Optimization of flask culture medium and conditions for hyaluronic acid production by a streptococcus equisimilis mutant nc2168

A mutant designated NC2168, which was selected from wild-type Streptococcus equisimilis CVCC55116by ultraviolet ray combined with60Co-γ ray treatment and does not produce streptolysin, was employed to produce hyaluronic acid (HA). In order to increase the output of HA in a flask, the culture medium and conditions for NC2168 were optimized in this study. The influence of culture medium ingredients including carbon sources, nitrogen sources and metal ions on HA production was evaluated using factional factorial design. The mathematical model, which represented the effect of each medium component and their interaction on the yield of HA, was established by the quadratic rotary combination design and response surface method. The model estimated that, a maximal yield of HA could be obtained when the concentrations of yeast extract, peptone, glucose, and MgSO4 were set at 3 g/100 mL, 2 g/100 mL, 0.5 g/100 mL and 0.15 g/100 mL, respectively. Compared with the values obtained by other runs in the experimental design, the optimized medium resulted in a remarkable increase in the output of HA and the maximum of the predicted HA production was 174.76 mg/L. The model developed was accurate and reliable for predicting the production of HA by NC2168.Cultivation conditions were optimized by an orthogonal experimental design and the optimal conditions were as follows: temperature 33ºC, pH 7.8, agitation speed 200 rpm, medium volume 20 mL.

Bacteriophage amplification assay for detection of Listeria spp. using virucidal laser treatment

A protocol for the bacteriophage amplification technique was developed for quantitative detection of viable Listeria monocytogenes cells using the A511 listeriophage with plaque formation as the end-point assay. Laser and toluidine blue O (TBO) were employed as selective virucidal treatment for destruction of exogenous bacteriophage. Laser and TBO can bring a total reduction in titer phage (ca. 10(8) pfu/mL) without affecting the viability of L. monocytogenes cells. Artificially inoculated skimmed milk revealed mean populations of the bacteria as low as between 13 cfu/mL (1.11 log cfu/mL), after a 10-h assay duration. Virucidal laser treatment demonstrated better protection of Listeria cells than the other agents previously tested. The protocol was faster and easier to perform than standard procedures. This protocol constitutes an alternative for rapid, sensitive and quantitative detection of L. monocytogenes.

Potencial de transdiferenciação neural das células-tronco mesenquimais da medula óssea de equino / Potential of neural transdifferentiation of mesenchymal stem cells from equine bone marrow

Os primeiros estudos demonstrando o potencial de trandiferenciação neural das células-tronco mesenquimais (CTMs) provenientes da medula óssea (MO) foram conduzidos em camundogos e humanos no início da década de 2000. Após esse período, o número de pesquisas e publicações com o mesmo propósito tem aumentado, mas com raros ou escassos estudos na espécie equina. Nesse sentindo, o objetivo desse trabalho foi avaliar o potencial in vitro da transdiferenciação neural das CTMs provenientes da MO de equinos utilizando-se dois protocolos: P1 (forksolin e ácido retinóico) e P2 (2-βmecarptoetanol). Após a confirmação das linhagens mesenquimais, pela positividade para o marcador CD90 (X=97,94%), negatividade para o marcador CD34 e resposta positiva a diferenciação osteogênica, as CTMs foram submetidas a transdiferenciação neural (P1 e P2) para avaliação morfológica e expressão dos marcadores neurais GFAP e β3 tubulina por citometria de fluxo. Os resultados revelaram mudanças morfológicas em graus variados entre os protocolos testados. No protocolo 1, vinte quatro horas após a incubação com o meio de diferenciação neural, grande proporção de células (>80%) apresentaram morfologia semelhante a células neurais, caracterizadas por retração do corpo celular e grande número de projeções protoplasmáticas (filopodia). Por outro lado, de forma comparativa, já nos primeiros 30 minutos após a exposição ao antioxidante β-mercaptoetanol (P2) as CTMs apresentaram rápida mudança morfológica caracterizada principalmente por retração do corpo celular e menor número de projeções protoplasmáticas. Também ficou evidenciado com o uso deste protocolo, menor aderência das células após tempo de exposição ao meio de diferenciação, quando comparado ao P1. Com relação a análise imunofenotípica foi observado uma maior (P<0,001) expressão dos marcadores GFAP e β3 tubulina ao término do P2 quando comparado ao P1. A habilidade das CTMs em gerar tipos celulares relacionados a linhagem neural é complexa e multifatorial, dependendo não só dos agentes indutores, mas também do ambiente no qual estas células são cultivadas. Desta forma um maior número de estudos é necessário para o melhor entendimento do processo de transdiferenciação neural a partir de CTMs de equinos.

