Hongos productores de micotoxinas asociados a hierbas medicinales en la Ciudad de São Paulo, Brasil / Mould and mycotoxins associated in medicinal plants in São Paulo, Brazil

Antecedentes: la fitoterapia es una de las más antiguas prácticas utilizadas por la humanidad. Hasta mediados del siglo XIX, cuando se introdujeron los medicamentos, la formulación de estos generalmente era basada en plantas medicinales. Objetivos: Determinar la micobiota y los niveles de aflatoxinas originadas de Aspergillus sección Flavi aislados de las 50 muestras de medicamentos fitoterápicos comercializados actualmente en la ciudad de São Paulo, Brasil. Métodos: Cincuenta (50) muestras de medicamentos fitoterápicos en la forma de hojas (té-25) y cápsulas (25) fueron colectadas de agosto de 2000 a julio de 2001. Los hongos filamentosos aislados fueron identificados al nivel de género de acuerdo con las características morfológicas y criterios taxonómicos. El análisis de aflatoxinas fue realizada por cromatografía de capa fina (TLC). Resultados: El análisis microbiológico mostró que 41 (82 por ciento) de los medicamentos fitoterápicos presentaron un crecimiento fúngico sobre las 100 UFC/g. Un total de 106 especies de seis diferentes géneros fueron aislados (Aspergillus, Penicillium, Mucor, Rhizopus y Alternaria). El género Aspergillus fue el predominante (60.5 por ciento) seguido por Penicillium (20,0 por ciento). Aspergillus niger (30 por ciento) A. flavus (22 por ciento), A. fumigatus (6,5 por ciento) y A. parasiticus fueron las especies de Aspergillus identificadas. Se observó que 13 (56,5 por ciento), de los 23 A. flavus aislados y dos aislados de A. parasiticus produjeron aflatoxinas. Conclusiones: La contaminación observada en la mayoría de los productos y el alto nivel de cepas productoras de aflatoxinas justifica un análisis más cuidadoso de los medicamentos fitoterápicos comercializados y la aplicación de leyes más rigurosas son necesarias para garantizar la calidad de los productos.

Background: phytotherapy is one of the most ancient practices used by humanity. In Antiquity until the middle of the XIX century, when chemotherapeutic drugs were introduced, formulation of medicines was usually based on medicinal plants. Objective: To determine mycobiota and levels of Aspergillus section Flavi aflatoxins isolated from 50 samples of phytotherapeutic remedies currently commercialized in São Paulo, Brazil. Methods: Fifty (50) samples of phytotherapeutic remedies in the form of leaves (teas-25) and powders (capsules-25) were collected from August 2000 to July 2001. Filamentous fungi isolates were identified at the genera level in accordance with morphological characteristics and taxonomic criteria. Aflatoxins were performed by Thin-layer chromatography (TLC). Results: The microbiological analysis showed that 41 (82 percent) of phytotherapeutic remedies presented a fungal growth over 100 CFU/g. A total of 106 species of six different genera were isolated (Aspergillus, Penicillium, Mucor, Rhizopus and Alternaria). The genus Aspergillus was the predominant (60.5 percent) followed by Penicillium genus (20.0 percent). Aspergillus niger (30 percent) A. flavus (22 percent), A. fumigatus (6.5 percent) and A. parasiticus were the species of Aspergillus identified. It was observed that 13 (56.5 percent) of 23 A. flavus isolates and two A. parasiticus isolates produced aflatoxins. Conclusions: The contamination observed in most products and the high level of aflatoxigenic strains justify the concern regarding the execution of more careful analyzes of the commercialized phytotherapeutic remedies and the application of more rigorous laws that may warrant the quality of these products.

Mycobiota and occurrence of Fumonisin B1 in wheat harvested in Southern Brazil / Micobiota e ocorrência de Fumonisina B1 em trigo colhido no Sul do Brasil

Although fumonisin B1 (FB1) is a mycotoxin poorly studied in wheat, the Fusarium genus fungi have been frequently detected in this cereal, especially in subtropical regions such as southern Brazil, thus studies on their occurrence are required. This study evaluated the mycobiota, water activity and the presence of FB1 in 11 wheat cultivars grown in the northeastern and northwestern of Rio Grande do Sul. The mycobiota was identified by morphological and molecular techniques and FB1 was determined by liquid chromatography with fluorescence detection (HPLC-FL). Microbial counts lower than 103CFU were found in the samples, and the fungi genera Phoma, Cladosporium and Fusarium were the most frequent. Despite this, 54% of the samples were contaminated with FB1 at levels ranging from 958 to 4,906µg FB1 kg-1.

