Consumption of minas frescal cheese may be a source of human infection by Campylobacter jejuni / Consumo de queijo minas frescal pode ser fonte de infecção humana por Campylobacter jejuni

Campylobacter spp. is an emerging pathogen that causes gastroenteritis in humans and the consumption of dairy food can characterize sources of infection. We aimed to verify the viability and a presence of transcripts associated with characteristics of virulence and adaptation of C. jejuni isolated from Minas Frescal cheeses, produced with contaminated milk and stored under refrigeration for up to ten days. The samples were analyzed for bioindicators, Campylobacter spp., pH, acidity, moisture and sodium chloride. Campylobacter spp. recovered were evaluated for the production of transcripts of: ciaB, dnaJ, p19 and sodB. The results were correlated with the viability of C. jejuni and changes in their transcriptome. Storage at lowtemperatures reduced C. jejuni from the first to the fourth day. The variations in humidity, pH and acidity influenced the decreasing of C. jejuni. There was a reduction in transcripts' production of the four genes, more pronounced on the fourth day, indicating the inability of the microorganism to perform its metabolic activities, due to the conditions of injury. Despite the presence of mechanisms of virulence and adaptation, C. jejuni could not remain viable four days after production. However, consumption of fresh cheese contaminated with Campylobacter jejuni can be a source of infection when consumed up to four days after production.

Campylobacter spp. é um patógeno emergente que causa gastroenterite em seres humanos e o consumo de produtos lácteos pode caracterizar fontes de infecção. O objetivo deste estudo foi verificar a viabilidade e a presença de transcritos associadas a características de virulência e adaptação de C. jejuniisoladas de queijos frescos, produzidos com leite contaminado e mantidos refrigeradas por dez dias. Foram analisados bioindicadores, Campylobacter spp., pH, acidez, umidade e cloreto de sódio. Campylobacter spp. recuperados foram avaliados quanto à produção dos transcritos: ciaB, dnaJ, p19 e sodB. Os resultados foram correlacionados com a viabilidade de C. jejuni e alterações no transcriptoma. O armazenamento em baixas temperaturas reduziu C. jejuni do primeiro ao quarto dia. As variações na umidade, pH e acidez influenciaram a queda de C. jejuni. Houve uma redução na produção de transcritos dos quatro genes, mais pronunciada no quarto dia, indicando a incapacidade do micro-organismo em realizar suas atividades metabólicas, devido às condições de injúria. Apesar da presença de mecanismos de virulência e adaptação, C. jejuni não permaneceu viável quatro dias após a produção. Porém, o consumo de queijo fresco contaminado com Campylobacter jejunipode ser uma fonte de infecção quando consumido até quatro dias após a produção.

Viability and gene transcription of Campylobacter jejuni in infant milk formulas / Viabilidade e transcrição genética de Campylobacter jejuni em fórmulas lácteas infantis

This study simulated the contamination of two varieties of infant milk formulas (homemade and commercial) with 103 and 104 CFU/mLof Campylobacter jejuni, that were kept under refrigeration (4-7ºC) for up to 48 hours. The aim of this study was to verify the maintenance of the viability and ability of Campylobacter jejuni to produce transcripts of virulence and resistance to stress conditions during periods of 0 (after preparation), 24 and 48 hours. C. jejuni remained viable during all analyzed stages and thepresence of coliforms was not detected. In general, the counts reduced 1 log cycle after 48 hours for all samples, except the 104 CFU/mL inoculum of commercial formula, which reduced 2 log cycles, indicating greater injury of C. jejuni in this food matrix. C. jejuni showed to be more adapted to homemade matrix, due to high transcription of the gene related to cell invasion, ciaB, and more susceptible in the commercial matrix, due to the high transcription of genes related to conditions of stress tolerance (dnaJ, p19, sodB). The low infective dose of C. jejuni coupled with greater vulnerability of children less than five years indicate the need for care in the preparation and maintenance of infant formulas, to prevent the use of contaminated raw material and cross-contamination, especially in homemade formulations

Este estudo simulou a contaminação de duas variedades de fórmulas de leite infantil com Campylobacter jejuni (caseiras e comerciais), que foram mantidas sob refrigeração (4-7ºC) por até 48 horas. O objetivo do estudo foi verificar a manutenção da viabilidade e capacidade de produzir transcritos de virulência e resistência a condições de estresse durante os períodos de 0 (após preparação), 24 e 48 horas. C. jejunipermaneceu viável durante todas as etapas analisadas e a presença de coliformes não foi detectada. Em geral, as contagens reduziram 1 ciclo log após 48 horas para todas as amostras, exceto o inóculo de 104 CFU/mL na fórmula comercial, que reduziu 2 ciclos logarítmicos, indicando maior lesão de C. jejuni nesta matriz alimentar. C. jejuni mostrou-se mais adaptado à matriz popular, devido à alta transcrição do gene relacionado à invasão celular, ciaB, e mais suscetível na matriz comercial, devido à alta transcrição de genes relacionados a tolerância a condições de estresse (dnaJ, p19, sodB). A baixa dose infectante de C. jejuni, juntamente com maior vulnerabilidade de crianças menores de cinco anos, indicam a necessidade de cuidados na preparação e manutenção de fórmulas infantis, para prevenir o uso de matéria-prima contaminada e contaminação cruzada, especialmente em formulações caseiras.

