Speckle type POZ adaptor protein (SPOP) and its role in cancer / La proteína adaptadora Speckle-type POZ (SPOP) y su papel en cáncer

Abstract Proteasomal degradation is an essential regulatory mechanism for cellular homeostasis maintenance. The speckle-type POZ adaptor protein (SPOP) is part of the ubiquitin ligase E3 cullin-3 RING-box1 complex, responsible for the ubiquitination and proteasomal degradation of biomolecules involved in cell cycle control, proliferation, response to DNA damage, epigenetic control, and hormone signaling, among others. Changes in SPOP have been associated with the development of different types of cancer, since it can act as a tumor suppressor mainly in prostate, breast, colorectal, lung cancer and liver cancer, due to point mutations and/or reduced expression, or as an oncogene in kidney cancer by protein overexpression. In endometrial cancer it has a dual role, since it can act as a tumor suppressor or as an oncogene. SPOP is a potential prognostic biomarker and a promising therapeutic target.

Resumen La degradación proteosómica es un mecanismo de regulación esencial para el mantenimiento de la homeostasis celular. La proteína adaptadora Speckle-type POZ (SPOP) hace parte del complejo ubiquitin ligasa E3 cullin-3 RING-box1, encargado de la ubiquitinación y degradación proteosomal de biomoléculas involucradas en el control del ciclo celular, proliferación, respuesta al daño de ADN, control epigenético, señalización hormonal, entre otros. Las alteraciones en SPOP han sido asociadas al desarrollo de diferentes tipos de cáncer, ya que puede actuar como supresor tumoral principalmente en cáncer de próstata, mama, colorrectal y pulmón, debido a mutaciones puntuales y/o expresión reducida o como oncogén en cáncer riñón por sobreexpresión de la proteína. En cáncer endometrial tiene un rol dual, ya que puede actuar como supresor tumoral o como oncogén. SPOP es considerado como un potencial biomarcador pronóstico y un objetivo terapéutico prometedor.

Evaluación de la metilación del DNA en tejidos de cáncer colorrectal fijados en formalina y embebidos en parafina (FFPE) / Evaluation of DNA methylation in formalin-fixed, paraffin embedded colorectal cancer tissues (FFPE)

Resumen Las alteraciones en la metilación de dinucleótidos CpG en regiones promotoras es uno de los mecanismos epigenéticos implicados en cáncer que tiene uso potencial como biomarcador. Su evaluación, a partir de tejidos fijados en formalina y embebidos en parafina (FFPE), representa un gran desafío dadas la degradación parcial, el entrecruzamiento y las bajas cantidades del DNA obtenido. En esta nota técnica, describimos un protocolo para el estudio del estado de metilación del promotor distal del proto-oncogén K-RAS, a partir de varias muestras obtenidas de dos tejidos FFPE de cáncer colorrectal con antigüedad de 11 años. Se empleó un protocolo de conversión con bisulfito alternativo al usual; se usó una DNA polimerasa modificada y una PCR anidada y se optimizó la secuenciación directa del DNA convertido con bisulfito. Este protocolo podría ser aplicado para determinar estados de metilación en otros genes y tipos de cáncer en tejidos FFPE.

Abstract Alterations in the methylation of CpG dinucleotides in promoter regions is one of the epigenetic mechanisms involved in cancer that has potential use as a biomarker. Its evaluation from formalin-fixed and paraffin-embedded (FFPE) tissues represents a great challenge given the partial degradation, crosslinking, and low amounts of the obtained DNA. In this technical note we describe a protocol for the study of the methylation status of the distal promoter of the K-RAS proto-oncogene from several samples obtained from two 11-years old FFPE tissues of colorectal cancer. An alternative bisulfite conversion protocol to the usual one was used; a modified DNA polymerase and a nested PCR were used and the direct sequencing of the converted DNA with bisulfite was optimized. This protocol could be applied to determine methylation states in other genes and types of cancer.

Experiences of caregivers of boys with Duchenne Muscular Dystrophy: "When I look at him, my world falls apart" / Experiencias de cuidadoras de niños con Distrofia Muscular de Duchenne: "Cuando lo volteo a mirar, se me une el cielo con la tierra"

