Screening of alkalophilic bacteria for cyclodextrin glycosyltranferase production

De 400 colônias de bactérias isoladas de solos cultivados com produtos amiláceos, 68 apresentaram capacidade de produzir ciclodextrina glicosiltranferase (CGTase) em meio alcalino. A enzima produzida pela linhagem codificada como 76, selecionada com base nas elevadas atividades dextrinizante e CGTase do caldo de cultura isento de células, foi parcialmente purificada por adsorçäo em amido e foram estudadas algumas de suas propriedades. Seu pH ótimo a 50ºC esteve ao redor de 5,4, sendo que em pH 8,2 foi observada uma atividade igual a 93,3 por cento da máxima. Sem grande variaçäo, a enzima mostrou elevada atividade na faixa de pH compreendida entre 5,0 e 8,9. quando em pH 5,4 a atividade enzimática máxima ocorreu entre 60 a 70ºC. Embora o pico de atividade enzimática tenha sido observado em pH 5,4 essa CGTase se mostrou menos estável em soluçäo tampäo em pH 8,2. Na soluçäo tampäo com pH ácido a enzima foi significativamente ativada quando mantida por 15 e 30 minutos a 60ºC. CaCl2 adicionada às soluçöes tampöes em concentraçöes de 10 mM e 20mM estabilizou a enzima tanto em pH 5,4 quanto em pH 8,2

Efeito da fonte de carbono sobre a produçäo de alfa-amilase por Bacillus subtilis Ba-04 / Effect of the carbon source on alfa-amylase production by Bacillus subtilis Ba-04

Foi investigado o efeito da concentraçäo inicial de diferentes fontes de carbonos sobre a produçäo de amilase por uma linhagem de Bacillus subtilis. O microorganismo produziu alfa-amilase em meios de cultura contendo glicose, amido solúvel, dextrina e lactose. Foi observado que quanto maiores as concentraçöes iniciais de carboidrato maiores foram os tempos de fermentaçäo necessários para ocorrer a máxima velocidade específica de produçäo da enzima. As maiores produçöes de alfa-amilase ocorreram em meios de cultura contendo glicose a 0.75 g/L e 30.0 g/L ou dextrina a 10.0 g/L. Resultados obtidos para a atividade enzimática específica global mostraram que a quantidade de enzima produzida por unidade de massa celular no meio de cultura contendo dextrina foi maior do que em meio de cultura contendo amido solúvel, glicose ou lactose. As baixas concentraçöes de carboidrato, a produçäo de enzima por unidade de massa celular em meio contendo glicose foi inferior até emsmo à observada em meio de cultura contendo lactose, onde houve a menor produçäo de alfa-amilase.

Effect of pH and temperature on Bacillus subtilis ATCC 601 alfa-amylase production. Some properties of the crude enzyme

Neste trabalho foram estudadas a influência do pH inicial do meio de cultura e da temperatura de crescimento sobre a produçäo de alfa-amilase por Bacillus subtilis ATCC 601, bem como algumas propriedades da enzima bruta. Houve maior produçäo de enzima quando a fermentaçäo foi realizada a 37oC. A atividade enzimática específica global, Emax/Xmax' mostrou que a maior concentraçäo enzimática no caldo de cultura fermentado a 37oC näo foi devida a um maior crescimento celular e sim a uma maior síntese de enzima por unidade de massa celular. O estudo do efeito do pH inicial do meio de cultura sobre a produçäo da enzima mostrou que ela ocorreu preferencialmente a pH 7,0, também devido a um estímulo da sítese por unidade de massa celular. A temperatura ótima da enzima está ao redor de 50oC e o seu pH ótimo está entre 5,4 e 6,4. A alfa-amilase de Bacillus subtilis ATCC 601 mostrou-se pouco estável a 60oC foi completamente inativada quando mantida durante 10 minutos a 80oC. Ions Ca +2, nas concentraçöes de 10mM e 20mM, estabilizaram sensivelmente a enzima, enquanto que a adiçäo de EDTA 10mM a desestabilizou de tal modo que a enzima apresentou a 50oC um comportamento semelhante ao observado a 80oC. Näo houve formaçäo de glicose quando o amido foi hidrolisado por esta alfa-amilase. Os açúcares formados variaram de maltose à maltoheptaose