The first studies showing the potential of neural transdifferentiation of mesenchymal stem cells (MSCs) from bone marrow (BM) were conducted in camundogos and humans in the early 2000s. After this period, the number of research and publications with the same purpose increased, but with rare or scarce studies in horses. The aim of this study was to evaluate in vitro neuronal transdifferentiation potential of MSCs from equine BM using two protocols: P1 (forksolin and retinoic acid) and P2 (2-βmecarptoetanol). After confirming the mesenchymal lineages, by positivity for the marker CD90 (X=97.94%), negative for the marker CD34 and positive response for osteogenic differentiation, MSCs were subjected to neural transdifferentiation (P1 and P2) for morphological analysis and expression of neural markers GFAP and β3 tubulin by flow cytometry. The results revealed morphological changes in varying degrees between the tested protocols. In protocol 1, twenty four hours after incubation with the media of neural differentiation, a large proportion of cells (>80%) had similar morphology to neural cells, characterized by retraction of cellular body and a large number of cytoplasmic extension (filopodia). However, comparatively, within the first 30 minutes after exposure to the antioxidant β-mercaptoethanol (P2) MSCs showed rapid morphological changes characterized mainly by retraction of cellular body and less cytoplasmic extension. It was also evidenced with the use of this protocol, lower cellular adhesion after exposure to media when compared to P1. Regarding the immunophenotyping analysis it was observed a higher (P<0.001) expression of the markers GFAP and β3 tubulin at the end of P2 compared to P1. The ability of MSCs to generate cell types related to neural lineage is complex and multifactorial, depending not only of inducing agents, but also the environment in which these cells will be cultivated. Thus a greater number of studies are necessary to better understand the process of neural transdifferentiation of MSCs from equine.

Diferenciação in vitro de células-tronco mesenquimais da medula óssea de cães em precursores osteogênicos / In vitro differentiation of mesenchimal stem cells of dogs into osteogenic precursors

O objetivo principal da nossa pesquisa foi avaliar o potencial de diferenciação osteogênica de células-tronco mesenquimais (MSC) obtidas da medula óssea do cão. As MSC foram separadas pelo método Ficoll e cultivadas sob duas condições distintas: DMEM baixa glicose ou DMEM/F12, ambos contendo L-glutamina, 20% de SFB e antibióticos. Marcadores de MSC foram testados, confirmando células CD44+ e CD34- através da citometria de fluxo. Para a diferenciação osteogênica, as células foram submetidas a quatro diferentes condições: Grupo 1, as mesmas condições utilizadas para a cultura de células primárias com os meios DMEM baixa glicose suplementado; Grupo 2, as mesmas condições do Grupo 1, mais os indutores de diferenciação dexametasona, ácido ascórbico e b-glicerolfosfato; Grupo 3, células cultivadas com meios DMEM/F12 suplementado; e Grupo 4, nas mesmas condições que no Grupo 3, mais indutores de diferenciação de dexametasona, ácido ascórbico e b-glicerolfosfato. A diferenciação celular foi confirmada através da coloração com alizarin red e da imunomarcação com o anticorpo SP7/Osterix. Nós observamos através da coloração com alizarin red que o depósito de cálcio foi mais evidente nas células cultivadas em DMEM/F12. Além disso, usando a imunomarcação com o anticorpo SP/7Osterix obtivemos positividade em 1:6 células para o Meio DMEM/F12 comparada com 1:12 para o meio DMEM-baixa glicose. Com base nos nossos resultados concluímos que o meio DMEM/F12 é mais eficiente para a indução da diferenciação de células-tronco mesenquimais caninas em promotores osteogênicos. Este efeito provavelmente ocorre em decorrência da maior quantidade de glicose neste meio, bem como da presença de diversos aminoácidos.