Resumen La Distrofia Muscular de Duchenne (DMD) es una enfermedad neuromuscular, clasificada como una enfermedad huérfana o rara, transmitida por la madre, y que conlleva al deterioro físico progresivo y fatal de quienes la desarrollan, que en su mayoría son hombres. Aun con los tratamientos farmacológicos disponibles, el pronóstico de vida de los pacientes sigue siendo desalentador. Los niños van perdiendo progresivamente la movilidad y funcionalidad hasta que fallecen. En consecuencia, el progreso de esta enfermedad requiere de cuidados frecuentes o permanentes que implican altos niveles de exigencia para las cuidadoras de niños y de jóvenes que han desarrollado la DMD. El apoyo proveniente del sistema de salud es escaso para ambos, lo que se traduce en una intensa sobrecarga para las madres y mujeres de la familia que son quienes, habitualmente, cuidan a la persona diagnosticada con DMD durante su vida. Este estudio cualitativo de tipo fenomenológico tuvo como objetivos analizar el significado de la experiencia de ser cuidadora de niños y jóvenes que viven con DMD en Colombia, develando el sentido que tiene para las mujeres familiares asumir el rol de cuidadora. Se entrevistaron siete mujeres entre los 25 y los 64 años encargadas de cuidar, por lo menos, a un niño o joven con diagnóstico de DMD, previo consentimiento informado. Adicionalmente, los cuidadores desarrollaron un ejercicio de asociaciones libres. Para el análisis de datos se realizó un análisis temático de las narrativas, encontrando tres temas fundamentales alrededor de los cuales se le da sentido a esta experiencia: (1) descubrir la enfermedad, (2) vivir en función del paciente y (3) reconstruir el sentido de vida. Así, en un momento inicial las cuidadoras se enfrentan al diagnóstico de la enfermedad brindado por los médicos, quienes les explican su curso y su naturaleza. La cuidadora inicia un proceso de duelo, en el que la tristeza, la negación y la resignación tienen lugar, y emociones como la frustración y la impotencia se presentan en su máxima expresión. La manera en la que es comunicado el diagnóstico es evaluada por las cuidadoras como poco sensible. De hecho, ninguna de las participantes en el estudio recibió apoyo psicológico durante el proceso. En segundo lugar, ser la figura de cuidado implicó cambios a nivel personal, familiar y social, para lograr responder a las necesidades de los niños con DMD. En este sentido, algunas debieron renunciar a sus empleos, alejarse de amistades e incluso algunas manifestaron que se han separado de su pareja o han vivido experiencias de deterioro en las relaciones con su pareja y familia extensa. Además, junto con sus hijos han vivenciado experiencias de discriminación, vulneración de derechos y escaso apoyo social, experiencias que son factores de riesgo para la salud mental. Finalmente, la enfermedad termina por constituirse en el elemento vinculante entre ellas y sus niños. Los hallazgos de la presente investigación permiten identificar que, en el proceso de enfermedad, se produce una reconstrucción del sentido de vida. Así, las estrategias de afrontamiento se dirigen a lograr una transformación espiritual. La presencia de la enfermedad es interpretada como una manera de ser probadas y desarrollar sus cualidades como mujer y como madre. Entonces, el cuidado y la relación madre-hijo, son componentes motivacionales que transforman y dan sentido a la vida. En conclusión, los resultados muestran que el significado de la DMD está fuertemente vinculado a un proceso de intenso sufrimiento y estrés psicológico, con alta carga negativa. En particular, durante los primeros años después del diagnóstico, que debe ser asimilado y elaborado para aprender a convivir con la DMD y la certeza de la muerte prematura de un hijo.

Abstract Duchenne muscular dystrophy (DMD) is a neuromuscular disease that leads to progressive and fatal physical deterioration. The progression of this disease requires frequent or permanent care that implies high levels of demand for the caregivers of children who have developed DMD. Certainly, this disease affects diagnosed children and their caregivers as well. The support from the health system is scarce for both, which translates into an intense burden for the mothers and women of the family who care the person diagnosed with DMD during their lifetime. This qualitative study with phenomenological approach aimed to analyze the meaning of the experience of being a caregiver for boys and young men living with DMD in Colombia. After obtaining their informed consent, caregivers were interviewed and a thematic analysis of their narratives was performed to determine three key topics that endow their experiences with meaning: (1) finding out about the disease, (2) living according to the needs of boys and young men, and (3) providing a new meaning to life. The results show that the meaning of DMD is strongly associated with intense suffering and psychological stress, with a high negative burden, especially during the initial years after diagnosis. The study suggests that it is important to assimilate and process these experiences and findings to learn how to live with DMD and identify the certainty of a child's premature death.

Productividad científica de las líneas de investigación y su contribución para el control del cáncer en Colombia: Scientific production of the research lines and its contribution for the control of cancer in Colombia / Scientific production of the research lines and its contribution for the control of cancer in Colombia

Introducción: En 2007 el Instituto Nacional de Cancerología (INC) realizó un ejercicio para la definición de ocho líneas de investigación que abarcan temáticas para poder enfocar la investigaciónen cáncer en Colombia y poder realizar una priorización acertada de las temáticas a investigar. Objetivo: Evaluar la productividad en términos de artículos científicos generados y la formación de recurso humano de cada una de las líneas de investigación. Métodos: Se realizó la búsqueda de grupos de investigación con producción en cáncer en la plataforma ScienTI del Departamento Administrativo de Ciencia, Tecnología e Innovación de Colombia (Colciencias), con fecha de corte a julio de 2013. Estos grupos fueron clasificados en las líneas de investigación correspondientes según el contenido de los productos evaluados y fueron cuantificados. Resultados: La línea de Biología del cáncer fue la que mayor cantidad de productos generó, tanto en números absolutos como en cocientes ajustados por número de grupos vinculados y evidenciando que es la más consolidada. La línea de Diagnóstico y tratamiento, aunque registró la mayor cantidad de grupos vinculados, tuvo una productividad ajustada por grupo inferior a la de otras líneas. Las dos líneas más rezagadas fueron las líneas de Servicios oncológicos y de Actuar político y cáncer. Conclusiones: El hecho de que las líneas tengan tantas diferencias en su proceso de consolidación en Colombia supone que existen líneas que requieren del diseño y la implementación de estrategias que las fortalezcan, mediante acciones que involucren la gestión del conocimiento y la tecnología, y la formación y el desarrollo del talento humano.