Embora Fumonisina B1 (FB1) seja uma micotoxina pouco estudada em trigo, os fungos do gênero Fusarium são frequentemente detectados neste cereal, principalmente em regiões subtropicais, como o Sul do Brasil, o que justifica a necessidade de avaliar sua ocorrência. Neste estudo, foram avaliadas a micobiota, atividade de água e a presença de FB1 em 11 cultivares de trigo cultivados nas regiões nordeste e noroeste do Rio Grande do Sul. A micobiota foi identificada por técnicas morfológicas e moleculares e a FB1 foi determinada por cromatografia líquida e detecção por fluorescência (HPLC-FL). Nas amostras analisadas, foi verificada uma contagem inferior a 103UFC, e os fungos dos gêneros Phoma, Cladosporium e Fusarium foram os mais frequentes. Apesar disso, 54% das amostras estavam contaminadas com FB1 em níveis variando de 958 a 4906µg de FB1 kg-1.

Production of aflatoxin and cyclopiazonic acid by Aspergillus flavus strains isolate from peanuts / Produção de aflatoxinas e ácido ciclopiazônico por cepas de Aspergillus flavus isoladas de amendoim

Aspergillus flavus is a filamentous fungus that can produce aflatoxins and cyclopiazonic acid, and the presence of these mycotoxins in food and feed can lead to a toxic effect on humans and animals. Strains of A. flavus producing aflatoxin and cyclopiazonic acid are often isolated from peanuts, indicating the the co-occcurrence of these toxins in the natural substrate. In this study, we isolated 47 strains of A. flavus on peanut kernels and hulls during different stages of fruit ripening and its storage. Of the isolated strains, we assessed the potential for aflatoxin and cyclopiazonic acid production, in which 91.5% could produce aflatoxins and 70% produced cyclopiazonic acid; 63.8% produced both toxins and 2.1% produced no toxin. The presence of toxigenic A. flavus strains in peanut samples indicate a potential risk of contamination of these products, if they are exposed to environmental conditions that are favorable to fungal growth and mycotoxin production.

Aspergillus flavus é um fungo filamentoso que pode produzir aflatoxinas e لcido ciclopiazônico, sendo que a presença dessas micotoxinas em alimentos e raçُes pode levar a um efeito tَxico no homem e em animais. Cepas de A. flavus produtoras de aflatoxinas e لcido ciclopiazônico sمo frequentemente isoladas do amendoim, indicando a natural co-ocorrência dessas toxinas neste substrato. Neste estudo, foram isoladas 47 cepas de Aspergillus flavus em grمos e cascas de amendoim durante diferentes fases de maturaçمo do fruto e também durante seu armazenamento. Das cepas isoladas, foram avaliados os potenciais para produçمo de aflatoxinas e لcido ciclopiazônico, em que 91,5% foram produtoras de aflatoxinas e 70% produziram لcido ciclopiazônico, sendo que 63,8% produziram ambas as toxinas e 2,1% nمo produziu nenhuma. A presença de cepas toxigênicas de A. flavus nas amostras de amendoim analisadas indica um risco potencial da contaminaçمo deste produto, caso seja exposto a condiçُes ambientais favorلveis ao crescimento do fungo e produçمo de micotoxinas.