Ação de diferentes sanitizantes em biofilmes de Salmonella Minnesota / Action of different sanitizers in biofilmes of Salmonella Minnesota

Objetivou-se avaliar a eficiência do contato por 15 minutos do hipoclorito de sódio 1%, e ácido peracético 0,8% na inibição de biofilmes formad os por três cepas distintas de Salmonella Minnesota em aço, poliuretano e polipropileno e determinar a recuperação das células remanescentes. Qualitativamente houve influência na classificação dos biofilmes de acordo com a superfície, que foram diferentes dependendo do tipo de cepa e de material, porém a quantidade de células sésseis permanece constante, pois independente da cepa e da superfície, os biofilmes mantiveram uma contagem de 5,18 Log UFC, indicando que as diferenças referem-se à matriz polimérica. O uso do hipoclorito foi capaz de destruir as células, que não foram recuperadas após reincubação. Já o ácido peracético não promoveu redução significativa. O uso do hipoclorito de sódio 1% é eficiente na sua remoção.

Características de virulência de Salmonella Heidelberg isoladas na cadeia avícola brasileira / Virulence characteristics of Salmonella Heidelberg isolated in the Brazilian poultry chain

S. Heidelberg é frequentemente isolada em produtos avícolas e associada a infecções alimentares humanas. Objetivou-se determinar a presença de genes de virulência em 62 cepas de S. Heidelberg isoladas na cadeia de produção avícola brasileira e inferir o seu potencial em causar infecções em humanos. Foi avaliado, por PCR, a presença dos genes avrA, invA, lpfA, agfA, sefA, luxS e sodC. Houve 100% de positividade para os genes avrA e invA, 98,4% para agfA, 96,8% para sodC, 87,1% para lpfA, 77,4% para luxS e ausência d o gene sefA. Os genes de virulência encontrados nas amostras alertam para a possível gravidade das infecções causadas por este sorovar. Estes resultados são importantes para maior compreensão dos perfis de patogenicidade de cepas circulantes de S. Heidelberg nos sistemas de produção avícola brasileiros.

Prevalência e virulência de Campylobacter spp. em diferentes matrizes cárneas / Prevalence and virulence of Campylobacter spp. in different types of meats

Objetivou-se determinar a prevalência de Campylobacter em fígado de frango e bovino, pernil suíno e carne moída e suas características de virulência. Nos isolados, determinou-se a espécie e a presença de genes de virulência por PCR. Foram analisadas 660 amostras representativas das comercializadas no Brasil, compostas por: pernil suíno resfriado (138), fígado de frango (138), patinho bovino moído (138) e fígado bovino (246), provenientes de 53 marcas e sob diferentes serviços de inspeção durante o período de março de 2014 a maio de 2016. A identificação da espécie e a presença dos genes flaA, pldA, ciaB, cadF e cdtABC, luxS, danJ e sodB foram realizadas por PCR. Das amostras, 35/660 (5,3%) foram positivas para o gênero Campylobacter, sendo 9/35 (25,71%) identificadas como C. jejuni e 6/35 (17,14%) como C. coli. Os resultados indicam a necessidade de monitoramento das diferentes matrizes cárneas quanto a presença de Campylobacter.

Resistência aos antimicrobianos de Salmonella heidelberg isoladas na cadeia de produção avícola / Antimicrobial resistance of Salmonella heidelberg isolated in the poultry chain production

S. Heidelberg é responsável por causar doença grave em humanos, e por apresentar alta resistência aos antimicrobianos, sendo considerada um problema emergente na saúde pública mundial. Objetivou-se determinar a resistência aos antimicrobianos em 67 cepas de S. Heidelberg isoladas na cadeia de produção avícola no ano de 2016. Utilizou-se a técnica de disco difusão frente ao ácido nalidíxico, amoxacilina/ácido clavulânico, ceftazidima, ceftiofur, ciprofloxacina, enrofloxacina, gentamicina, imipenem, sulfametoxazol/trimetoprim, sulfato de colistina, tetraciclina. Os maiores índices de resistência foram para o ácido nalidíxico e tetraciclina (100%), seguido do sulfato de colistina (98,5%).Todas as cepas foram classificadas como multirresistentes, alarmando para o perigo que representam para a saúde pública.

Campylobacteriosis: an emerging zoonosis, underdiagnosed and underreported by public health agencies in Brazil / Campilobacteriose: uma zoonose emergente, subdiagnosticada e subnotificada pelos órgãos de saúde pública no Brasil

The infection by Campylobacter spp. constitutes a zoonosis of worldwide distribution, with serious repercussions for public health and a significant socio-economic impact. The Campylobacter species that most often are implicated in outbreaks of gastrointestinal disease are C. jejuni and C. coli. Both are recognized as the most important and with greater pathogenic potential from the viewpoint of food safety. This review aims to clarify and discuss, based on literature, the epidemiology of Campylobacter spp. and the main challenges in their control, to assist in better understanding of the risk posed to human health. Due to the difficulty of isolating and cultivating of Campylobacter spp., the high cost and not mandatory, laboratory diagnosis by traditional cultivation techniques is not widely used in Brazil, resulting in lack of accurate data on the occurrence of the disease in the country. This factor has been identified as responsible for underdiagnosing and underreporting of the disease, which means that data on contamination of animal products or outbreaks are not statements of actual national situation. The epidemiology of Campylobacter spp. is considered complex presenting multiple determinants in the spread of this microorganism. Chickens are important reservoirs of Campylobacter sp. and the main target of control measures, however, other vehicles of transmission, such as raw cow milk, drinking water and other foods of animal origin must also be considered in the set of measures to be taken to control disease. The infection by Campylobacter spp. cause gastroenteritis in humans and occurred by oral contact with infected animals. In fact, are pets or production and food consumption, the most important pathways. The clinical manifestations of the disease can be from mild to severe symptoms, including watery diarrhea, sometimes with blood, abdominal pain, fever, headache and nausea. Sometimes the infection can get complications after the diarrhea stops and starts a progressive paralysis that can result in respiratory failure and severe neurological dysfunction and may even lead to death. The occurrence of campylobacteriosi's outbreaks should be mandatory to the authorities of surveillance, to provide an investigation of common sources and transmission control through preventive measures , thereby minimizing the potential risks to human health.