Introduction: In 2007, the Instituto Nacional de Cancerología (INC) of Colombia carried out an exercise by defining eight lines for research, which included topics for focusing on cancer research in Colombia, as well as setting out to prioritise certain topics to investigate. Objective: To evaluate the productivity of these cancer research lines in terms of the training of human resources and the quantity of published scientific articles. Methods: After defining the key words, a search was made in the ScienTI platform of the Administrative Department of Science, Technology and Innovation of Colombia (Colciencias), up to a cut-off date of July 2013, in order for identify scientific productivity of groups, institutions, projects, and products for each cancer research line. Results: Cancer Biology was the most consolidated line with the most researchers, groups, projects and products, both in absolute numbers as well in ratios adjusted for number of groups involved. Diagnosis and treatment, although it registered the highest number of groups involved, it had an adjusted productivity lower than other lines. The two least developed lines were Oncology services and updating cancer policy. Conclusion: The fact that research lines have so many differences in their consolidation process in Colombia means that there are some lines need designs and strategies that may strengthen them. This requires actions involving the management of knowledge and technology, as well as the training and development of human resources.

Circulating microRNAs as potential cancer biomarkers / MicroRNA circulantes como potenciales biomarcadores en cáncer

Cancer is currently recognized as a major cause of mortality worldwide, and, as such, has a significant impact on public health. Successful early detection strategies are linked to a decrease in mortality; however, because they are invasive, highly complex, and have low specificity, their application has been limited. MicroRNAs (miRNAs) are short, non-coding RNA sequences capable of regulating gene expression. Molecular mechanisms of miRNAs in cancer are not fully understood, but specific patterns of miRNAs expression have been associated with many tumour types. MicroRNAs as biomarkers can help to identify tumour origin and allow their early detection. They can also be used to monitor progression and therapeutic response. The presence and stability of miRNAs in blood, as circulating miRNAs, are major factors that contribute to their use as potential biomarkers in a clinical context. The aim of this article is to present a review of miRNAs as circulating biomarkers in cancer.

El cáncer es reconocido como una de las principales causas de mortalidad a nivel mundial teniendo así un impacto significativo en la salud pública. Una disminución en la mortalidad por esta enfermedad se ha asociado con estrategias exitosas de detección temprana; sin embargo, debido a que estas son invasivas, altamente complejas y registran baja especificidad, su aplicación ha sido limitada. Los microRNA (miRNA) son RNA no codificantes de secuencias cortas, capaces de regular la expresión génica. Los mecanismos moleculares de los miRNA en cáncer aún no están totalmente clarificados, pero patrones específicos de la expresión de estos han sido asociados con muchos tipos de tumores. Los miRNA como biomarcadores pueden ayudar a identificar el origen de un tumor, realizar detección temprana, predecir la progresión de la enfermedad y la respuesta al tratamiento. La presencia y estabilidad de los miRNA en la sangre, como miRNA circulantes, son los principales factores que contribuyen a su uso potencial como biomarcadores en un contexto clínico. El objetivo de este artículo es realizar una revisión sobre los miRNA circulantes en cáncer.

Investigación en cáncer en Colombia, 2000-2010 / Cancer Research in Colombia, 2000-2010

Introducción: La investigación en cáncer debe generar conocimiento que contribuya al control del cáncer y a orientar mejor la investigación. Objetivo: Caracterizar la investigación en cáncer en Colombia realizada entre 2000 y 2010, determinando el número de personas, grupos e instituciones que estudian el cáncer e identificar su producción bibliográfica y proyectos de investigación realizados. Métodos: Se realizó un estudio descriptivo para el periodo 2000-2010, de índole bibliométrico mediante consulta a las plataformas Scien TI y SIGP de Colciencias, para identificar investigadores, grupos de investigación, instituciones y proyectos. Para determinar la producción bibliográfica asociada, se consultaron las bases de datos Web of Science, Scopus y PubMed. Resultados: Se identificaron 1.982 personas asociadas a 546 grupos, 129 instituciones avaladoras y 2.481 productos de investigación en cáncer. Los tipos de cáncer más estudiados correspondieron a: cuello del útero, estómago, mama, leucemias e hígado. Las líneas de investigación más desarrolladas fueron diagnóstico, tratamiento y biología del cáncer. Los tipos de publicación más frecuentes fueron pruebas diagnósticas, series de casos y los artículos de opinión. El promedio del factor de impacto de las revistas donde se hicieron publicaciones fue de 2,53. Discusión: A pesar del incremento observado en las capacidades nacionales para la investigación del cáncer, se identificaron limitaciones en la visibilidad de los productos generados y en la investigación en determinados tipos de cáncer que tienen alta incidencia en el territorio colombiano.

Introduction: Cancer research must generate knowledge that permits the improvement of the different components of cancer control. The information about research topics, resources and capabilities in this country will enable adjustments to be made aimed at achieving a greater impact on cancer control and management. Purpose: To describe the general features of cancer research in Colombia between 2000 and 2010, in terms of the number of individuals, groups and institutions developing research in cancer, and to identify the cancer projects developed and their associated bibliographic production. Methods: The Colciencias platforms were consulted in order to identify cancer-related researchers, research groups, institutions and projects. A search was conducted in the databases Web of Science, Scopus and PubMed to determine the associated bibliographic production. Findings: A total of 1,982 individuals, 546 groups, 129 institutions, and 2,481 cancer research products were identified, with the most frequently studied cancers being cervix, stomach, breast, leukemia, and liver. The most common developed cancer research areas were diagnosis and treatment, and cancer biology. The most common publication types were diagnostic tests, case series, and review articles. The average publication impact factor was 2.53. Discussion: Despite the increase in cancer research capacity observed in recent years in Colombia, limitations in the visibility of the bibliographic production were observed, as well as a lack of research in some common cancers.