Avaliação da micoflora e ocorrência de micotoxinas em cascas de amendoim em diferentes estágios de maturação da vagem / Evaluation of mycoflora and occurrence of mycotoxins in peanut hulls at different pod maturation stages

As cascas de amendoim (Arachis hypogaea L.) são de grande importância para confecção de cama de frangos, de gado de leite e como fonte de fibras para ruminantes, portanto a elucidação dos mecanismos de contaminação por fungos toxigênicos e por micotoxinas em amendoim é imprescindível, especialmente para que medidas preventivas possam ser tomadas. Realizou-se, este trabalho, em Junqueirópolis, Estado de São Paulo, Brasil. Os principais fungos isolados nas cascas de amendoim foram Fusarium ssp. (78,75 por cento), Rhizopus ssp. (14,1 por cento) e A. flavus (11,75 por cento). No solo foram isolados Penicillium spp., Fusarium spp. e Aspergillus flavus, entre outros. Aflatoxinas foram detectadas em amostras de cascas de amendoim a partir do estágio de granação em concentrações que variaram de 5,42 μg/kg a 218,52 μg/kg. Ácido ciclopiazônico e fumonisinas B1 e B2 não foram detectadas. A presença de A. flavus e aflatoxinas nas amostras, revela a importância de um controle das cascas de amendoim antes de sua utilização. Boas práticas agrícolas são indicadas para região, uma vez que a contaminação das vagens ocorreu antes da colheita.

Peanut (Arachis hypogaea L.) hulls are very important because they are used as litter to poultry and dairy cattle and as fiber source to cattle. The elucidation of the peanuts contamination mechanisms by toxigenic fungi and their mycotoxins is vital, specially for prevention measurements. The peanuts total mycoflora and mycotoxin contamination were analyzed in plants sampled in Junqueirópolis, in São Paulo State (Brazil) at different stages of the pod maturity. The prevalent mycoflora in peanut hulls were Fusarium spp., Rhizopus spp. and Aspergillus flavus. In soil under the peanut crop, the genus Penicillium spp., Fusarium spp. and A. flavus were detected. Aflatoxins were detected in peanut hull samples since filling pod stage in concentrations from 5.42 μg/kg to 218.52 μg/kg. Cyclopiazonic acid and fumonisins were not detected. The A. flavus presence and the detection of aflatoxins indicate the importance of quality control of peanut hulls before their utilization, and the adoption of agricultural practices showed to avoid the contamination since the peanut pods contamination happened before the harvest.

Genetic diversity of environmental Aspergillus flavus strains in the state of São Paulo, Brazil by random amplified polymorphic DNA

Aspergillus flavus is a very important toxigenic fungus that produces aflatoxins, a group of extremely toxic substances to man and animals. Toxigenic fungi can grow in feed crops, such as maize, peanuts, and soybeans, being thus of high concern for public health. There are toxigenic and non-toxigenic A. flavus variants, but the necessary conditions for expressing the toxigenic potential are not fully understood. Therefore, we have studied total-DNA polymorphism from toxigenic and non toxigenic A. flavus strains isolated from maize crops and soil at two geographic locations, 300 km apart, in the Southeast region of Brazil. Total DNA from each A. flavus isolate was extracted and subjected to polymerase chain reaction amplification with five randomic primers through the RAPD (random amplified polymorphic DNA) technique. Phenetic and cladistic analyses of the data, based on bootstrap analyses, led us to conclude that RAPD was not suitable to discriminate toxigenic from non toxigenic strains. But the present results support the use of RAPD for strain characterization, especially for preliminary evaluation over extensive collections.

Influência de nutrientes no crescimento fúngico e na produção de fumonisinas e aflatoxinas em grão de milho / The nutrients effect on mycoflora, and for fumonisins and aflatoxins production in corn grain

O presente experimento teve como objetivo correlacionar os resultados obtidos da microbiota fúngica e produção de micotoxinas com os níveis de nitrogênio, zinco e boro utilizados no plantio do milho. Foram realizados tratamentos com quatro concentrações de nitrogênio (0, 50, 100 e 150 kg/ha) de forma interativa com duas concentrações de zinco (0,5 e 1,0 kg/ha), duas concentrações de boro (0,25 e 0,5 kg/ha) e duas concentrações de zinco mais boro (0,5 e 1,0; 0,25 e 0,5 kg/ha respectivamente), perfazendo um total de 25 tratamentos. A média de contaminação das amostras de milho pelos gêneros Aspergillus, Penicillium e Fusarium foi de 42,7; 38,9 e 41,5% respectivamente, principalmente na faixa de 0,53 a0,63 de atividade de água. A análise de fumonisinas revelou uma contaminação em 100% das amostras,em níveis que variaram de 1,7 a 27,9 mg/kg para FB1 e de 0,3 a 11,2 mg/kg para FB2. Foi detectada aflatoxina B1 em 7 amostras de milho (16,0 a 1858,3 g/kg) e B2 em 3 amostras (14,6 a 110,3 g/kg). A análise de Variância demonstrou que o nitrogênio foi positivamente significativo (p<0,05) sobre a porcentagem de contaminação pelo gênero Fusarium, enquanto que para o gênero Aspergillus foi negativamente significativo (p<0,10).