The aim of our research was to evaluate the potential for osteogenic differentiation of mesenchimal stem cells (MSC) obtained from dog bone marrow. The MSC were separated using the Ficoll method and cultured under two different conditions: DMEM low glucose or DMEM/F12, both containing L-glutamine, 20% of FBS and antibiotics. MSC markers were tested, confirming CD44+ and CD34- cells with flow cytometry. For osteogenic differentiation, cells were submitted to four different conditions: Group 1, same conditions used for primary cell culture with DMEM supplemented media; Group 2, same conditions of Group 1 plus differentiation inductors Dexametazone, ascorbic acid and β-glicerolphosphate. Group 3, Cells cultured with supplemented DMEM/F12 media, and Group 4, same conditions as in Group 3 plus differentiation inductors Dexametazone, ascorbic acid and β-glicerolphosphate. The cellular differentiation was confirmed using alizarin red and imunostaining with SP7/Osterix antibody. We observed by alizarin staining that calcium deposit was more evident in cells cultivated in DMEM/F12.Furthermore, by SP/7Osterix antibody immunostaining we obtained 1:6 positive cells when using DMEM/F12 compared with 1:12 for low-glucose DMEM. Based on our results, we conclude that the medium DMEM/F12 is more efficient for induction of differentiation of mesenchymal stem cells in canine osteogenic progenitors. This effect is probably due to the greater amount of glucose in the medium and the presence of various amino acids.

Formulation of economical microbial feed using degraded chicken feathers by a novel Streptomyces sp: mitigation of environmental pollution

A new Streptomyces sp. IF 5 was isolated from the feather dumped soil and found to have a tremendous keratinase activity. The strain enabled the degradation of the chicken feathers very effectively in 60 h. The 16S rRNA sequence of 1474 bp long was submitted to the National centre for Biotechnological information. The keratinolytic activity in the culture medium was 1181 U/ml. The release and analyses of sulphydryl groups in the culture medium evident the degradation activity by the Streptomyces sp. IF 5. The idea of the present study was to use the degraded chicken feathers as the substrate for the growth and cultivation of microorganisms. We have designed a very economical culture medium that includes the usage of some basal salts alone and degraded chicken feathers (10 g/l). The results of the specific growth rate of the tested microbes confirm the usage of the new designed medium for microbial culturing.

Comparative study of the pathogenicity of seabed isolates of Fusarium equiseti and the effect of the composition of the mineral salt medium and temperature on mycelial growth

The pathogenicity of seven strains of Fusarium equiseti isolated from seabed soil was evaluated on different host plants showing pre and post emergence damage. Radial growth of 27 strains was measured on culture media previously adjusted to different osmotic potentials with either KCl or NaCl (-1.50 to - 144.54 bars) at 15º, 25º and 35º C. Significant differences and interactive effects were observed in the response of mycelia to osmotic potential and temperature.

Antimicrobial activity of bacillus sp. strain fas isolated from soil

During screening for antibiotic producing microorganisms from environmental soil samples, the supernatant of a bacterial isolate was found to have antibacterial and antifungal activity on the standard indicator species. The standard cylinder-plate method was used to determine the inhibitory effect of the crude supernatant of each isolate on 6 bacterial and 3 fungal standard strains by measuring the diameter of inhibition zone. The highest inhibition zone on Aspergillus niger belonged to culture broth of isolate FASi by 25 mm, and this isolate was the most efficient microorganism to inhibit standard bacterial and fungal species. Based on morphological and biochemical properties as well as 16S rDNA gene analysis, the selected isolate [isolate FASi] belonged to Bacillus gems. Investigation on the ability of different culture media for antibiotic production led to select Luria-Bertani media for further studies. Treatment of the culture broth of the isolate FAS[1] using typical protease did't decease the antimicrobial activity of the supernatant. After extracting of culture broth of the selected isolate by ethyl acetate as an organic solvent, the inhibitory effect was mainly increased. More investigation was done by bioautography method where the ethyl acetate fraction of the broth culture was separated on TLC by chloroformimethanol, 60:40 as mobile phase and R[f] were calculated for inhibition spots

