Molecular characterization of Listeria monocytogenes isolated from foods

A total of 30 strains of "Listeria monocytogenes" isolated from different foods (16 of different kinds of sausage, 14 cheese) purchased at groceries of São Paulo City were ribotyped and analysed for the presence and expression of hemolysin gene and production of phosphatidylinositol-specific phospholipase C-PI-PLC enzyme. The "L. monocytogenes" strains were differentiated into six ribotype classes. A total of 13 (43.3(per cent)) from these strains belong to the same ribotype (ribotype I), and was coincident to the ribotype of the standard "L. monocytogenes" prototype strain (ATCC-15313). The hemolytic activity was observed in 29 (96.7(per cent)) strains when incubated at 37ºC, but not at 4ºC. The direct colony hibridizatioon method for hemolysin gene detection showed a positive reaction with other "Listeria" spp. The PI-PLC was produced by (90(per cent)) of the strains analysed. There was no correlation between the six identified ribotypes and the virulence facors (hemolysin and PI-PLC) studied

Campylobacter jejuni em carcaças de frangos, avaliaçäo da eficiência de meios de plaqueamento e enriquecimento seletivo no seu isolamento / Efficacy of direct plating and selective enrichment media for detecting Campylobacter jejuni in fresh eviscerated whole market chickens - São Paulo - Brazil

Com o fim de se testar a necessidade de enriquecimento seletivo para o isolamento de Campylobacter jejuni a partir de carcaças de frangos, foram empregadas duas metodologias, o plaqueamento direto em ágar Campy-BAP (CBAP) e ágar Vancomicina, trimetoprim, polimixina B - sulfato ferroso, metabissulfito de sódio e piruvato de sódio (VTP-FBP) e o enriqueciemtno seletivo em meio de Doyle-Roman (DR) e de Preston (P). Os resultados obtidos foram comparados estatisticamente através do teste x² fixando-se em 5 por cento o nível de rejeição. A significância das diferenças dos resultados obtidos, entre os dois meios de plaqueamento direto CBAP e ágar VTP-FBP ou após o enriquecimento seletivo nos meios de DR e P seguidos do plaqueamento em ágar CBAP, evidenciou não existir diferenças significativas. As combinações dos meios de enriquecimento seletivo DR E P com ágar VTP-FBP, mostraram haver diferenças estatisticamente significantes em relação aos demais procedimentos, exceto entre as associações P/CBAP e P/VTP-FBP. A combinação DR/VTP-FBP mostrou ser a menos eficiente. A DR/CBAP foi a que apresentou melhores resultados frente as demais associações e estaticamente foi tão eficiente quanto os meios de plaqueamento direto. Considerando-se que os resultados estatísticos mostraram não haver diferenças significantes entre a utilização do plaqueamento direto e o enriquecimento seletivo, concluímos não haver necessidade do enriquecimento seletivo para o isolamento de C. jejuni a partir de carcaças de frangos.

Análise bacteriológica de carnes suínas comercializadas em açougues da cidade de Säo Paulo / Bacteriological quality of fresh pork

Foram adquiridas 30 amostras de carne suína em açougues da cidade de São Paulo e submetidas à análise bacteriológica para a contagem de bactérias aeróbias facultativas psicrotróficas e mesófilas, do Número Mais Provável (NMP) de coliformes totais, fecais e de E. coli e contagem e identificação de Staphylococcus aureus enterotoxigênicos. Na contagem de bactérias facultativas psicrotróficas 17 (56.7 por cento) amostras apresentaram valores iguais ou superiores a 10(6) UFC/g, podendo ser considerados altos. Para a contagem de bactérias aeróbias facultativas mesófilas 13 (43.3 por cento) amostras continham números acima do máximo permitido (3x10(6) UFC/g) pelos padrões adotados pela Secretaria de Estado da Saúde de São Paulo. Quanto aos coliformes totais, em 18 (60 por cento) amostras os NMPs obtidos foram superiores a 10ü/g. Com relação ao NMP de coliformes fecais e, em particular, E. coli, observa-se que 7 (23.3 por cento) amostras apresentaram valores acima do máximo permitido (3x10²/g) pelos padrões adotados pela Secretaria de Estado da Saúde de São Paulo. Na contagem de S. aureus 6 (20 por cento) amostras revelaram-se com valores iguais ou superiores a 10ü UFC/g. Em uma das cepas isoladas verificou-se a capacidade de produzir enterotoxina do tipo B.