Evaluation of viability of Aspergillus flavus and aflatoxins degradation in irradiated samples of maize

Um dos fungos mais importantes atualmente em grãos armazenados é o Aspergillus flavus, o qual produz aflatoxinas. Este fungo pode crescer em diversos substratos e representa uma séria preocupação em saúde pública e nutrição animal. Portanto, o estudo de técnicas que possam ser aplicadas no controle das aflatoxinas é de grande importância. Assim sendo, o objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos da radiação gama no crescimento de Aspergillus flavus Link e na degradação das aflatoxinas B1 e B2, (AFB1 e AFB2) em umidade relativa (UR) de 97-99% e atividade de água (Aa) de 0,88-0,94. Amostras de grãos de milho foram irradiadas, utilizando-se uma fonte de Cobalto 60, emissora de raios gama, com as doses de 2; 5 e 10 kGy. A irradiação foi efetiva na redução do número de Unidades Formadoras de Colônias de A. flavus, por grama, nas amostras de milho analisadas. Adicionalmente, o teste de viabilidade fluorescente (solução de diacetato de fluoresceína e brometo de etídio) revelou diminuição no número de células viáveis com o aumento das doses de irradiação e três diferentes padrões de fluorescência. Além disso, a irradiação induziu a uma parcial redução dos níveis de AFB1 e AFB2, nas doses de 2 e 5 kGy, ao passo que uma completa degradação das aflatoxinas foi observada no ensaio empregado com 10 kGy.

Milho recém-colhido no Brasil: interação da microbiota fúngica, fatores abióticos e ocorrência de fumonisinas / Pre-harvest corn in Brazil: mycoflora interaction, abiotic factors and fumonisins occurrence

O milho, no Brasil, tem um importante papel, tanto na nutrição humana quanto animal. Atualmente, o país é o terceiro maior produtor mundial, após Estados Unidos e China, tendo sua produção ficado, nos últimos anos, em torno de 48,3 milhões de toneladas. Em termos de distribuição geográfica, o milho é cultivado emdiversas regiões do país, sendo a região Centro-Sul responsável por mais de 95% da produção. A importâncianão se restringe apenas ao seu volume, mas também ao papel sócio-econômico desempenhado, cuja produção e comercialização sustenta centenas de milhares de pessoas. A contaminação do milho por espécies de Fusarium, na etapa de pré-colheita, tem sido um problema sério em vários países. Espécies pertencentes a esse gênero possuem ampla distribuição na natureza e produzem micotoxinas, metabólitos secundários tóxicos. O fato, ressalta a importância de se compreender os processos de contaminação do milho brasileiro por F. verticillioides, principal espécie produtora de fumonisinas, visando odesenvolvimento de estratégias de controle capazes de minimizar as perdas econômicas e possíveis problemas à saúde humana e animal. A revisão propõe fornecer informações atuais sobre a microbiota fúngica de grãos de milho recém-colhido e sua interação com os fatores abióticos e presença de fumonisinas

Potencial toxigênico das cepas de Aspergillus flavus E Fusarium verticillioides isolados de grãos de milho, da semeadura à colheita, provenientes das regiões de Capão Bonito/SP e Ribeirão Preto/SP / Toxigenic potential of Aspergillus flavus and Fusarium verticillioides strains in Brazilian corn from sowing to harvest processes