Identification of three new mutations in the RB1 gene in patients with sporadic retinoblastoma in Colombia / Identificación de tres nuevas mutaciones en el gen RB1 en pacientes con retinoblastoma esporádico en Colombia

Introduction. Retinoblastoma is a childhood cancer of the retina originated by altered or null retinoblastoma protein (pRb) expression. Genetic alterations in both RB1 alleles in the retinal cells are required for the development of retinoblastoma. In the sporadic form, non-hereditary RB1 gene mutations take place in a single retinoblast cell, and are therefore only present in tumor DNA (somatic mutations). Sporadic retinoblastoma is primarily unilateral, lacks family history and has no risk of transmission to descendants. Genetic tests for detection of RB1 mutation has improved the identification of carriers and facilitated accurate genetic counseling. Objective. To identify mutations in the RB1 gene in Colombian patients with sporadic retinoblastoma by PCR-SSCP followed by sequence. Materials and methods. Four patients with sporadic retinoblastoma were analyzed by PCR-SSCP, followed by DNA sequencing to identify variations in the RB1 gene. Results. We identified five variations in RB1 gene: three new mutations (one germline and two somatic mutations), one new polymorphism and one already reported somatic mutation. Four mutations were found in three patients with unilateral retinoblastoma and one mutation was found in a patient with bilateral retinoblastoma. One of these was a germline mutation in a sporadic unilateral retinoblastoma that was not present in the parents or three siblings analyzed. Conclusions. Our results emphasize the importance of identifying mutations for genetic counseling and clinical management of sporadic retinoblastoma patients. Description of a new RB1 gene variant is interesting since there have been a small number of polymorphisms reported for this gene.

Introducción. El retinoblastoma es un cáncer pediátrico de la retina originado por la expresión alterada o ausente de la proteína del retinoblastoma (pRb). Se requiere la alteración genética de ambos alelos RB1 en las células de la retina para el desarrollo del retinoblastoma. En la forma esporádica, las mutaciones no hereditarias del gen RB1 ocurren en un solo retinoblasto y están presentes sólo en el ADN del tumor (mutaciones somáticas). El retinoblastoma esporádico es generalmente unilateral, no tiene historia familiar y no tiene riesgo de transmisión a la descendencia. Las pruebas genéticas para la detección de mutaciones en RB1 han mejorado la identificación de portadores y han facilitado la precisión de la asesoría genética. Objetivo. Detectar mutaciones en el gen RB1 en pacientes colombianos con retinoblastoma esporádico mediante PCR-SSCP seguido de secuenciación. Materiales y métodos. Se analizaron cuatro pacientes con retinoblastoma esporádico para la detección de variaciones en el gen RB1 mediante PCR-SSCP, seguida de secuenciación. Resultados. Se identificaron cinco variaciones del gen RB1 : tres mutaciones nuevas (una de línea germinal y dos somáticas), un polimorfismo nuevo y una mutación somática ya reportada. Las cuatro mutaciones se encontraron en tres pacientes con retinoblastoma unilateral y uno con bilateral. La mutación germinal se detectó en un paciente con compromiso unilateral y no se encontró en los padres ni en los tres hermanos analizados. Conclusión. Estos resultados enfatizan la importancia, para asesoría genética y manejo clínico, de identificar mutaciones del gen RB1 en pacientes con retinoblastoma esporádico. La descripción de una nueva variante en RB1 es interesante, dado el muy bajo número de polimorfismos reportados para este gen.

Vías de carcinogénesis colorrectal y sus implicaciones clínicas / Pathways of colorectal carcinogenesis and their clinical implications

El cáncer colorrectal (CCR) es la cuarta causa de mortalidad por cáncer en Colombia y en el mundo, en ambos sexos; por esta razón, es considerado un problema de salud pública. El CCR es altamente heterogéneo en su fenotipo y genotipo, lo que está en relación con las diferentes vías de carcinogénesis descritas que implican diferentes mecanismos de progresión y agresividad de la enfermedad. Las vías clásicas, supresora y mutadora, se caracterizan por una serie de alteraciones genéticas relacionadas con los cambios fenotípicos de la progresión morfológica en la secuencia adenoma-carcinoma. Las vías alternas, originadas por mutaciones en los genes, BRAF y KRAS, se relacionan con la progresión de pólipo aserrado a carcinoma. Conocer estas vías es muy importante para comprender la enfermedad de manera integral y profundizar en el estudio de sus mecanismos de control, que incluyen: diagnóstico temprano, tratamiento y seguimiento.

Colorectal cancer (CRC) is ranked fourth among causes of cancer mortality in Colombia and in the world, for both genders; it is therefore regarded as a public health issue. CRC´s phenotype and genotype are highly heterogeneous, a fact related to the various carcinogenic pathways described, and which is also implicated in the different progression mechanisms and the aggressiveness of the disease. The classic pathways, suppressive and mutable, are characterized by a series of genetic alterations related to phenotype changes in the morphologic progression of the adenoma-carcinoma sequence. The alternate pathways, originated by BRAF and KRAS gene mutations, are linked to the serrated polyp progression to carcinoma. Knowledge of these pathwaysis very important in achieving a fuller understanding of the disease and for broadening the study of mechanisms for its control; these include: early diagnosis, treatment and follow-up.

