from other snakes in the following proportion: 34% of B. alternatus, 18% of B. diporus and 12% of B. jararacussu. Likewise, direct PLA2 activity neutralization tests showed a similar cross-neutralization pattern including 56% of B. alternatus, 29% of B. diporus and 30% of B. jararacussu. In addition, in a myotoxic activity neutralization test, measured by plasma activity of creatine kinase, 35% of B. alternatus venom and 26% of B. diporus venom were neutralized, while no neutralization was detected with B. jararacussu venom. This study presents original data concerning cross-reactions between bothropic venoms from Argentina and IgG anti-crotalic PLA2. Our results suggest that anti-crotalic PLA2 antibodies should not be used to neutralize PLA2 activity of B. alternatus, B. diporus and especially B. jararacussu venoms; nor to enrich commercial antivenoms against these Bothrops species.(AU)

Una revisión de literatura sobre la relación causal entre los factores oclusales (FO) y los desordénes temporomandibulares (DTM) II: Estudios epidemiológicos analíticos de observación / A review of the literature on the causal relationships between occlusal factors (OF) and temporomandibular disordiers (TMD)II: Analytical epidemiological studies of observation

Este es el segundo de una serie de artículos que tienen como propósito presentar una revisión de la literatura acerca de la relación causal existente entre los factores oclusales (FO) y los desórdenestemporomandibulares(DTM). En este artículo se presentan y se analizan los estudios epidemiológicos analíticos de observación; los cuales tienen un grado más alto en la pirámide de la evidencia científica y por tanto pueden ofrecer conclusiones más concretas sobre la posible relación entre FO y DTM. El análisis de los estudios reportados en este artículo no encontró ninguna relación causal entre los FO y el desarrollo de DTM. Aunque sí hubo la asociación de ciertos FO a los DTM, muchos de ellos pueden interpretarse mejor como la consecuencia y no la causa de un DTM. Adicionalmente, aunque en los estudios longitudinales ciertos FO fueron correlacionados con signos o síntomas de DTM, ninguno de los FO se pudo asociar con el desarrollo de un DTM o con alguna categoría diagnóstica entre los DTM.

Una revisión de la literatura sobre la relación causal entre los factores oclusales (FO)y los desórdenes temporomandibulares (DTM)I: estudios epidemiológicos descriptivos / A review of the literature on the causal relationship between occlusal factors (OF) and temporomandibular disorders (TMD)I: descriptive epidemiological studies

Los desórdenes temporomandibulares (DTM) son un conjunto de desórdenes musculoesqueléticos/reumatológicos de la región orofacial que involucran directamente el sistema masticatorio. La etiología de los DTM es controversial y aunque diferentes factores como anatómicos, psicológicos, trauma o patofisiológicos han sido considerados como contribuyentes en el desarrollo de los DTM, la evidencia actual no permite establecer un factor o factores con una relación clara. A pesar de esto, los factores oclusales (FO) han sido tradicionalmente asociados a lo largo de la historia a la etiología de los DTM. Un sin número de estudios se han realizado tratando de aclarar la relación entre los DTM y los FO. Sin embargo, respecto a la importancia de la oclusión en la etiología de DTM, existe actualmente una discrepancia entre la opinión no solamente entre odontólogos generales y clínicos “especialistas” de DTM, sino también entre odontólogos de este último grupo. Esta diversidad de opiniones indica que hay la necesidad de seguir analizando la posible relación entre los FO y los DTM. En primer artículo se presenta una revisión de los estudios descriptivos encontrados en la literatura que se han realizado para estudiar la relación entre DTM y los FO. El análisis de estos reportes epidemiológicos indica que no existe tendencia a favorecer a ninguno de los FO de estar relacionado con la etiología de los DTM y que posiblemente otros factores deberían ser considerados en el desarrollo de ellos.