A infecção por Campylobacter spp. constitui em uma zoonose de distribuição mundial, com graves repercussões em saúde pública e com um impacto sócio-econômico significativo. Das espécies de Campylobacter sp., as que estão mais frequentemente implicadas nos surtos de doença gastrointestinal são C. jejuni e C. coli, sendo reconhecidas como as mais importantes e com maior potencial patogênico do ponto de vista da segurança alimentar. Esta revisão visa esclarecer e discutir, com base nos dados da literatura, a epidemiologia de Campylobacter sp. e os principais desafios no seu controle, para auxiliar no melhor entendimento do risco que representa para a saúde humana. Devido à dificuldade de isolamento e cultivo de Campylobacter sp., ao alto custo da análise e da mesma não ser obrigatória, o diagnóstico laboratorial por meio de técnicas tradicionais de cultivo não é muito utilizado no Brasil, acarretando falta de dados precisos sobre a ocorrência da doença no país. Este fator tem sido identificado como responsável por subdiagnóstico e subnotificação da enfermidade, o que significa que dados sobre contaminação de produtos de origem animal ou surtos não são demonstrativos da real situação nacional. A epidemiologia das infecções por Campylobacter spp. é considerada complexa, apresentando múltiplos fatores determinantes na disseminação desse microrganismo. As aves são importantes reservatórios de Campylobacter sp. e o principal alvo de medidas de controle, porém, outros veículos de transmissão, como o leite cru, a água potável e outros alimentos de origem animal também precisam ser considerados no conjunto de medidas a serem adotadas para o controle da doença. A infecção por Campylobacter sp. causadoras de gastroenterite no homem acontece principalmente por via oral, mas pode ocorrer também pelo contato com animais de estimação ou de produção infectados. O quadro clínico da doença varia desde sintomas leves a graves, incluindo diarreia aquosa, algumas vezes com sangue, dor abdominal, febre, dor de cabeça e náuseas. Porém, pode haver complicações posteriores devidoresposta auto-imune levando a paralisia progressiva que pode resultar em insuficiência respiratória e disfunção neurológica grave, podendo até mesmo levar a morte. A ocorrência de casos ou surtos de campilobacteriose devem ser notificados às autoridades de vigilância epidemiológica, para que se desencadeie a investigação das fontes comuns e o controle da transmissão por meio de medidas preventivas, minimizando assim os potenciais riscos para a saúde humana.

Sobrevivência de Campylobacter jejuni em amostras de leite pasteurizado e UHT artificialmente contaminados e mantidas sob refrigeração / Viability of Campylobacter jejuni in the refrigerated samples of artificially contaminated pasteurized and UHT milks

Campylobacter é o agente etiológico mais prevalente em gastroenterites de causa alimentar no mundo. Apesar de o leite cru ser fonte de infecção, pouco se conhece sobre as consequências da recontaminação do leite. A viabilidade de Campylobacter jejuni foi avaliada em leites pasteurizados e UHT mantidos sob refrigeração. Ambos os leites foram divididos em cinco porções de 100 mL, inoculados com 101 UFC.mL-1 de C. jejuni e mantidos de 4 ºC a 7 ºC por 48 horas. Repetiu-se o procedimento, utilizando-se inoculações de 102, 103 e 104 UFC.mL-1. As alíquotas foram analisadas imediatamente após inoculação e depois de 24 e 48 h quanto à viabilidade de C. jejuni. O micro-organismo manteve-se viável em todas as amostras, porém no leite pasteurizado houve redução de 1 ciclo log nas contagens após 24 h e baixas contagens após 48 h. Provavelmente,a redução ocorreu pela presença de microbiota neste leite, que competiu ou inibiu o crescimento de C. jejuni. O leite UHT ofereceu boas condições de sobrevivência em todos os períodos. O consumo de leite contaminado, mesmo em armazenamento refrigerado, pode ser fonte de infecção. O micro-organismo manteve-se mais viável no leite UHT quando comparado ao pasteurizado, provavelmente pela ausência de outros micro-organismos competidores.

Campylobacter is the most prevalent etiologic agent of foodborne gastroenteritis worldwide.Although raw milk is an important source of infection, little is known about the consequencesof milk recontamination. This study aimed at verifying the viability of Campylobacter jejuni inpasteurized and UHT milks stored under refrigeration. Both samples were divided into five portionsof 100 mL, inoculated with 101 CFU.mL-1 of C. jejuni and stored at 4 °C - 7 ºC for 48 h. The procedure was repeated using inoculations of 102, 103 and 104 CFU.mL-1. Aliquots were analyzed immediatelyafter inoculation and after 24 and 48 h to evaluate C. jejuni viability. The microorganism their viabilityin all of samples. In pasteurized milk a reduction of 1 log cycle occurred after 24 h and low countsafter 48 h. Probably, the reduction happened due to the occurrence of microbiota in this milk, whichcaused competition or inhibition of microorganism growth. UHT milk offered good conditions forbacteria survival in all of the periods. The consumption of contaminated milk, even stored under refrigeration might be a source of infection. Microorganism were more viable in UHT milk thanin pasteurized one, probably owing to the absence of competing microorganisms.