Incidencia de cáncer de mama en mujeres menores de 40 años en el Área Metropolitana de Bucaramanga, 2000-2004 / Incidence of breast cancer in women younger than 40 years in the Metropolitan Area Bucaramanga, 2000-2004

Antecedentes: El cáncer de mama es una de las patologías más estudiadas por su alta morbilidad y mortalidad. En Colombia es una de las neoplasias más frecuentes, pero se poseen pocos datos sobre su incidencia, principalmente entre las mujeres menores de 40 años. En el Área Metropolitana de Bucaramanga se ha desarrollado un sistema de vigilancia epidemiológica poblacional a partir del año 2000. Metodología: Durante los años 2000 a 2004 el Registro Poblacional de Cáncer del Área Metropolitana de Bucaramanga (RPC-AMB), captó 895 casos de cáncer de glándula mamaria de los cuales 104 casos son de mujeres menores de 40 años. Estos casos fueron analizados, evaluando la incidencia y características tumorales como morfología, estadio y grado. Resultados: El cáncer de mama en la población de mujeres menores de 40 años del Área Metropolitana de Bucaramanga, representa el 11.6% de todos los casos de cáncer de esta localización. Su tasa cruda anual específica por rango de edad fue de 11.2 eventos por cada 100,000 mujeres entre los 20-40 años y al ajustarse la tasa para este grupo poblacional se encuentran 2.8 casos nuevos por año. Conclusión: Comparado con las cifras encontradas en otros países, la frecuencia de cáncer de mama en mujeres menores de 40 años de edad en el Área Metropolitana de Bucaramanga es mayor que en Estados Unidos y Brasil y menor que en México, Malasia, China e Irán. [Uribe CJ, Álvarez M, Montañez G. Incidencia de cáncer de mama en mujeres menores de 40 años en el Área Metropolitana de Bucaramanga, 2000-2004. MedUNAB 2010; 13:81-84].

Background: Breast cancer is one of the most studied pathologies due to its higher morbidity and mortality. In Colombia is one of the most common neoplasms, although few data of its incidence is available mainly among women under 40 years. In Metropolitan Area of Bucaramanga epidemiological population surveillance is being developed since 2000. Methods: During 2000 to 2004 the population based cancer registry in Metropolitan Area of Bucaramanga (RPC­AMB), 895 cases of breast cancer were collected; 104 cases were from women under 40 years. These cases were analyzed assessing the incidence and tumor characteristics such as morphology, presentation disease and grade. Results: Breast cancer among women under 40 years in Metropolitan Area of Bucaramanga, represents 11.6% of all cancer cases in this location. Its annual crude rate was 11.2 events per 100,000 women between 20-40 years and the standardized rate is 2.8 new cases per year. Conclusions: Comparing the data found in other countries, the frecuency of breast cancer among women under 40 years old in the Metropolitan Area of Bucaramanga is higher than U.S. and Brazil and lower than Mexico, Malaysia, China and Iran. [Uribe CJ, Álvarez M, Montañez G. Breast cancer incidence in women under 40 years old at Metropolitan Area of Bucaramanga, 2000-2004. MedUNAB 2010; 13:81-84].

Frecuencias de las perdidas de heterocigocidad en la regi¨®n que codifica para HLA en biopsias de pacientes con c¨¢ncer de cuello uterino / Frequency of Heterozygosity Loss in the Region to be Encoded by HLA in Biopsies of Patients with Cervical Cancer

Objetivo: Determinar las frecuencias de p¨¦rdidas de heterocigocidad de LOH en las regiones 6p21.3 y 15q21 que codifican para HLA y ¦Â2 microglobulina, para establecer su correlaci¨®n con el estadio tumoral, teniendo en cuenta que las LOH en HLA I ocurren como un evento gen¨¦tico temprano del c¨¢ncer y pueden contribuir a su desarrollo. M¨¦todos: Se tomaron muestras de sangre perif¨¦rica (SP) y biopsias de cuello uterino de pacientes con NICIII y CCU. Se amplificaron 11 microsat¨¦lites relacionados con el sistema HLA en pares normal-tumor a partir de ADN purificado de c¨¦lulas de SP y c¨¦lulas tumorales microdisectadas. Las LOH fueron determinadas por electroforesis capilar y analizadas mediante los programas GeneScan y Genotyper. Resultado: Todas las muestras amplificaron m¨¢s de 7 microsat¨¦lites (promedio 9,5). El porcentaje de heterocigocidad para los marcadores de microsat¨¦lites utilizados en las muestras de cuello uterino vari¨® entre 51,8% y 95%, y la LOH, entre 17,4% y 50,0%. Las frecuencias observadas para LOH en los diferentes estadios tumorales fueron: 42,9% en el grupo de NIC-III; 57% en CCU en estadio I; 63,6% en CCU en estadio II y 92,85% en pacientes con estadios m¨¢s avanzados (III-IV). Conclusi¨®n: Se observ¨® una mayor frecuencia de LOH en los grupos de pacientes con estadios avanzados de CCU, al comparar con pacientes con NIC-III.