O presente estudo visou identificar o potencial toxigênico das cepas de Aspergillus flavus e Fusarium verticillioides, isoladas de 57 amostras de grãos de milho e 90 amostras de solo em diferentes estágiosde maturidade nas regiões de Capão Bonito/SP e Ribeirão Preto/SP, em relação à produção de aflatoxinas e fumonisinas, respectivamente. A análise do potencial toxigênico de A. flavus, revelou a produção deaflatoxinas por 13 cepas (92,9%), em concentração de 10,5 a 482,6μg/kg para aflatoxina B1 e de 2,9 a 132,5 μg/kg para aflatoxina B2. Quanto ao potencial toxigênico das 27 cepas de F. verticillioides, 100% produziram fumonisinas em concentrações que variaram de 0,1 a 4833,1 μg/g para fumonisina B1 e de 0,05 a 321,0 μg/g para fumonisina B2. A concomitante ocorrência de A. flavus e F. verticillioides e produção de aflatoxinas e fumonisinas, respectivamente, pelos mesmos, nos campos de plantio demilho, indicam a importância de um controle efetivo no cultivo durante os diferentes estádios de maturidade da planta

Determinação da microbiota fúngica de fubá e farinha de milho, comercializados no município de São Paulo, SP / Determination of microbiota fúngica of fubá and flour of maize, commercialized in the city of São Paulo, SP

No presente trabalho, 60 amostras de fubá e farinha de milho comercializados em São Paulo, foram analisadas quanto à presença de fungos toxigênicos. As freqüências relativas de Aspergillus, Penicillium e Fusarium nas amostras de fubá foram 96,7 , 93,3 , 56,7 por cento, respectivamente. Na farinha de milho, Aspergillus, Penicillium e Fusarium foram detectados em 76,7 , 60,0 e 30,0 por cento das amostras, respectivamente. As contagens médias dos três gêneros de fungos citados, nas amostras de fubá e farinha de milho, estiveram ao redor 10² UFC/g e 10¹ UFC/g, respectivamente. Os valores de atividade de água (aw) foram maiores no fubá do que na farinha, sendo que os fungos foram mais freqüentemente isolados em amostras com aw entre 0,59. Observou-se uma elevada freqüência de F. verticillioides nas amostras de fubá (65,8 por cento) e de farinha de milho (62,4 por cento). A.flavus foi detectado em 14,7 por cento das amostras de fubá, e em 18,4 por cento das amostras de farinha de milho. Os resultados indicaram que as contagens de fungos em fubá e farinha de milho estiveram de acordo com os limites recomendados internacionalmente. Entretanto, os gêneros que apresentaram maior prevalência em ambos os produtos foram Aspergillus, Penicillium e Fusarium, o que sugere um risco potencial de produção de micotoxinas durante o armazenamento, principalmente do fubá.

Production of aflatoxins by Aspergillus flavus and of fumonisins by Fusarium species isolated from Brazilian sorghum

A produção de aflatoxinas por 59 cepas de Aspergillus flavus e fumonisinas por 35 cepas de Fusarium verticillioides isoladas de amostras de grãos de sorgo recém colhido (10 amostras) e armazenado (130 amostras), foram avaliadas. A detecção de aflatoxinas (AFB1 e AFB2) foi efetuada por Cromatografia em Camada Delgada (CCD) e fumonisinas (FB1 e FB2) foram analisadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE). Os resultados demonstram a produção de AFB1 e AFB2 em 38 cepas (64,4%) de A. flavus cujos níveis variaram de 12,00 a 3282,50 µg/kg. Referente às cepas de F. verticillioides, 32 (91%) produziram FB1, nas concentrações de 0,12 a 5,38 µg/g. Baixos níveis de fumonisinas foram detectados em 2 cepas de F. proliferatum. A constatação da potencialidade toxígena das cepas de A. flavus (64,4%) e de F. verticillioides (91,5%) nesta investigação, revelam a importância da pesquisa de aflatoxinas e fumonisinas nas amostras de sorgo. Diante disto, sugere-se o controle rigoroso das condições de armazenamento de sorgo, visando minimizar a contaminação por fungos deteriorantes toxígenos, evitando riscos à saúde humana e animal.