Dinâmica química, microbiológica e física da silagem de farelo úmido de glúten de milho / Physical, chemical and microbiological dynamics of wet corn gluten feed silage

Objetivou-se avaliar aspectos físico-químicos e microbiológicos do farelo úmido de glúten de milho (FUGM) em função do tempo de ensilagem. O FUGM foi avaliado em silos experimentais e, nos dias um, três, sete, 14, 21, 28 e 42, foram realizadas as avaliações físicas, químicas e microbiológicas da silagem. O delineamento experimental foi inteiramente casualizado com quatro repetições e obtidas equações de regressão em função do tempo. O tempo de ensilagem não afetou (P>0,05) o percentual de fibra em detergente neutro, fibra em detergente ácido, proteína bruta, matéria mineral, extrativos não-nitrogenados, nutrientes digestíveis totais e contagem de clostrídios. Os teores de matéria seca, extrato etéreo, perdas por efluentes, perdas por gases e população de bactérias láticas variaram entre 46,54 e 49,05%; 0,96 e 1,71%; 17,97 e 35,14g kg-1; 1,90 e 5,68% e 5,0 e 6,9log UFCg-1 de silagem, respectivamente, todos com equações com r2≤0,6.O pH (Y=4,12926-0,00894dias+0,00024126dias2,r2=0,75) e a temperatura (Y=19,82657+0,11734dias-0,00502dias2,r2=0,73) tiveram seus menores e maiores valores, respectivamente, em 18,5 e 11,7 dias. A contagem de bolores e leveduras sofreu redução em função do tempo de ensilagem (Y=6,8983-0,0363dias,r2=0,84). A ensilagem permite eficiente conservação dos aspectos químicos, microbiológicos e físicos do FUGM até 42 dias de ensilagem.

This study aimed to evaluate physicochemical and microbiological aspects of wet corn gluten feed (WCGF) according to time of ensilage. The WCGF was evaluated in experimental silos and after one, three, seven, 14, 21, 28 and 42 days, physical, chemical and microbiological evaluation of the silage was carried out. The results were analyzed as a completely randomized design with four replications and regression equations as a function of time. The number of days of ensiling did not affect neutral detergent fiber, acid detergent fiber, crude protein, mineral matter, non-nitrogenous extract and total digestive nutrients percentages, as well as clostridia count. Dry matter, ether extract, effluents losses and percentages of gas losses and lactic acid bacteria count with variations of 46.54 and 49.05%; 0.96 and 1.71%; 17.97 and 35.14g kg-1; 1.90 and 5.68% and 5.0 and 6.9log CFUg-1 of silage, respectively, all had low coefficient of determination (r2≤0.6).The pH (Y=4.12926-0.00894days+0.00024126days2,r2=0.75) and temperature (19.82657+0.11734days-0.00502days2,r2=0.73) had their minor and major values, respectively, in 18.5 and 11.7 days. Moulds and yeasts count decrease with time of ensilage (Y=6.8983-0.0363days,r2=0.84). The ensiling allows efficient conservation of the chemical, microbiological and physical aspects of WCGF until 42 days of ensilage.

Campylobacter jejuni in commercial eggs

This study evaluated the ability of Campylobacter jejuni to penetrate through the pores of the shells of commercial eggs and colonize the interior of these eggs, which may become a risk factor for human infection. Furthermore, this study assessed the survival and viability of the bacteria in commercial eggs. The eggs were placed in contact with wood shavings infected with C. jejuni to check the passage of the bacteria. In parallel, the bacteria were inoculated directly into the air chamber to assess the viability in the egg yolk. To determine whether the albumen and egg fertility interferes with the entry and survival of bacteria, we used varying concentrations of albumen and SPF and commercial eggs. C. jejuni was recovered in SPF eggs (fertile) after three hours in contact with contaminated wood shavings but not in infertile commercial eggs. The colonies isolated in the SPF eggs were identified by multiplex PCR and the similarity between strains verified by RAPD-PCR. The bacteria grew in different concentrations of albumen in commercial and SPF eggs. We did not find C. jejuni in commercial eggs inoculated directly into the air chamber, but the bacteria were viable during all periods tested in the wood shavings. This study shows that consumption of commercial eggs infected with C. jejuni does not represent a potential risk to human health.

Virulência de Salmonella spp. de origem avícola e resistência a antimicrobianos / Virulence of Salmonella spp. of poultry products origin and antimicrobial resistance

A habilidade do gênero Salmonella em causar doenças depende de vários fatores genéticos determinantes, dentre eles destacam-se os genes que codificam alguma característica de virulência nessas bactérias. Objetivou-se com esse trabalho pesquisar genes associados à virulência em isolados de Salmonella spp. de origem avícola, em sua fase de aderência e invasão celular, e avaliar a resistência desses isolados a 11 antimicrobianos. Foram analisadas 18 amostras de Salmonella spp. isoladas durante o ano de 2009 a partir de suabes de arrasto provenientes de aviários de frango de corte do estado de São Paulo. Todas as amostras foram testadas através da técnica de PCR para os genes associados à virulência: invA, lpfA e agfA. A maioria das amostras apresentou alta positividade para os genes de virulência, e 88,9% das amostras apresentaram os três genes estudados. Verificou-se que 17 amostras (94,4%) apresentaram fragmentos específicos para os genes invA e lpfA e o gene agfA foi positivo em todas as amostras avaliadas (100%). Todas as cepas apresentaram resistência pelo menos a um antimicrobiano testado. Os dados indicaram que das amostras analisadas a maior resistência foi à amoxacilina com 27,7%. Os resultados demonstram a patogenicidade dos sorovares de Salmonella, que representam potenciais desafios sanitários na avicultura, pelo risco da disseminação de espécimes virulentos e multirresistentes entre os animais e que, consequentemente, podem acometer o homem.