Condiçöes bacteriológicas de amostras de leite de lactários obtidas em hospitais / Bacteriological quality of dispensary milk from hospitals

De 8 hospitais do Município de São Paulo, foram coletadas 5 amostras de leite de lactários perfazendo um total de 40 amostras. Foram realizadas as contagens de bactérias aeróbias facultativas mesófilas, contagem e identificação de Staphylococcus aureus sendo as cepas isoladas submetidas à verificação da capacidade produtora de enterotoxina, determinação do Número Mais Provável (NMP) de bactérias coliformes totais, fecais e de E. coli além da pesquisa de Salmonella. A contagem de bactérias mesófilas variou de 1,0 x 10º a 6,8 x 10(7) UFC/ml do alimento. Para as bactérias coliformes totais o NMP variou de 0,03 a 24/ml enquanto para os coliformes fecais e E. coli o NMP mínimo foi de 0 e o máximo de 24/m. de leite lactário. Quanto as contagens de S. aureus, estas variaram de 0 a 85 UFC/ml do alimento, sendo que de uma amostra foram isoladas cepas produtoras de enterotoxina do tipo C. Em nenhuma amostra foi detectada a presença de Salmonella sp.

Grupos de bactérias isoladas a partir de amostras de fígado de bovino / Group of bacteria isolated from samples of bovine liver

Foram isoladas 50 amostras de fígado de bovino comercializado em feiras livres do Município de Säo Paulo. Foram efetuadas as contagens de bactérias psicrófilas, contagem e identificaçäo de Staphylococcus aureus, determinado o Número Mais Provável (NMP) de bactérias coliformes totais, fecais e de E. coli. A contagem de bactérias psicrófilas e mesófilas variou de 3,2x10**3 a 2,03x10**7/g e de 4,5x10**5 a 2,8x10**7/g do alimento, respectivamente. Para as bactérias coliformes totais o NMP mínimo foi de 90 e o máximo de >2,4x10**5/g, enquanto que para os coliformes fecais e E. coli, em particular, os resultados variaram de <9 a >2,4x10**5/g. Quanto às contagens de S. aureus, estas variaram de 50 a 5,0x10**4/g do produto analisado. Das 50 amostras examinadas 29 (58%) apresentaram valores superiores ao máximo estabelecido nos padröes adotados pelo Ministério da Saúde e Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo, os quais permitem a presença de, no máximo, 3,0x10**6/g de bactérias mesófilas. Dezenove (38%) amostras apresentaram-se dentro dos valores permitidos pelos padröes acima referidos que toleraram, no máximo, a presença de 3,0x10**2/g de microrganismos coliformes fecais no alimento em questäo

Staphylococcus aureus enterotoxigênicos isolados a partir de leite de vacas mastíticas / Enterotoxigenic Staphylococcus aureus isolated from milk of mastitic cows

Foram submetidas ao "California Mastitis Test" (CMT) 468 vacas pertencentes a 6 rebanhos produtores de leite tipo B da regiäo do Município de Barretos, Säo Paulo. Diante de resultados positivos ou suspeitos, foi colhido leite dos quartos reagentes e realizada a pesquisa e identificaçäo de S. aureus. As cepas isoladas foram submetidas à verificaçäo da capacidade produtora de enterotoxina dos tipos A, B, C, D, e E. Das 468 fêmeas analisadas, 56 (11,94%) foram reagentes ao CMT. Destas, 25 (44,6%) amostras de leite revelaram-se positivas para cepas de S. aureus, 2 (8,0% das quais apresentaram-se como produtoras, concomitantemente, de enterotoxinas dos tipos A e E

Salmonellas em amostras de fígado de bovino e avaliaçäo da eficiência de meios de enriquecimento seletivo, tempo e temperatura de incubaçäo no seu isolamento / Salmonella in samples of beef liver and evaluation of efficiency of enrichment broths, time and temperature of incubation in its isolation

A partir de amostras de fígado de bovino, adquiridas em feiras livres do Município de Säo Paulo, foram isolados 14 sorótipos de bactérias do gênero Salmonella classificados com S. san-diego, S. derby, S. agona, S. typhimurium, S. montevideo, S. oranienburg, S. infantis, S. infantis 0:14 +, S. tenessee, S. newport, S. dublin, S. panama, S. anatum e S.minnesota. S. infantis revelou-se predominante, tendo sido isolada de 25% das amostras positivas. Foram utilizados os caldos de enriquecimento tetrationato (TT) e selenito cistina (SC), incubados à temperatura de 35-C e 43-C por 24 horas. O enriquecimento em caldo TT incubado a 43-C durante 24 e 48 horas, apresentou o maior grau de positividade, 66,7% e 75%, respectivamente. Ao se incubar o caldo TT à temperatura de 35-C por 24 e 48 horas, obteve-se um percentual de recuperaçäo inferior ao obtido pelo mesmo caldo incubado sob as condiçöes anteriormente citadas. Em relaçäo ao caldo SC, tanto as temperaturas como os tempos de incubaçäo näo apresentaram diferença aparente na recuperaçäo de salmonelas, sendo inferior ao obtido com o caldo TT a 43-C. Das 50 amostras analisadas 24 (48%) apresentaram-se contaminadas por Salmonelas, estando assim em desacordo com os padröes microbiológicos federais e os estabelecidos pela Secretaria de Estado da Saúde de Säo Paulo