Mionecrose aguda por Clostridium septicum em equinos / Acute myonecrosis by Clostridium septicum in horses

Descrevem-se dois casos de miosite necrosante causada por Clostridium septicum em equinos. Os dois equinos apresentavam aumento de volume no membro pélvico direito e que se estendia para a região abdominal ventral. Ao corte, essa área era formada por edema sanguinolento e bolhas de gás. Os músculos esqueléticos da região caudal da coxa apresentavam áreas vermelho-escuras, crepitantes, com edema sanguinolento e, ao corte, as áreas mais profundas da musculatura tinham aspecto seco. As principais alterações histopatológicas observadas foram tumefação, vacuolização, necrose hialina e necrose flocular de fibras musculares esqueléticas. Entre as fibras, havia hemorragia, edema e grande quantidade de bacilos com tamanho de 3-6μm. Na coloração de Gram, os bacilos se apresentavam roxos (gram-positivos); quando impregnados pela prata (Warthin-Starry), se mostraram enegrecidos. Nos dois casos, C. septicum foi isolado, em ambiente anaeróbio, do líquido de edema das lesões musculares.

Two cases of acute necrotizing myositis caused by Clostridium septicum in horses are described. Both horses presented swelling of the right pelvic limb extending to the ventral abdominal region. The cut surface of the affected area revealed blood-stained edema and gas bubbles. The skeletal muscles of the caudal region of the thigh of the affect limbs had dark red discolored areas of blood-stained edema and crepitation; the deep musculature was dry. The main histopathological findings were swelling, vacuolation and hyaline and floccular necrosis of skeletal myofibers; in between myofibers there were hemorrhage, edema and large amounts of bacilli. In both cases, C. septicum was isolated from the edema fluid of muscular lesions.

Determinación de un medio de cultivo apropiado para acelerar el crecimiento de paracoccidioides brasiliensis / Determination of an appropriate culture medium to accelerate the growth of paracoccidioides brasiliensis

A pesar de los avances de la tecnología en los últimos años, en una infección micótica la "prueba de oro" para realizar el diagnóstico definitivo, es el aislamiento del agente causal mediante la práctica del cultivo de una muestra clínica; por lo que a través de los años han sido elaborados numerosos medios de cultivo, en los cuales se han utilizado desde sustancias naturales, hasta otras artificiales de composición más compleja. El problema más importante al cual se enfrentan los laboratorios de micología médica, es que los hongos productores de micosis profundas en Venezuela, tienen la propiedad de ser de lento y difícil crecimiento, inclusive hasta 8 semanas son necesarias para poder visualizar estructuras características del agente investigado. Es por ello que es importante desarrollar un medio de cultivo que aumente la sensibilidad de recuperación de hongos dimorfos, como el P. brasiliensis, a partir de muestras clínicas y provenientes de la micoteca; y que a su vez pueda ser utilizado para la obtención de la fase de levadura en forma eficaz. Se procesaron dos muestras clínicas y dos cepas provenientes de la Micoteca de la Sección de Micología Médica del Instituto de Medicina Tropical, los cuales fueron sembrados en: Sabouraud, agar cerebro corazón (brain heat), agar Kelley y agar Kelley Modificado a temperatura ambiente para obtener la fase micelial y a 37° C para incluir la transformación térmica y así recuperar la fase de levadura. En relación al crecimiento a temperatura ambiente, de las muestras clínicas se observó el crecimiento de una colonia característica de P. brasiliensis entre el séptimo día y la sexta semana en el siguiente orden: agar Kelley, agar Kelley modificado, agar brain heart y Sabouraud. En el caso de dos cepas provenientes de la micoteca a su desarrollo fue casi similar en Agar Kelley y Brain heart. Para la transformación a fase de levadura ésta se obtuvo antes de los 7 días con el agar Kelley Modificado y el agar Kelley.