The ability of Salmonella to cause disease depends on several genetic determinant factors, including genes that encodes some virulence trait of these bacteria. The aim of this work was to research genes associated with virulence in Salmonella isolates of poultry products in its phase of adhesion and cell invasion, and to evaluate the resistance of these isolates to 11 antimicrobials. Were analyzed 18 samples of Salmonella spp. isolated during the 2009 year using drag swabs from poultry broiler in the state of São Paulo. All samples were tested using PCR technique for genes that were associated to virulence: invA, lpfA and agfA. Most samples had high positivity to virulence genes, and 88.9% of the samples had the three genes. It was verified that 17 samples (94.4%) had specific fragments to the invA and lpfA genes and the gene agfA was positive in all samples (100%). All samples were resistant to at least one antibiotic tested, the data indicated that the samples analyzed had greatest resistance to amoxacilin with 27.7%. The results demonstrate the pathogenicity of the Salmonella serovars which represent potential health challenges in poultry, the risk of the spread of multidrug resistant and virulent specimens among the animals and therefore can affect humans.

Transmission of Campylobacter coli in chicken embryos

Campylobacter coli is an important species involved in human cases of enteritis, and chickens are carriers of the pathogen mainly in developing country. The current study aimed to evaluate the transmission of C. coli and its pathogenic effects in chicken embryos. Breeder hens were inoculated intra-esophageally with C. coli isolated from chickens, and their eggs and embryos were analyzed for the presence of bacteria using real-time PCR and plate culture. The viability of embryos was verified. In parallel, SPF eggs were inoculated with C. coli in the air sac; after incubation, the embryos were submitted to the same analysis as the embryos from breeder hens. In embryos and fertile eggs from breeder hens, the bacterium was only identified by molecular methods; in the SPF eggs, however, the bacterium was detected by both techniques. The results showed no relationship between embryo mortality and positivity for C. coli in the embryos from breeder hens. However, the presence of bacteria is a cause of precocious mortality for SPF embryos. This study revealed that although the vertical transmission is a possible event, the bacteria can not grow in embryonic field samples.

Resistência a oxacilina em Staphylococcus spp isolado de leite mastítico / Oxacillin-resistance Staphylococcus spp isolated from mastitic milk

A mastite ocupa lugar de destaque entre as doenças que acometem o rebanho leiteiro, em virtude de problemas econômicos e de saúde pública. Staphylococcus spp são os agentes infecciosos mais envolvidos na etiologia da doença. Staphylococcus spp resistentes à oxacilina, isolados de amostras de leite provenientes de animais com histórico de mastite recorrente, foram analisadas utilizando-se os testes de difusão em gel, ágar de triagem, concentração mínima inibitória (CMI) e pesquisa do gene mecA. De 134 amostras de leite analisadas, Staphylococcus spp foi isolado em 55,22% das amostras (74/134). O teste de difusão em disco demonstrou que a maioria dos isolados apresentaram multiresistência, sendo 51,35% (38/74) resistentes à oxacilina. Esse perfil foi confirmado em paralelo pela CMI e pelo ágar de triagem. A análise molecular demonstrou que 33,78% dos isolados (25/74) possuíam o gene mecA, sendo mais frequentemente isolado em Staphylococcus aureus e Staphylococcus coagulase negativa, com índices de 48% (12/25) e 32% (8/25),respectivamente, seguido de S. intermedius com 16% (4/25) e de S. hyicus com 4% (1/25). O presente estudo denota o grave problema associado à Staphylococcus aureus resistente à oxacilina, bem como no meio rural, o que justifica a dificuldade de tratamento e a recorrência da infecção.

Mastitis is of a major concern among the diseases that affect the dairy herd due to the economic problemsand public health concerns. Staphylococcus spp has been the infectious bacterium and the etiologic agentof this disease. The oxacillin resistance of Staphylococcus spp isolated from milk samples of animals witha history of recurrent mastitis was investigated. This study was performed by means of gel diffusion test,agar screening, minimum inhibitory concentration (MIC), and the mecA gene searching. Of 134 milksamples, Staphylococcus spp was isolated from 55.22% samples (74/134). By means of disk diffusion test,the majority of the isolates showed multiresistance, and 51.35% (38/74) were resistant to oxacillin. Thisprofile was confirmed in parallel by CMI and the agar screening. By molecular analysis 33.78% of isolates(25/74) revealed the mecA gene, being frequently isolated from Staphylococcus aureus and coagulase negativeStaphylococcus at rates of 48% (12/25) and 32% (8/25 ), respectively, and followed by S. intermedius in 16%(4 / 25) and S. hyicus in 4% (1/25). The serious problem associated with oxacillin-resistant Staphylococcusaureus was found this study, including in rural environment and these findings justifie the treatmentdifficulty and the recurrence of infection.