Objective: To determine the frequency of LOH heterozygosity in the regions 6p21.3 and 15q21 which encode for HLA and ¦Â2microglobulina in order to establish their correlation with tumoral stage, taking into account that LOH and HLA I occur as an early genetic event in cancer and can contribute to its development. Methods: Peripheral blood (PB) samples and cervical biopsies were taken from patients with CIN III and invasive cancer. Amplification was made of eleven microsatellites related to the HLA system, in normal-tumor pairs, based on purified DNA PB cells and micro-dissected tumor cells. LOH were determined through capillary electrophoresis and analyzed with GeneScan and Genotyper programs. Results: All samples amplified at more than 7 microsatellites (average 9.5). The percentage of heterozygosity for microsatellite markers used in the cervical samples varied between 51.8% and 95%; the LOH, between 17.4% and 50.0%. The frequencies observed for LOH in the different tumoral stages were: 42.9% in the CIN III group; 57% in invasive cancer Stage I; 63.6% in Stage II, and 92.85% in patients in the most advanced stages (III-IV). Conclusion: Greater frequency of LOH was observed in groups of patients with advanced stages of invasive cancer in comparison with patients with CIN III.

Papel de la vía fosfatidilinositol 3 kinasa (PI3K/Akt) en humanos / Role of phosphatidylinositol 3-kinase pathway (PI3K/Akt) in humans

La vía de señalización de la fosfatidilinositol- 3-kinasa (PI3K) es crucial en numerosos aspectos del crecimiento y la supervivencia celular. Esta vía es estimulada fisiológicamente como consecuencia de muchos factores de crecimiento y factores reguladores. Varias alteraciones genéticas como amplificación, mutación y rearreglos cromosómicos pueden comprometer la vía PI3K, generando su activación permanente. En diferentes tipos de cáncer se han encontrado evidencias de estas modificaciones genéticas deletéreas. La activación anormal de la vía PI3K resulta en alteración de los mecanismos de control del crecimiento y la supervivencia celular, lo que favorece el crecimiento competitivo, la capacidad metastasica y, frecuentemente, una mayor resistencia a los tratamientos. El objetivo de este articulo es revisar los aspectos relacionados con el funcionamiento de la vía de señalización PI3K/ Akt y su rol dentro del proceso de carcinogénesis en los seres humanos.

The signaling pathway of phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) is critical in many aspects of growth and cell survival. The path of PI3K is stimulated physiologically as a result of many growth factors and regulatory factors. Several genetic alterations such as amplification, mutation and chromosomal arrangements may compromise the PI3K pathway, generating permanent activation in different cancer types have found evidence of these deleterious genetic modifications. Abnormal activation of the PI3K pathway results in alteration of the control mechanisms of growth and cell survival, which favors the competitive growth, and frequently metastatic capacity, greater resistance to treatment. The aim of this paper is to review matters relating to the operation of the PI3K/Akt signaling pathway and its role in the process of carcinogenesis in humans.

Extracción de ADN, ARN y proteínas de células cervicales provenientes de cepillados cervicales tomados para citología cérvico-uterina / DNA, RNA and Protein extraction from exfoliated cervical cells taken

Introducción: La citología cérvico-uterina (CCU) en el método más empleado en el tamizaje de lesiones precancerosas de cuello uterino. Sin embargo, la CCU tiene una proporción importante de falsos positivos y negativos, y sólo una minoría delesiones precancerosas identificadas desemboca en cáncer de cuello uterino.Objetivo: Analizar si de los cepillados cervicales es posible extraer ADN, ARN y proteínas útiles para estudios de marcadores de carcinogénesis cervical.Métodos: Se recolectaron 281 cepillados cervicales. ADN, ARN y proteínas de las células cervicales fueron extraídos empleando Trizol. Se realizó PCR para el gen de la beta globina, para evaluar el ADN extraído y RT-PCR de GAPDH y UBC, para evaluar el ARN extraído. Mediante PCR en tiempo real se cuantificó el número de copias de UBC. Las proteínas fueron cuantificadasempleando el método del ácido biscinconínico. Resultados: Nueve muestras fueron negativas para PCR de beta globina (3,2%). Otras nueve fueron negativas para RT-PCRde GAPDH (3,2%), pero 176 fueron negativas para RT-PCR de UBC. Las 105 muestras restantes fueron positivas para UBC empleando PCR en tiempo real. Las proteínas extraídas estuvieron en el rango de 30 a 4559 [mi]g/ml, dos de las 281 muestras fueron negativas para proteínas por el método del ácido biscinconínico. Conclusión: De los cepillados cervicales se puede extraer ADN, ARN y proteínas útiles para la búsqueda de marcadoresmoleculares en cáncer de cuello uterino; sin embargo, por el tipo de muestra analizado se recupera menos ARN. El usode RT-PCR de GAPDH para evaluar la calidad del ADN complementario sintetizado puede dar falsos positivos debido a la presencia de seudogen procesado. Se recomienda el uso de otros genes constitutivos como UBC.