Production of endoglucanase by the native strains of Streptomyces isolates in submerged fermentation

Cellulase is a complex enzyme system, commercially produced by filamentous fungi under solid-state and submerged cultivation. It has wide applicability in textile, food and beverage industry for effective saccharification process. In this study, cellulolytic enzyme activity, particularly endoglucanase of 26 Streptomyces strains isolated from garden soil was examined, including two isolates selected on the basis of potential cellulolytic activity on Bennett's agar medium. To enhance the endoglucanase formation in broth culture, different conditions including carbon and nitrogen sources, and growth conditions were tested. The maximum endoglucanase activity (11.25-11.90 U/mL) was achieved within 72-88 h in fermentation medium containing Tween-80, followed by phosphate sources. Both cellulolytic Streptomyces isolates gave almost equal quantity of enzyme in all trials. However the effect of medium ingredients on endoglucanase induction diverged with strains in some extent.

A celulase é um sistema enzimático complexo, produzido comercialmente a partir de fungos filamentosos através de cultivo em estádio sólido e submerso. Tem uma grande aplicação na indústria têxtil e de alimentos e bebidas no processo de sacarificação. Nesse estudo, examinou-se a atividade celulolítica, especialmente de englucanase, de 26 cepas de Streptomyces isoladas de solo, incluindo duas cepas selecionadas por sua atividade celulolítica no ágar Bennett. Para estimular a produção de englucanase em meio de cultura, diferentes condições de cultivo, incluindo fonte de carbono e nitrogênio e condições de crescimento, foram avaliadas. A atividade máxima de glucanase (11,25 a 11,90 U/mL) foi obtida em 72-88h em meio de cultura contendo Tween-80, seguido por fontes de fosfato. Ambas as cepas celulolíticas de Streptomyces produziram quase a mesma quantidade de enzima em todos os experimentos. Entretanto, o efeito dos ingredientes do meio na indução da glucanase divergiu de acordo com a cepa.

Parenteral infusions as culture media from a viewpoint of nosocomial bacteremia / Infusiones parenterales como medios de cultivo desde el punto de vista de las bacteremias nosocomiales

Objetivo. Estudiar los patrones de crecimiento de microorganismos seleccionados en soluciones parenterales comunes, evaluando sus implicaciones para las bacteriemias nosocomiales. Diseño. Se cultivaron, secuencialmente y a temperatura ambiente, suspensiones microbianas de aproximadamente 300 UFC/mL en soluciones parenterales de tres fabricantes. En la etapa inicial se estudiaron 11 aislamientos clínicos bacterianos y uno de Candida. En otra fase, ocho bacilos gramnegativos fueron estudiados a diferentes rangos de pH. Finalmente, la variabilidad entre las especies se probó en 39 aislamientos. Resultados. Los ocho bacilos gramnegativos desarrollaron in Ringer-lactato. Sólo Klebsiella pneumoniae y Serratia marcescens desarrollaron en dextrosa al 5 por ciento en agua. Ningún microorganismo desarrolló en solución salina isotónica o en mixta (dextrosa al 5 por ciento en salina 0.9 por ciento). En ninguna solución desarrollaron los cocos grampositivos ni Candida. No se observaron cambios significativos en el crecimiento después de modificar el pH de las soluciones. Se observó una importante variación de crecimiento dentro de cada especie. Conclusiones. La solución Ringer-lactato es un buen medio de cultivo para bacilos gramnegativos y la dextrosa al 5 por ciento en agua es un medio pobre, excepto para algunas bacterias de la tribu Klebsiellae. Recomendamos apego estricto a los estándares de enfermería para aplicar infusiones intravenosas, y evitar el uso de soluciones con nutrientes, cuando sea posible.