Fatores de Risco Relacionadas à Contaminação Microbiana de massa de quibe / Risk factors related to microbial masses of kibe

A massa de quibe passa por apreciável manuseio, ficando exposta a uma série de perigos ou oportunidades de contaminações microbianas que podem levar à deterioração do produto ou oferecer risco à saúde do consumidor. As inadequadas condições de higiene e armazenamento podem acentuar esse problema. Este estudo objetivou averiguar a contaminação por coliformes termotolerantes, Staphylococcus coagulase positiva e Salmonella spp. em massa de quibe comercializadas nos cinco setores geográficos da cidade de Uberlândia-MG e sua adequação em comparação com as especificações da ANVISA, e também o risco de procedimentos relacionados ao seu preparo e armazenamento para a contaminação deste alimento. Das amostras analisadas, 42% (21/50) foram consideradas insatisfatórias. Destas, 38% (19/50) apresentavam coliformes termotolerantes acima dos permitidos pela legislação e 4% (2/50) a presença de Salmonella spp. Nenhuma amostra mostrou inadequação quanto aos números de Staphylococcus coagulase positiva. Os fatores de risco relacionados positivamente à contaminação por coliformes termotolerantes foram: distribuição e organização dos alimentos no balcão frigorífico (P=0,002; OR=3,21), a higiene e conservação de utensílios (P=0,26; OR=2,02) e a climatização (P=0,09; OR=2,72). Nenhum dos riscos analisados foi diretamente associado à presença de Salmonella spp.

The kibe mass pass to an intensive handling, being exposed to several hazards on microbial contamination opportunities. These contaminations can conduct to product deterioration or offer risks to the costumers' health. The inadequate hygiene conditions and storage emphasize this problematic system. The study aimed to determine the kibe mass contamination by bacterial from thermotolerants coliforms, Staphylococcus positive coagulase and Salmonella spp., of the kibe masses commercialized in five geographic sectors of the Uberlândia-MG; ascertain the suitability of the product's specifications to ANVISA, and the main risks related to contamination by thermotolerant. 42% of the analyzed samples (21/50) were found as unsatisfactory due termotolerant coliforms (38%) above permissible legislation values and Salmonella spp. presence (4%). No samples showed inadequate counting of Staphylococcus positive coagulase. Risk factors positively related to contamination by fecal coliform were: distribution and organization of food at the counter refrigerator (P = 0.002, OR = 3.21), hygiene and maintenance of vessels (P = 0.26, OR = 2, 02) and air (P = 0.09, OR = 2.72). None of the risk analysis was directly associated with the presence of Salmonella spp...

Avaliação dos itens obrigatórios na rotulagem nutricional de produtos lácteos fermentados / Evaluation of mandatory nutritional information on labels of fermented dairy products available at the market

O objetivo deste estudo foi de comparar as informações e os valores descritos nos rótulos de produtos lácteos fermentados com aqueles exigidos pela legislação em vigor, assim como de efetuar considerações sobre o comprometimento da informação nutricional da forma como recomendada pela Resolução RDC n°360/03 ANVISA/MS. Foram analisados 114 rótulos de iogurte e 28 rótulos de bebida láctea fermentada de diferentes sabores e composições nutricionais, de 10 marcas e/ou fabricantes de iogurte e de sete marcas de bebida láctea fermentada. As amostras foram adquiridas na qualidade de consumidor, durante o período de julho a dezembro de 2007, em supermercados da cidade de Uberlândia-MG. Os produtos foram analisados quanto aos princípios gerais de rotulagem, apresentação da informação nutricional e dos dados básicos obrigatórios no rótulo de produto alimentício. A maioria dos rótulos dos produtos analisados estava em desacordo com a legislação vigente; 97,4% dos rótulos de iogurte e 100% de rótulos de bebida láctea fermentada estavam incompletos, com omissão de alguns constituintes ou erroneamente especificados. Em virtude das informações obrigatórias exigidas pela legislação vigente, é questionável o compromisso das indústrias de alimentos na apresentação dos dados quanto aos constituintes nutricionais, uma vez que os rótulos das amostras analisadas não foram apresentados conforme os dispostos pela Resolução RDC n° 360/03.

The present study aims at comparing the nutritional contents and their values indicated on the labelsof fermented dairy products with those required by the legislation in force. Considerations on the foodindustries commitment related to the nutritional information as ruled by Resolution RDC #360/03 ANVISA/MS were deliberated. One hundred-fourteen yoghurt labels and 28 labels of fermented dairy beverageswith different flavors and compositions from 10 yoghurt brands and/or manufacturers and seven brands of fermented dairy beverages could be analyzed. The samples were purchased as customers, from July toDecember 2007, in supermarkets at the city of Uberlândia, Minas Gerais, Brazil. The analyses of labels onthe products samples consisted of assessing the general features of labeling, the nutritional informationdisplay, and the compulsory basic contents on the food labels. Most of the analyzed food labels did not comply with the specific legislation in force, thereby, 97.4% of yoghurt labels and 100% of labels on fermented dairy beverage showed lack of basic information, by either omitting some constituents from the list or erroneously specifying the required components or characteristics. In view of the mandatory information required by the legislation in force, The food industries commitment as per the nutritional informationis questionable since the present investigation showed that the analyzed food labels did not comply with those ruled by Resolution RDC #360/03.