Evaluación del efecto del rofecoxib en los cambios dentino-pulpares, el movimiento dental y la inhibición de la reabsorción radicular durante la aplicación de fuerzas ortodóncicas intrusivas / Evaluation of the effect of rofecoxib on the dentinal pulp changes, the dental movement and root resorption inhibition during the application of intrusive orthodontic forces

La reabsorción radicular asociada al movimiento dental es un efecto indeseado durante la terapia ortodóncica. El propósito de este estudio fue el de identificar los cambios dentinopulpares, el grado de reabsorción radicular externa (RRE) y la cantidad de movimiento dental en pacientes medicados con rofecoxib durante la aplicación de fuerzas ortodóncicas intrusivas de 2 onzas. La muestra la constituyeron 6 sujetos (12 dientes) en quienes se evaluaron 8 dientes para el grupo experimental (rofecoxib) y 4 dientes para el grupo control (placebo). Se utilizó un aparato fijo tipo barra transpalatina y un bracket adherido a tercio medio de la cara vestibular de los primeros bicúspides superiores, en cada segmento se instaló un alambre TMA con dobleces intrusivos que fueron activados cada seis semanas. El protocolo de administración del medicamento y del placebo se planteó teniendo en cuenta la estabilización de su concentración tras su administración en forma regular. Como parte del tratamiento los premolares fueron extraídos y se realizaron los cortes respectivos, se utilizó coloración de hematoxilina-eosina y tricrómica de Masson para observar los cortes al microscopio de luz. En los cortes histológicos se observó en la capa odontoblástica mayores cambios morfológicos, aumento de las fibras colágenas y angiogénesis en el grupo experimental. Se encontró que el grupo control presentó mayor cantidad de lesiones radiculares que el grupo experimental. Al medir la cantidad de movimiento dental, se observó que los rangos de movimiento bajo el rofecoxib fueron mayores que con el placebo. El rofecoxib mostró ser eficaz en la inhibición de la RRE, comparado con un medicamento placebo en esta muestra. Con las actuales limitaciones del uso del rofecoxib, se puede decir que los inhibidores preferenciales de la ciclooxigenasa-2 (COX -2) presentan mejor control que los inhibidores específicos de la COX-2 en los cambios dentinopulpares deletéreos que se presentan luego del movimie...

Mice plasma fibrinogen consumption by thrombin-like enzyme present in rattlesnake venom from the north-east region of Argentina

Due to variability of venom components from the same species of snakes that inhabit different regions, particular properties of the venom of Crotalus durissus terrificus that inhabits the North-East of Argentina were studied. Gyroxin, a thrombin-like enzyme, was isolated from this venom by gel filtration and affinity chromatography, it was found to be homogeneous according to SDS-PAGE, with a molecular weight of 33 kDa. [quot ]Gyroxin syndrome[quot ] in mice was tested and it showed changes in the animal behavior, confirming that the isolated thrombin-like enzyme is gyroxin. Effects of this enzyme and the crude venom on mice plasmatic fibrinogen levels were determined. The mice plasma fibrinogen decreased rapidly until incoagulability during the first hour after thrombin-like enzyme injection, then reaching its normal level 10 hours after injection; whereas crude venom resulted in a 60% decrease of the mice plasma fibrinogen, reaching its normal level after the same period of time. After 1 hour of gyroxin inoculation, intravascular coagulation was observed in histological cuttings of lung, cardiac muscle and liver. The isolated enzyme showed strong hydrolyzing activity on fibrinogen and fibrin in vitro, whereas the crude venom exhibited weak hydrolyzing activity on both substrates. It is probable that this very low activity is due to the low percentage of the enzyme in the crude venom. Decreasing of plasmatic fibrinogen levels may be due to either the coagulant or hydrolyzing actions of the enzyme.

Teniendo en cuenta la variabilidadde los componentes del veneno de serpientes de una misma especie que habitan regiones diferentes, se decidióestudiar las propiedades particulares del veneno de Crotalus durissus terrificus que habita el nordeste de Argentina, Giroxina, una enzima con actividad trombínica, fue aislada del veneno por cromatografía de filtración por gel y de afinidad; se comprobó su homogeneidad y se determinó su peso molecular, 33 kDa, por SDSPAGE. Se ensayó el síndrome giroxina en ratones, los que mostraron cambios en el comportamiento, confirmandoque la enzima tipo trombina aislada es giroxina. Se evaluó la acción de esta enzima sobre los niveles de fibrinógeno plasmático en ratones, comparándola con la del veneno crudo. Se comprobó que la enzima provoca una disminución de los niveles plasmáticos de fibrinógeno hasta la incoagulabilidad, durante la primer hora de inoculación, mientras que el veneno entero produjo una reducción del nivel plasmático en un 60%; sin embargo, en ambos casos, se evidenció una rápida reposición de fibrinógeno plasmático, alcanzando sus valores normales en un plazo de 10 horas. Se observó coagulación intravascular con la administración de giroxina una hora después de la inoculación, evidenciados en estudios histológicos de tejido pulmonar, cardíaco y hepático. En ensayos realizados in vitro, la enzima aislada mostró capacidad de degradar fibrinógeno como así también coágulos de fibrina, mientras que el veneno exhibió débil actividad hidrolítica sobre ambos sustratos. Es probable que esta baja actividad sea debida a la baja concentración de la enzima en el veneno. La disminución de los niveles de fibrinógeno plasmático observado en ratones se debería a la acción coagulante de la enzima, sin embargo no se descarta que también contribuya a este proceso una acción hidrolítica sobrefibrinógeno y fibrina por parte de la enzima.