Meningitis bacteriana: estudio bacteriológico del LCR en el Hospital Universitario de Haití. Mayo-octubre 1997 / Bacterial meningitis: bacteriological study of CRL at the Hospital Universitario de Haití. May-October, 1997

Se realiza estudio bacteriológico a muestras de LCR de pacientes que acudieron al Hospital Universitario de Haití, entre mayo y octubre 1997, con manifestaciones de meningitis bacteriana. Se realizaron frotis (coloración de Gram), determinación de antígenos solubles y cultivos. A las cepas aisladas se les realizaron pruebas de resistencia frente a los antimicrobianos (Antibiograma por difusión y test betalactamasa). Se estudiaron 152 muestras y se realizó diagnóstico etiológico en 31.5 por ciento. Se aislaron 46 cepas bacterianas, siendo la más frecuente Haemophilus influenzae tipo b, aisladas de niños menores de 4 años. El 21.4 por ciento fue productora de betalactamasa. Le siguieron en frecuencia de aislamiento: Neiseeria meningitidis grupo C, fundamentalmente en pacientes entre 1 y 14 años de edad y todas las cepas fueron sensibles a la Penicilina; Streptococcus pneumoniae, principalmente en pacientes adultos, con alta letalidad y todas las cepas sensibles a Penicilina; Streptococcus grupo B, aislados entre los recién nacidos y sensibles a la Penicilina G. Se aislaron otras especies bacterianas. Con los métodos analíticos empleados en el laboratorio inaugurado en mayo de 1997, se pudo brindar información presuntiva durante las dos primeras horas y confirmar diagnóstico y sensibilidad a los antimicrobianos entre las 24 y 48 horas de recibida la muestra

Detección de micoplasmas en pacientes con asma / Detection of mycoplasma in patients with asthma

Introducción. El asma puede ser desencadenada por diferentes estímulos, entre ellos están los agentes infecciosos. Los virus la exacerban con mayor frecuencia y Mycoplasma pneumoniae ha sido implicado como posible agente. Objetivo. Buscar la presencia de micoplasma en exudado faríngeo de pacientes con asma y determinar el perfil de anticuerpos en suero. Material y métodos. Se buscaron micoplasmas en exudado faríngeo y en el suero de 208 pacientes en que se determinó IgM, IgG, IgA, aglutininas frías y anticuerpos antimicoplasmas. Resultados. Se identificaron 12 cepas de M. fermentans por polimerasa. Sólo se detectaron anticuerpos anti-M. fermentans y anti-M. pneumoniae en un paciente por inhibición metabólica. En los pacientes con M. fermentans hubo una disminución de IgM e IgG en la segunda determinación. Veinte pacientes tuvieron aglutininas frías y tres de ellos tenían M. fermentans. Discusión. No se aisló M. pneumoniae, M. fermentans se aisló en 5.5 por ciento, esto es difícil de interpretar debido a que se desconce su prevalencia en población sana. Probablemente no se aisló a M. pneumoniae porque no es un agente desencadenante, o por ser un microorganismo difícil de cultivar. Sin embargo el mecanismo de patogenicidad de los micoplasmas es muy parecido al de los virus que tienen la capacidad de exacerbar el asma. Conclusión. Con los resultados obtenidos no se puede concluir si los micoplasmas son agentes exacerbantes del asma, aunque tampoco se pueden descartar como tales

Estreptococo beta hemolítico de los grupos A, B, C, D, F, G en 157 niños con amigdalitis aguda en Medellín, Colombia / Beta hemolitic streptococci group A, B, C, D, F, G in 157 children with acute amigdalitis in Medellin, Colombia