Viability of Campylobacter jejuni in commercial eggs / Viabilidade de Campylobacter jejuni em ovos comerciais

The aim of this study was to verify the penetration and permanence of C. jejuni inside commercial eggs. Thirty eggs were submerged in peptone water artificially contaminated with 10 5 UFC.mL-1 of C. jejuni. An equal number of eggs were submerged in an identical solution, however, without addition of the microorganism. Parallel to this, 60 eggs were inoculated by means of a small incision in the larger pole, without lesion to the internal membrane, inserted into the air chamber with a sterile insulin needle containing 10 5 CFU.mL-1 of C. jejuni. Thirty eggs were inoculated with a sterile solution of 0.85% sodium chloride and kept as negative control. After storage at 25ºC, and after 1, 6 and 24 hours, 10 eggs from each of the two treatments were separated into the albumen and yolk contents, and each portion was individually analyzed by the traditional culture method for the presence/absence of Campylobacter. In another nine eggs, obtained from the same lot of animals, the albumens were separated to verify their inhibitory activity against the microorganism. The albumen in different concentrations was incorporated into Bolton broth and inoculated with 10 6 CFU.mL-1 of C. jejuni, and after incubation at 37ºC for 24 hours, striated in selective agar. In none of the analyzed samples (treatments and controls) was the growth of Campylobacter observed. The results demonstrated that under the experimental conditions used, Campylobacter jejuni is incapable of surviving, colonizing and multiplying inside commercial eggs. The white of the eggs, as an isolated factor, even at the concentration of 84.9% was incapable of completely inhibiting the growth of the microorganism in Bolton broth at 37ºC, in a microaerophilic atmosphere. The consumption of commercial eggs is not a risk factor for the acquisition of Campylobacteriosis by humans.

O objetivo desse estudo foi verificar a passagem e a permanência de C. jejuni no interior de ovos comerciais. Trinta ovos foram submersos em água peptona artificialmente contaminada com 105 CFU.mL-1 de C. jejuni e igual número de ovos foi submerso em solução idêntica, porém, sem adição do microrganismo. Em paralelo, 60 ovos foram inoculados por meio de uma pequena incisão no pólo maior, sem lesionar a membrana interna, inseridos na câmara de ar com uma agulha de insulina estéril contendo 10 5 CFU.mL-1 de C. jejuni. Trinta ovos foram inoculados com solução estéril de cloreto de sódio 0,85% e mantidos como controle negativo. Após armazenamento a 25ºC, e após 1, 6 e 24 horas, 10 ovos de cada um dos dois tratamentos foram separados nos conteúdos de albume e gema, e cada porção individualmente analisada pelo método tradicional de cultivo para presença/ausência de Campylobacter. Em outros nove ovos, obtidos do mesmo lote de animais, foram separados albume, para verificar sua atividade inibitória frente ao microrganismo. O albume em diferentes concentrações foi incorporada em caldo Bolton e inoculada com 10 6 CFU.mL-1 de C. jejuni, e após incubação a 37ºC por 24 horas, estriadas em ágar seletivo. Em nenhuma das amostras analisadas (tratamentos e controle) foi observado o crescimento de Campylobacter. Os resultados demonstraram que nas condições experimentais utilizadas, Campylobacter jejuni não é capaz de sobreviver, colonizar e se multiplicar no interior de ovos comerciais. O albume, como fator isolado, mesmo na concentração de 84,9% não foi capaz de inibir completamente o crescimento do microrganismo em caldo Bolton a 37ºC em microaerofilia. O consumo de ovos não é um fator de risco para a aquisição de campilobacteriose por humanos.

Campylobacter sp em mecônio de pintainhos e em cloaca de reprodutoras de corte / Campylobacter sp in meconium of one day old chicks and swabcloacal from breeder hens

Campylobacter sp é um importante patógeno veiculado pelos alimentos e os produtos de origem aviária são os mais implicados na transmissão desses microrganismos aos humanos. O conhecimento das formas de transmissão de bactérias do gênero Campylobacter entre as aves irá permitir o estabelecimento de formas de controle eficientes nas granjas para impedir a disseminação desse agente. A principal via de transmissão nos aviários é a horizontal, porém a transmissão vertical deve ser objeto de estudo por ser uma via ainda não comprovada. O objetivo desse estudo foi verificar em um mesmo lote de aves a presença da Campylobacter sp em galinhas matrizes e em mecônio de pintainhos de corte de um dia. O diagnóstico, foi realizado por PCR automatizado, o BAX Systen da DuPont. Foram coletados e analisados suabes cloacais de 33 aves (pool de três aves), totalizando 11 amostras e mecônio de pintainhos recémeclodidos (pool de três), totalizando 10 amostras. A positividade foi de 80% (8/10) para as amostras de mecônio e 54,55% (6/11) das amostras obtidas de galinhas. Esses resultados representam indícios da transmissão vertical, mas outras pesquisas devem ser conduzidas utilizando técnicas moleculares para detecção de Campylobacter sp em amostras de fezes, assim como técnicas de genotipificação dos espécimes isolados para comprovação da transmissão vertical.

Campylobacter sp is an important agent that causes food infection and the consume of avian products was the principal way of transmission of this organism to human been. The knowledge of the forms of transmission of the Campylobacter between the birds will allow the establishment of efficient forms of control in the farms to hinder the dissemination of this agent. The main transmission routes on chicken farms is horizontal however, the vertical transmission must be object of study still, it’s not proven the objective of this research, that was to verify the presence of Campylobacter sp in breeder hens and meconium. The used diagnostic method, was the automatized system PCR, the BAX Systen of the DuPont. The microbiological analyses were performed, using cloacal swabs from 33 breeder hens (pool of 3 hens each sample) and meconium samples from 30 one day old chicks (pool of 3 broilers each sample). Analysis of the meconium showed 80% (8/10) positive and breeder hens by the cloacal swab method 54,55% (6/11). These results represent indications of the vertical transmission, but other research must be lead using molecular techniques for detention of Campylobacter sp in excrement samples, as well as genetics techniques of isolated specimens to evidence the vertical transmission.