Intoxicaçäo experimental de suínos por fumonisinas / Experimental intoxication of pigs by fumonisins

Os efeitos da exposiçäo oral prolongada (28 dias) à fumonisina foram estudados em suínos jovens. Os animais foram divididos em três grupos experimentais e alimentados com raçäo ad libitum contendo: A) 0mg de FB1.kg-1 (controle); B) 10mg de FB1.kg-1; C) 30mg de FB1.kg-1. Os suínos foram observados duas vezes por dia; seus pesos e consumo alimentar foram registrados semanalmente. Entre o 20º e 24º dia de intoxicaçäo, os suínos do tratamentos C apresentaram diminuiçäo do consumo de raçäo e ganho de peso, sinais característicos de edema pulmonar, razäo pela qual um animal foi levado a óbito aos 23 dias de intoxicaçäo. Após 28 dias, os animais foram necropsiados e os órgäos submetidos a análises macroscópica, histopatológica e ao estudo da morfologia e histologia intestinal. Nos suínos que apresentaram sinais clínicos de intoxicaçäo, observaram-se lesöes pulmonares, hepáticas e diminuiçäo de altura das vilosidades e profundidade das criptas e hiperplasia glandular em segmentos intestinais. Conclui-se, portanto, que substanciais perdas de produtividade podem ser induzidas em suínos alimentados com raçäo contaminada com baixos níveis de fumonisinas.

Alteraçöes hepáticas em codornas japonesas submetidas à intoxicaçäo prolongada por aflatoxina B1 / Hepatic changes in japanese quail after long term intoxication by aflatoxin B1

O objetivo do presente trabalho foi estudar os efeitos da aflatoxina B1 (AFB1) sobre as vísceras (fígado, baço e moela) de codornas poedeiras japonesas, em condiçöes de exposiçäo a baixas doses, tendo em vista que säo poucos os dados de toxicidade de longa duraçäo nesta espécie. Assim, foram constituídos 4 grupos formados, cada um, por 6 codornas de linhagem comercial, as quais receberam raçöes contendo AFB1 nas concentraçöes de 0 (controle), 25, 50 e 100mg.kg-1, durante 168 dias. As aves do grupo 100mg kg_1 apresentaram fígados com peso relativo médio menor (p < 0,05) do que o controle. Alteraçöes histológicas foram constatadas apenas no fígado, sendo que todas as amostras provenientes das codornas intoxicadas apresentaram degeneraçäo vacuolar macrogoticular, sugestivas de metamorfose gordurosa moderada a severa, particularmente nos grupos que receberam raçäo com os maiores níveis de AFB1 (50 e 100mg.kg-1). A hiperplasia de ductos biliares foi observada somente no grupo alimentado com 100mg.kg-1. Os resultados indicaram que a AFB1, a partir de 50mg.kg-1, pode ocasionar lesöes hepáticas significativas em codornas de postura, em condiçöes de exposiçäo prolongada.

Aspectos relacionados à ocorrência e mecanismo de açäo de fumonisinas / Occurrence and fumonisins pathophisiology-reviews

As fumonisinas säo micotoxinas produzidas por fungos do gênero Fusarium, um dos principais fitopatógenos de gräos de milho. Isoladas em 1988, a partir de amostras de milho mofado proveniente de regiäo com alta incidência de câncer do esôfago na Africa, foram relacionadas à ocorrência de leucoencefalomalácia eqüina e hidrotórax e edema pulmonar suíno, e outras patologias animais. A presente revisäo aborda aspectos da ocorrência natural das fumonisinas em gräos de milho, características físico-química das moléculas e efeitos toxicológicos em eqüinos, suínos, aves e bovinos, além do provável mecanismo de açäo das micotoxinas

Ocorrência natural de fumonisinas no milho produzido pelo sistema tradicional de cultivo, em comunidades de agricultura familiar do Estado de Mato Grosso / Ocurrence of fumonisins in maize in field communities from the Central South of State of Mato Grosso

O estudo foi realizado na região centro-sul de Mato Grosso, entre 14º e 16º de latitude Sul e 55º e 57º de longitude Oeste, em 35 propriedades que constituíram nossa base amostral. Dessa base amostral foram concebidos 4 tratamentos experimentais (T1,T2,T3,T4), representados pelas correspondentes amostras, tomadas a intervalos de 30 a 60 dias entre elas, no período de abril a agosto de 1999, totalizando 140 amostras. Os resultados relativos ao teor de umidade apresentaram uma tendência decrescente dos tratamentos T1 a T4, da magnitude de 0,76 ± 0,014 a 0,47 ± 0,009, para atividade de água e de 12,81 por cento ± 0,44 a 7,52 por cento ± 0,21 para teor percentual de água, abaixo, portanto, daqueles considerados adequados para a produção de fumonisinas.