Introduction: Papanicolau (Pap) test is the most employed screening test for precancerous cervical lesions. However, this test has an important proportion of false positives and false negatives, only a minority of the identified lesions will progress to cancer. Objective: To evaluate the remnant of cervical scrapes after the preparation of the slide as source of DNA, RNA and proteinsfor search of molecular markers of progression of precancerous lesions.Methods: DNA, RNA and proteins were extracted from 281 cervical scrapes using Trizol. To evaluate the quality of DNA a PCR for beta globine was used, RNA quality was tested by RT-PCR of GADPH and UBC genes. Real time PCR was used to evaluate the number of RNA copies of UBC gene. The protein level was obtained by the biscinconinic acid method. Results: Nine samples were negative for beta globin PCR (3,2%), 9 samples were negative for GAPDH RT-PCR (3,2%) and 176 samples were negative by UBC RT PCR , the remnant 105 were positive for UBC in real-time PCR. The extracted proteinswere in a rank between 30 and 4559 [mi]g/mL, two of 281 samples were negative for proteins. Conclusion: From cervical scrapes is possible to extract DNA, RNA and proteins usable in biomarkers research, however therecovery of RNA is lower, this can due to some characteristics inherent to the cervical cells. The use of GAPDH as in RT PCR to evaluate DNA quality can generate false positives due to the presence of a processed pseudogen, it is recommended the use of other constitutive gen like UBC.

Serum levels of insulin-like growth factor-I and -II and insulinlike growth factor binding protein 3 in women with squamous intraepithelial lesions and cervical cancer / Niveles séricos de los factores de crecimiento similares a la insulina I y II y su proteína 3 de enlace en mujeres con lesiones escamosas intraepiteliales y cáncer de cuello uterino

Introduction. Pap smear has limitations as a screening test for cervical cancer. A marker that allows the identification of women who are at risk of developing cervical cancer would be useful for its prevention. A growing number of studies have demonstrated an association between insulin-like growth factors (IGF) serum levels and increased risk for various cancers. Objective. To assess whether circulating IGF-I, IGF-II, or IGF binding protein 3 (IGFBP-3) were associated with cervical cancer and low-grade and high-grade squamous intraepithelial lesions (LSIL and HSIL). Materials and methods. Serum levels of IGF-I, IGF-II and IGFBP-3 were measured by ELISA. Three groups of cases were analyzed: LSIL (n = 37), HSIL (n = 57), and cervical cancer (n = 41). For each case, two controls, matched by age, were included. Control subjects were women with normal, HPV-DNA-negative Pap smear. Results. Significantly lower values of IGF-I (83.9 ng/ml versus 126.6 ng/ml, p < 0.001) and IGFI: IGFBP-3 molar ratio (0.094 versus 0.137, p < 0.001) were observed among cancer cases, as compared to their control group. Women in the highest quartile of IGF-I and IGF-I:IGFBP-3 molar ratio were at an 80 por ciento (OR = 0.2, 95 por ciento CI [0.06-0.61]) and a 77 por ciento (OR = 0.23, 95 por ciento CI [0.07- 0.73]) lower risk of cervical cancer, respectively, compared with women in the corresponding reference category. Conclusions. These data suggest that low values of IGF-I and IGF-I:IGFBP-3 molar ratio may be associated with cervical cancer.

Infección por virus del papiloma humano en una muestra de mujeres jóvenes con citología normal / Human Papillomavirus infection in a sample of young women with normal PAP smear

Introducción: En Colombia, el cáncer de cuello uterinoes la primera causa de muerte por cáncer de mujeres en edad reproductiva. El VPH se considera un factor etiológico necesario pero no suficiente, ya que sólo una minoría de las infecciones progresan a cáncer, lo cual señala la existencia de otros cofactores requeridos para la transformación. Objetivos: Determinar factores asociados a la infección por VPH en una muestra de 218 mujeres jóvenes de Bogotá con citología normal. Materiales y métodos: La presencia de VPH en cepillado cervical se determinó mediante PCR GP5+/GP6+ y se recolectó información sobre factores asociados a infección. Resultados:La prevalencia de VPH fue de 17,4por ciento. Se encontró un mayor riesgo de infección en mujeres que han tenido más de cinco compañeros sexuales (OR=2,65; IC95por ciento 1,16-6,03)y cuya pareja no usa condón (OR=2,8;IC95por ciento 1,12-7,03). En cuanto al número de embarazos a término, se encontró que las mujeres con hijos tenían menor riesgo de infección y que el riesgo era menor entre mayor fuera el número de hijos. No se observaron asociaciones significativas con respecto a las otras variables analizadas. Coclusiones: los resultados muestran una alta prevalencia de infección por VPH en mujeres jóvenes con citología normal,similar a las reportadas en otros países. Se encontró asociación de la infección con factores sexuales como el número de compañeros sexuales, la carencia de compañero sexual habitual, la carencia de hijos y el no uso de condon

Tipificación de virus del papiloma humano mediante secuencia directa en mujeres con citología normal / HPV typing by direct DNA sequencing among women with normal prap smears