En 157 niños de 2 a 12 años de edad con faringoamigdalitis aguda (FAA), encontramos 85 (54.1 por ciento) con EBH y 66 (42 por ciento) con EBHA. Diecinueve (12.1 por ciento) eran de grupos diferentes al A, siendo el principal el B con 12 casos (7.6 por ciento). Esto ha coincidido con un aislamiento más frecuente de este grupo en orina y con mayor colonización de madres y recién nacidos

Prevalencia de gérmenes causantes de faringoamigdalitis. Sensibilidad y respuesta terapéutica a la ampicilina / Prevalence of microorganism causing pharyngoamigdalitis. Sensitivity and therapeutic response to ampicillin

La flora causante de infecciones de tracto respiratorio superior ha cambiado su espectro de sensibilidad y resistencia los antibióticos tras la generación de cepas productoras de ß-lactamasas. La ampicilina ha sido de utilidad durante más de 30 años; sin embargo, actualmente se reporta cada vez con mayor frecuencia resistencia microbiana, sobre todo en países considerados como desarrollados, tales como Estados Unidos y algunos países europeos. La causa de todo ello parece ser el uso inadecuado de antibióticos en este tipo de enfermedades. El presente estudio analizó la prevalencia de gérmenes causantes de faringoamigdalitis en 591 pacientes mexicanos pediátricos ambulatorios, su sensibilidad a los antimicrobianos y la respuesta al tratamiento con ampicilina en las dosis recomendadas por la OMS. La respuesta se midió en términos clínicos con base en la historia clínica del paciente, sus signos y síntomas en una consulta de primera vez y en otra posterior al tratamiento. De esta manera se analizó la persistencia o desaparición de los mencionados signos y síntomas, así como la respuesta terapéutica se tradujera en curación o no. Se encontró que el 90 por ciento de los pacientes, los signos y síntomas disminuyeron después del tratamiento de ampicilina. El análisis bacteriológico en 1,145 exudados mostró positividad en 637 de ellos. El germen patógenos que se aisló fue Streptococcus pyogenes, todos ellos fueron sensibles a la ampicilina (16.9 por ciento), otros gérmenes aislados fueron Staphylococcus aureus (25.1 por ciento), Haemophilus influenzae (19.4 por ciento, Streptococcus pneumoniae (19.9 por ciento) y Moraxella catarrhalis (17.7 por ciento)

Significado clínico de los hemocultivos: una cohorte retrospectiva en el Hospital San Vicente de Paúl / Clinical significance of blood cultures. A retrospecrtive cohort in San Vicente de Paul Hospital

Objetivo: describir las características clínicas, epidemiolópgicas y microbiológicas en una cohorte de pacientes con bacteremia significativa en un hospital universitario. Diseño: estudio observacional no analítico en una cohorte histórica (retrospectiva). Sitio del estudio: Hospital Universitario Sam Vicente de Paul, Medellín, Colombia. Pacientes: mayores de 12 años hospitalizados entre julio de 2993 y nuio de 1995, con crecimiento en al menos un hemocultivo de gérmenes habituales en piel. Variables: edad, sexo, servicio, hemocultivos verdaderos positivos, hemocultivos falsos postivos, origen de la infección, foco primario, factores predisponentes, criterios clínicos de severidad, terapia antibiótica y resultado final. Análisis estadístico: presentación de datos en promedios y proporciones. Diferencia de proporciones con prueba de Chi cuadrado o prueba exacta de Fisher. Intervalos de confianza del 95 por ciento y error alfa de 0.05. Resultados: Durante el período del estudio se informó crecimiento bacteriano en 605 hemocultivos, 356 (58.8 por ciento) de los cuales se consideraron verdaderos positivos y 249 (41.2 por ciento) falsos positivos. Entre los primeros, los gérmenes más frecuentes fueron S. aureus (n=110, 30.9 por ciento), E. coli (n=52, 14.6 por ciento), K. pneumoniae (n=44, 12.4 por ciento), Estreptococo alfa hemolítico (n=18, 5.1 por ciento) y S. pneumoniae (n=17, 4.8 por ciento). El promedio de edad de los pacientes fue de 41,8 años, y de ellos 212 (59.6 por ciento) fueron hombres y 144 mujeres (40.4 por ciento). La infección se consideró extrahospitalaria en 229 casos (64.7 por ciento)