Histopathologic and mycologic aspects of experimental infection of guinea pigs with Microsporum canis

Dermatophytosis is a zoonosis in whose etiology the dermatophyte Microsporum canis is frequently involved. The fungus can be transmitted to man by dogs and cats. In the present study, guinea pigs were experimentally inoculated with M. canis and the course of the lesions was evaluated. Inoculation resulted in lesions in 100 per cent of the animals, with a clinical course consisting of an incubation period, an inflammatory and a phase of lesion resolution. The histopathologic evaluation of the skin biopsies revealed the presence of acanthosis, hyperkeratosis, spongiosis and marked dermal edema. M. canis spores and hyphae were detected in histologic sections stained with periodic acid-Schiff. The combination of the fluorescent dyes FD and EB permitted the adequate visualization of viable and dead fungal cells in skin fragments of guinea pigs inoculated with M. canis and the identification of the morphologic characteristics of the cells. This experimental model represents a valuable instrument for the study of the pathogenesis of dermatophytic infection with respect to the evaluation of the efficacy of antifungal drugs, and may also be used for the study of the immunology of dermatophytoses and of dermatophyte morphogenes

Experimental model of Candida Albicans (serotypes A and B) adherence In Vitro

The adherence of Candida albicans is considered an important virulence factor since it determines the colonization of the yeast in various regions of the host, being the initial cause of the infection. In this work we studied the adherence of C. albicans (serotypes A and B) to HeLa and Vero cells after culture for 18 h and 30 h in chemically defined medium (YNB) plus carbohydrate sources such as glucose, sucrose, maltose, galactose and mannose (500 mM). Each assay was performed in triplicate. The best results were obtained with the medium containing glucose. The adherence was greatest in 18 h cultures at 37§C and at 1 h contact time. The interaction of yeast cells with the host cells was studied by scanning microscopy.

Time course of virus-like particles (VLPS) double-stranded RNA accumulation in toxigenic and non-toxigenic strains of Aspergillus flavus

Two strains of Aspergillus flavus, non-toxigenic NRRL 6550 and toxigenic NRRL 5940, were studied over a period of 44 days, in order to detect the presence of virus-like particles (VLPs) by means of electron microscopy (EM) and nucleic acids electrophoresis. Only the toxigenic strain contained VLPs, presenting three-segmented dsRNA. An increase in VLPs number was observed during the exponential phase of fungal growth, up to day 12 of culture; after this, higher levels of aflatoxin production in toxigenic NRRL 5940 mycelia occurred in parallel with decreased VLPs replication.

Mycoflora and aflatoxin/fumonisin production by fungal isolates from freshly harvested corn hybrids

The mycoflora of 3 hybrids of freshly harvested corn grains collected from three regions of the state of São Paulo, Brazil (Assis, Capão Bonito and Ribeirão Preto) was investigated. A total of 66 samples were analyzed focusing on the influence of abiotic factors (moisture content, water activity, temperature and rainfall) on both the prevalence of Aspergillus flavus and Fusarium moniliforme, and the ability of these genera isolates to produce aflatoxins and fumonisins, respectively. In the three surveyed regions, the fungal population comprised mainly Fusarium spp., Penicillium spp., Aspergillus spp. and 2 others filamentous fungal genera, which were isolated from corn kernels showing water activity of 0.30 to 0.99 and moisture content of 5.0(per cent) to 20.2(per cent). Among the genera Fusarium and Aspergillus, the most frequent species were F. moniliforme and A. flavus, respectively. Concerning the toxigenic potential of F. moniliforme, all isolated strains (40) produced fumonisins at 20 mg/g to 2168 mg/g (FB1) and/or 10 mg/g to 380 mg/g (FB2). From the 10 A. flavus isolates, 6 strains (60.0 per cente) produced aflatoxins at 615 mg/kg to 30.750 mg/kg (AFB1) and/or 11 mg/kg to 22 mg/kg (AFB2).