Introducción: el virus del pailoma de humano (VPH) se considera un factor etiológico necesario, pero no suficiente, en la carcinogénesis cervical. Aunque la prevalencia de esta infección es homogéa a nivel mundial, la prevalencia tipo-específica varía según la región geográfica. El objetivo de este estudio es determinar mediante secuencia directa la prevalencia tipo-específico de la infección por VPH en una muestra de mujeres jóvenes de Bogotá (Colombia) con citología normal. Materialea y métodos: se determinó la presencia de VPH en cepillados cervicales en 230 mjeres entre 18 y 36 años con citología normal mediante PCR GP5+/GP6+, y mediante la técnica SSCP y secuencia directa se realizó la tipificación de VPH. Resultados: Se encontró una prevalencia de la infección por VPH de 18,2 por ciento. Se detectaron quince tipos de VPH, de los cuales cuatro no se hubieran podido tipificar por métodos convencionales de hibridación. Los cinco tipos más prevalentes fueron el VPH16, VPH31, candidato VPH90, VPH59 y VPH18. La prevalencia de los tipos de alto riesgo fue de 10,4 por ciento y la de los de bajo riesgo, de 4,3 por ciento. de dos tipos identificados se desconoce su potencial oncogénico (HPGA6053 y L1AE9). Conclusión: la secuencia directa de ADN permitió identificar tipos VPH que no hubieran podido ser tipificados con otros métodos, en particular el candidato VPH90, el cual se encontró como el tercero más frecuente en esta muestra. Se confirmó la alta prevalencia de VPH59,tipo viral poco frecuente en regiones diferentes a Centro y Suramérica.

APOE epsilon4 and Alzheimer's disease: positive association in a Colombian clinical series and review of the Latin-American studies

OBJECTIVE: As the strength of the association between the APOE epsilon4 allele and Alzheimer's disease (AD) varies across ethnic groups, we studied if there was such an association in Colombian patients. METHOD: We performed apolipoprotein E (APOE) genotyping in a clinical sample of 83 unrelated AD patients, predominantly late-onset (>65 yrs) including familial ( n =30) and sporadic AD cases (n= 53) diagnosed according to NINCDS-ADRDA criteria and assessed by a multi-disciplinary team. Control subjects (n = 44) had no significant cognitive impairment by medical interview and neuro-psychological testing. RESULTS: We found a high association (OR= 5.1 95 percentCI 1.9 -13.6) between APOE epsilon4 and AD, in this series with predominantly late-onset cases with familial aggregation in 24 cases (28.9 percent). A significant negative association was found between epsilon2 and AD (OR= 0.2 95 percent CI 0.05-0.75). CONCLUSION: Further population-based surveys in Colombia are warranted to precise a possible dose effect of APOE epsilon4

Precisión y exactitud, de tres métodos tomográficos de medición anatómica para osteointegración en maxilar inferior / Precision and accuracy of three tomography methods for anatomical measurement of posterior jaw osseointegration

El propósito de este estudio fue evaluar el grado de correlación de tres técnicas topográficas: tomografía axial computadorizada con el programa Dent Scan y la tomografía lineal, accesibles en Santafé de Bogotá, con el fin de establecer cuál de estas técnicas es la mas aproximada a la realidad clínica para ser utilizada en el diagnóstico prequirúrgico de fijaciones oseointegradas en maxilar inferior. La investigación fue realizada en 10 mandíbulas secas, parcialmente adéntulas, las cuales se fijaron en una placa acrílica para la estandarización de todas las técnicas. A cada una se le realizaron tres cortes tomográficos unilaterales obteniéndose un total de 30 cortes por cada modalidad radiográfica. Una vez obtenida la imagen topográfica se procedió a la sección anatómica de todos los especimenes. Para tomar los cortes de las tomografías se realizaron tres puntos de referencia: a 1cm distal del agujero montonero, a 2 cm y a 3 cm del mismo. Cada punto fue marcado con material radiopaco. Las imágenes topográficas fueron comparadas entre si para establecer el grado de exactitud y precisión, con las medidas de cada sección anatómica en cuanto a la altura y ancho bucolingual de las mandíbulas. Se observó que de acuerdo a la interpretación topográfica para cada técnica, todos los datos se correlacionaron adecuadamente con las mediciones de los especimenes, pero con el Dent Scan se obtuvo una correlación casi perfecta.

Tratamiento de la hipertensión arterial esencial con dieta rica en potasio

Con el objetico de determinar el efecto sobre la presión arterial de una dieta rica en potasio en pacientes adultos con hipertensión arterial leve, sin modificaciones en el consumo habitual de sodio y que no se encuentren bajo tratamiento farmacológico, se estudiaron 24 pacientes, distribuidos aleatoriamente en dos grupos. Al grupo de estudio se le ordenó iuna dieta rica en potasio (alrededor de 2mEq/kg-día), durante ocho semanas. A todos los pacientes se les recomendó continuar las medidas no farmacológicas usuales. Se midió la presión arterial semanalmente en el domicilio del paciente, así como el potasio y el sodio en suero y orina al inicio y en las semanas dos,cuatro y ocho. En todos los sujetos se observó disminución en las cifras tensionales; sin embargo, la reducción de la presión arterial sistólica en el grupo de estudio fue de 7.9ñ7.99 vs 18ñ8.72 mm Hg en el control (p<0.023); mientras que la reducción en la presión diastólica fue de 8.28ñ5.89 Vs 2.86ñ4.31 mm Hg,respectivamente (p<10elevada a la - 7). El efecto sobre la presión arterial tiende a estabilizarse a partir de la cuarta semana de tratamiento. No hubo modificaciones en los niveles séricos de potasio. Se observó incremento en la excreción de potasio en el grupo de estudio de 10.09ñ25.5 vs -4.98ñ19.15 mEq/L en el control (p<0,069). Se concluye que una dieta rica en potasio contribuye favorablemente para el control de la hipertensión arterial esencial y es una medida segura en pacientes con función renal normal