Campylobacter sp in eggs from cloacal swab positive breeder hens

Campylobacter sp is a microaerophilic, thermotolerating Gram negative bacterium, known to be one of the main causes of food-borne human infections. Among the foods that carry these microorganisms, the chicken is outstanding. In Brazil, a large chicken exporting country, few researches are conducted about their prevalence in breeder hens and the transmission through eggs. The aim of this research was to verify the presence of Campylobacter sp in the shells and within the eggs from positive cloacal swab breeder hens. Microbiological analyses were made on cloacal swabs of 140 weighed breeder hens. The positive breeder hens were set aside and in a total of 244 of their eggs, Campylobacter sp was present in macerated shells and yolk contents during 7 weeks. Out of the 140 researched breeder hens, 25 (17.8 percent) were positive from cloacal swabs, however the eggs were not positive. The physiological characteristics of the birds, their eggs and Campylobacter sp favor the bacterium entering and surviving in the eggs, but in this study, no positive result was found in macerated shells or in the yolks, indicating that vertical transmission is probably an unusual event.

Campylobacter sp é reconhecida como uma das principais causas de gastrenterite humana de origem alimentar. Dentre os alimentos veiculadores desses microrganismos, a carne de frango tem sido a mais implicada. Os estudos existentes sobre a transmissão vertical da Campylobacter são escassos e não conclusivos. O objetivo desse estudo foi verificar a presença de Campylobacter sp na casca e interior de ovos de matrizes positivas em swabs cloacais e a possibilidade de transmissão vertical. Foram analisados swabs cloacais de 140 matrizes pesadas e seus ovos colhidos para análise durante 7 semanas consecutivas. Dos 244 ovos colhidos, 129 foram fumigados e 115 analisados sem tratamento. Foram analisados o macerado da casca e a gema. Das 140 matrizes pesquisadas, 25 (17,8 por cento) foram positivas em swabs cloacais. Não houve positividade em nenhuma das amostras de ovos, independente da fumigação ou período de coleta. Apesar das características fisiológicas das matrizes, dos ovos e da Campylobacter sp serem favoráveis à entrada e sobrevivência da bactéria nos ovos, nesse estudo, nenhuma positividade foi encontrada, tanto no macerado da casca quanto na gema dos ovos, indicando que a transmissão vertical é possivelmente um evento raro.

Coliformes termotolerantes e staphylococcus coagulase positiva em pratos quentes servidos em restaurantes self-services de Uberlândia, MG / Thermo tolerant coliforms positive and staphylococcus coagulase in hot plates served in restaurants self-services of Uberlândia, MG

Durante o período de outubro de 2002 a abril de 2003, 28 amostras de variados pratos quentes prontos para consumo, de self-service da cidade de Uberlândia, foram coletados e submetidos à pesquisa de coliformes termotolerantes e Staphylococcus coagulase positiva. Os resultados obtidos evidenciaram a ocorrência de 18 amostras contaminadas por coliformes termotolerantes e/ou Staphylococcus coagulase positiva. Das amostras contaminadas, 28,57 por cento (8/18) foram consideradas impróprias para o consumo por apresentarem resultados maiores que os preconizados pelo Ministério da Saúde, em pelo menos um dos ítens analisados. Dessas, 14,2 por cento (4/18) apresentaram contagens acima do padrão para coliformes termotolerantes e Staphylococcus coagulase positiva, 7, 1 por cento (2/18) amostras acima do padrão somente para coliformes termotolerantes e 7,1 por cento (2/18) amostras acima do padrão para Staphylococcus coagulase positiva. Esses resultados demonstram a importância das boas práticas de fabricação e manipulação em unidades de alimentação e a necessidade de vigilância sanitária constante e preventiva.

Condições higiênico-sanitárias no pré-preparo de carne bovina em restaurante universitário de Uberlândia, MG / Hygienical – sanitary conditions in the preparation of bovine meat in university restaurant of Uberlândia, MG

O objetivo deste trabalho foi avaliar as condições higiênico-sanitário no pré-preparo de carne bovina no Restaurante Universitário da Universidade Federal de Uberlândia. Foram coletadas três amostras de carne bovina, duas durante o pré-preparo (com e sem condimentos) e uma terceira amostra (com condimentos) coletada após 24 horas, da carne pré-preparada e armazenada para o dia seguinte, com 3 repetições. As amostras foram analisadas quanto à presença de Salmonella spp, clostrídios sulfito redutores e Staphylococcus coagulase positiva. O processo de higienização dos equipamentos e utensílios utilizados no pré-preparo foram avaliados através da contagem total de bactérias aeróbias mesófilas. Também foi coletado material das narinas, mãos e luvas de aço dos manipuladores das carnes no pré-preparo para pesquisa de Staphylococcus coagulase positiva. Salmonella spp, taphylococcus coagulase positiva e clostrídios sulfito redutores não foram detectados em nenhuma das amostras coletadas. Foi detectada a presença de Staphylococcus coagulase positiva nas narinas dos dois manipuladores e da mão de um deles. As contagens de bactérias mesófilas nos utensílios e equipamentos variaram de 1,0x10 UFC (mesa de pré-preparo) a 3,6x10 UFC (afiador), indicando uma higienização inadequada desses materiais. Os resultados obtidos sugerem falhas na manipulação de produtos e na higienização de utensílios, refletindo a necessidade de uma observação mais rigorosa das Boas Práticas de Fabricação e no processamento dos alimentos.