Producción y determinación de la actividad enzimática de la enzima penicilinasa / Determination and production of the enzymatic activity of the penicillinase enzyme

Este proyecto tiene como objetivo establecer una metodología para la producción y determinación de la actividad enzimática Penicilinasa, obtenida del cultivo de la cepa de bacillus licheniformis 749/c. Este microorganismo fue cultivado en caldo Tripticase-Soya por 5 días, seguidamente los sobrenadantes se reunieron y se sometieron a un proceso de esterilización. El título de Penicilinasa fue determinado acidimétricamente, lo que constituyó un índice de la cantidad de enzima acumulada durante el crecimiento. Para la determinación de la actividad enzimática se utilizó un método lodométrico. La esterilidad y eficacia del producto obtenido fue comprobada

Influence of culture media and air supply on the production of adhesins by Moraxella bovis

Estudou-se a influência do meio de cultivo e do fornecimento de ar na produçäo de adesinas hemaglutinantes de Moraxella bovis GF9 cultivada em fementador. Os mais altos rendimentos de adesinas e massa bacteriana obtiveram-se em meios preparados com peptona de carne, infuso de cérebro e coraçäo (BHI) e médio com peptona e extrato de carne (DCF), respectivamente. A influência do fornecimento de ar foi diferente nos meios estudados. Em BHI, a produçäo de adesinas foi 2.5 vezes maior nos cultivos aerados a 1 volume de ar por volume de meio (vvm) que com 0,5 vvm. Em DCF os títulos näo alcançaram a metade dos obtidos em BHI, enquanto que em meio de Mueller Hinton (MH) e caldo soja tripticaseina (TSB) näo se produziram adesinas. O título mais alto se obteve em BHI aerado a 1 vvm às 12 horas de cultivo. Os níveis de oxigênio dissolvido cairam a 7 e 30 por cento ao início da fase exponencial, nos cultivos aerados a 0.5 e 1 vvm., respectivamente

Compromiso hepático en fiebre tifoidea: Estudio bioquímico e histopatológico en pacientes anictéricos / Hepatic involvement typhoid fever: Biochemical and histopathological study in anicteric patients

El presente trabajo es un estudio prospectivo de 100 pacientes con diagnóstico de fiebre tifoidea mediante aislamiento de salmonella typhi. El procedimiento diagnóstico de mayor utilidad fue el mielocultivo, con un 90 por ciento de positividad. El compromiso hepático fue de presentación frecuente (85 por ciento), 67 pacientes fueron anictéricos y 18 pacientes cursaron con ictericia. Fueron sometidos a biopsia hepática 50 pacientes del grupo anictérico, de los cuales 50 por ciento mostraron hallazgos compatibles con hepatitis granulomatosa y el otro 50 por ciento, hepatitis reaccional. La respuesta al tratamiento antibiótico fue idéntica, en relación con los que no presentaron compromiso hepático.

Bacterias identicadas por el sistema clásico y el sistema API-20E / Bacterias identificated by classic system and API-20E system

Se efectuaron 146 aislamientos bacterianos mediante el uso de hemocultivos. Dichos aislamientos se identificaron usando el método clásico y el sistema API-20E. Con el método clásico identificaron 84 cepas: 34 cepas de Estafilococo coagulasa negativa; 16 cepas de Estafilococo aureus patógeno; 9 cepas de Estreptococo no hemolítico; 13 cepas de Bacteroides; 4 cepas de citrobactter y una cepa de Shiguella flexneri. Con el sistena API-20E se identificaron 62 cepas; 7 cepas de Echerichia coli; 13 cepas de Salmonella tiphy; 22 cepas de Serratia marcescens; 8 cepas de Klebsiella neumoneae; 5 cepas de Enterobacter cloacae; 4 cepas de Acinetobacter calcoacético y 3 cepas de Pseudomona fluorences.