Prevalencia de hiperplasia epitelial focal de la comunidad indígena de Cristianía, Municipio de Jardín, Antioquia, 1998 / Prevalence of focal epithelial hyperplasia in schoolchildren from the indigenous community of Cristiania, Jardin, Antioquia, 1998

Se buscaron lesiones de hiperplasia epitelial focal en niños entre los cuatro y los catorce años de edad pertenecientes a la comunidad indígena emberá chamí de Cristianía, localidad del Municipio de Jardín, sudoeste antioqueño. Se examinaron 200 niños, y se encontró que la prevalencia de hiperplasia epitelial focal fue del 7.5 por ciento. En el 46.6 por ciento de los casos la edad estaba entre los cicno y los nueve años y no se encontraron diferencias significativas en cuanto a sexo. El 33 por ciento de los pacientes tenía. El 33 por ciento tenía algún grado de consanguinidad y antecedentes de la enfermedad en familiares. El 66 por ciento de los afectados relató que las lesiones se localizaron inicialmente en la mucosa yugal y el lagio inferior. Al examen clínico el 80 por ciento de los pacientes presentaban lesiones sésiles de bordes nítidos y asintomáticas, de tamaño entre 5 y 8 mm. y el 20.7 por ciento se encontró en la mucosa yugal. Los hallazgos histopatológicos fueron acantosis acantosis del epitelio, hiperqueratosis, papilomatosis, hiperplasia de células basales y presencia de coilocitos en las capas superiores. El 13.3 por ciento de los casos se encontró positivo para papiloma virus humano en pruebas inmunohistoquímicas. Todos fueron negativos para hibridización in situ de los serotipos 6, 11, 16 y 18

Valoración de ruidos articulares en la ATM: punto de vista odontológico / Assessment of TMJ joint sounds: dental point of view

El objetivo este estudio, fue identificar la importancia que le da a diferentes aspectos relacionados con la aparición de ruidos articulares (RA) la articulación en temporomandibular (ATM), un grupo de 290 odontólogos. A los odontólogos se les aplicó una encuesta, en donde se les preguntó acerca de la importancia que les merecía la aparición de RA (clicking y crepitación) y su tratamiento, en ausencia o presencia de otros signos o síntomas; como también, acerca de la relación causal entre maloclusión y RA y sobre la posibilidad de considerarlos normales. Los resultados mostraron que para estos odontólogos, la aparición de RA y su tratamiento, son importantes; ya sea que se presenten, o no, asociados con otros signos o síntomas; y además, consideran que la relación causal entre maloclusión y aparición de RA, es alta.

The purpose of this study was to identify the value of different aspects related with the apperance of TMJ sounds by the dentists. A survey was conducted to the dentists and they were enquired about the importance attached to joint sounds (clicking and crepitus) and their treatment when other signs or symptoms are present or absent. Also, they were asked about the causal relation between malocclusion and joint sounds and the possibility of being considered normal. The results showed that the presence of TMJ sounds and their treatment are important for the dentist, whether the sounds are associated or not with other signs or symptoms. Morover, they considered the causal relation between malocclusion and presence of joint sounds high.

Patrones parenquimatosos mamarios y xeroradiografia. / Mammary parenchymal patterns and xeroradiography

Utilizando xeroradiografia mamaria, se estudiaron 27 pacientes a las cuales se les habia hecho el diagnostico previo de carcinoma utilizando como metodo diagnostico esta modalidad y confirmandolo histologicamente posteriormente. Se integraron 4 diferentes tipos de patrones mamarios segun la apariencia predominante del parenquima de acuerdo a la teoria expuesta por J.N. Wolfe, dividiendose los mismos en: N1 P2 Dy, como indicadores de riesgo a desarrollar carcinoma